Сколько делается гистология: Где сделать гистологию кисты яичника, шейки матки, молочной железы, полипа эндометрия?

Содержание

Где сделать гистологию кисты яичника, шейки матки, молочной железы, полипа эндометрия?

Гистологические исследования в гинекологии входят в перечень ключевых методик лабораторной диагностики женских заболеваний. Женщин, которым назначают эту процедуру, всегда интересует – что означает данный термин, зачем делают и как берут гистологию, что показывают ее результаты и какова их достоверность.

Ответы специалистов высокой квалификации на все эти вопросы готов предоставить своим клиентам медицинский центр «МедБиоСпектр». В нашей клинике на Каширке в Москве или в филиале в г. Раменское вы сможете по доступной цене сделать мазок на гистологию, получить консультации опытных врачей, пройти комплексное обследование мочеполовой системы или всего организма.

Суть процедуры

Буквально перевод с греческого термина «гистология» означает «учение о тканях». Анализ основан на изучении под микроскопом клеток биопата и позволяет с высокой точностью получить сведения о структуре и состоянии клеток пораженной ткани.

Такие данные необходимы для постановки безошибочного диагноза, выбора метода лечения и контроля эффективности терапии.

При гистологическом исследовании в качестве биоматериала может быть использован образец любой ткани – слизистой, кожи, мышцы. В гинекологии наиболее часто назначают гистологию для исследования кисты яичника, тканей плода, новообразования матки и шейки матки, подтверждения наличия воспалительных процессов и выявления иных патологий.

Показания

В практической гинекологии основными показаниями для направления пациентки на гистологическое исследование служат:

внезапные выкидыши – для выявления причины;
замершая беременность;
обнаруженные опухолевидные заболевания – для определения их морфологической характеристики;
выскабливание полости матки – для изучения полученного материала.

Обычно также исследуют образец после иссечения полипа эндометрия – стоимость гистологии в клинике «МедБиоСпектр» невысока, а результат анализа помогает выявить признаки пролиферации и оперативно начать борьбу с онкологическим заболеванием.

Аналогично звучит ответ на вопрос – зачем делают гистологию молочных желез? Биопсия в данном случае исполняет роль уточняющей диагностики и позволяет установить доброкачественность либо злокачественность образования. Поскольку рак груди получает все большее распространение, подобный анализ очень важен для здоровья женщины.

Особенности процедуры

В нашем медицинском центре в Москве анализ гистологии шейки матки или иных органов проводится по многократно апробированному алгоритму:

забор материала с помощью одного из способов биопсии – щипковой, пункционной, эксцизионной, взятие мазка, кюретаж;
фиксация образца в специальном растворе, обработка его парафином и получение тончайших срезов;
окрашивание среза красителем и изучение его с помощью электронного либо светового микроскопа.

То, сколько дней делаются результаты гистологии, зависит от ситуации. Экспресс-анализ, необходимый для определения объема срочного хирургического вмешательства, может быть выполнен в течение одного или нескольких часов. Наилучшие же результаты дает стандартная гистология, которая занимает 7-10 дней. Гистология – высокоточный метод диагностики, и при соблюдении всех правил проведения вероятность ошибки практически исключена.

По телефону клиники «МедБиоСпектр» +7 (495) 231-26-13 вы сможете узнать, сколько стоит отправить на гистологию материал и каков порядок проведения процедуры, а также записаться на прием к врачу для получения предметной консультации.

Гистологические исследование матки и эндометрия — биопсия с гистологическим исследованием

Гистологический анализ широко применяется для диагностики онкологических заболеваний. Он дает высокоточную информацию о типе клеток взятого материала. Такой метод обследования основывается на изучении тканей, полученных в результате различных процедур: биопсии, среза, пункции, мазка.

Что диагностируют с помощью гистологического анализа

Гистологический анализ призван помочь в диагностике:

злокачественных, доброкачественных опухолей – это основное его назначение;
причин женского бесплодия;
заболеваний ЖКТ воспалительного характера;
оценки характера патологического процесса – воспалительного, дегенеративного, предракового;

аутоиммунных, инфекционных заболеваний;
заболеваний спинного, головного мозга.

Кроме того, такой метод обследования актуален в рамках пренатальной диагностики. Он позволяет своевременно уточнить состояние здоровья плода и подтвердить/опровергнуть предположение о наличии внутриутробной патологии.

Значение анализа в гинекологии

Гистологическое исследование биопсийного материала имеет особое значение в гинекологии. Оно не только позволяет изучить ткани шейки и тела матки, но и дает возможность получить точную информацию о состоянии будущего малыша.

Этот диагностический метод в обязательном порядке применяется после выкидыша или прерывания замершей беременности. Это позволяет выявить причины патологии и принять меры для профилактики в будущем.

Кроме того, гистологию проводят женщинам, страдающим от увеличения периода менструации, обильных выделений, болях в пояснице и внизу живота. При подозрениях на заболевания воспалительного характера, опухоли, кондиломы, дисплазии и ряд других заболеваний такой анализ также является неотъемлемой частью диагностических мероприятий. Гистологию яичниковой ткани проводят для определения типа опухолей.

Как выполняется анализ

В связи с тем широким перечнем заболеваний, в диагностике которых может помочь гистологическое исследование, забор тканей проводится разными способами.

Биопсия с гистологическим исследованием – основной способ получения материала. Она может осуществляться в результате хирургического вмешательства и носит название инцизионной биопсии. Эксцизионная представляет собой изучение опухоли или части тканей, полностью удаленных хирургически.

Забор вне оперативного вмешательства выполняется с помощью щипчиков, иглы или небольшой трубочки, кюреты, инструментов для забора мазка – врач выбирает способ в зависимости от того, какие именно ткани подлежат изучению.

Далее материал направляется в лабораторию и исследуется с помощью электронного микроскопа. Предварительно его обрабатывают специальным веществом и проводят уплотнение парафином, нарезают тонкими срезами и окрашивают. Специалист получает возможность увидеть структуру причинного участка, определить характер патологических изменений. Срок готовности результатов составляет около 7-10 дней.

Если требуется получить данные быстрее, применяют ускоренную методику – материал быстро замораживают, нарезают и изучают под микроскопом. В этом случае результатов придется ждать не более часа.

Где сдать анализ на гистологию?

Сдать гистологический анализ в Москве вы можете в клинике «Семейный доктор».

Забор материала выполняют квалифицированные специалисты с соблюдением всех условий и норм. У нас вы можете сдать анализ в комфортных условиях и получить результаты в регламентированные сроки.

Мы работаем в выходные и праздничные дни. Запись по телефону контакт-центра +7 (495) 775 75 66 и в регистратуре клиники.

Стоимость

врач акушер-гинеколог, врач ультразвуковой диагностики, ведущий специалист клиники

врач акушер-гинеколог, врач ультразвуковой диагностики

врач акушер-гинеколог, врач ультразвуковой диагностики, ведущий специалист клиники

врач акушер-гинеколог, врач ультразвуковой диагностики

4 0

Гистология: что это за анализ?

Взятие биологического материала и его тщательный гистологический анализ очень значимы во многих отраслях медицины. С целью выявления патологии может назначаться, например, гистология родинки, шейки матки, органов пищеварительного тракта, эндокринной системы и так далее. На наши вопросы о гистологии ответил врач — онколог-маммолог «Клиники Эксперт» Воронеж Сергей Викторович Ежов.

— Сергей Викторович, расскажите, что это за анализ — гистология? В чём его суть?

— Гистологический анализ — это высокоточный метод исследования, позволяющий определить патологическое отклонение в строении ткани. Данный метод используется во многих областях медицины, но его основная суть заключается в том, что с помощью этого метода можно диагностировать наличие злокачественных образований, определить их структуру, а также стадию патологического процесса.

— Что может являться биоматериалом для гистологического исследования?

— Биоматериалом может служить та или иная подозрительная ткань (кожа, слизистая оболочка, мышца, кость), взятая при помощи биопсии, либо препарат, полученный в результате хирургического вмешательства.

— Когда назначается гистология?

— Как я уже говорил, гистологическое исследование может применяться во многих направлениях медицины, но особенная его ценность заключается в определении природы и характера изменений в ткани при малейшем подозрении на онкологический процесс. Также это исследование проводят перед назначением противоопухолевой терапии для разработки плана лечения и во время лечения с целью контроля его эффективности.

— Что показывает гистология?

— Гистологический анализ даёт возможность обнаружить воспалительные процессы в ткани, установить природу того или иного новообразования (т. е. доброкачественное оно или злокачественное), определить уровень злокачественности, а также выявить локализацию первичного опухолевого очага. Надо понимать, что расшифровкой результатов гистологического исследования должен заниматься только специалист. Я бы не рекомендовал пациентам делать это самостоятельно.

Биопсия

— Как сдать анализ на гистологию? Нужна ли специальная подготовка?

— Перед тем, как провести гистологическое исследование, необходимо выполнить биопсию и отправить полученный при этом материал (биоптат) на анализ. Как таковой подготовки биопсия не требует, существует лишь ряд ограничений и рекомендаций, которых нужно придерживаться пациенту накануне и во время забора биоптата. Важно поставить врача в известность обо всех принимаемых препаратах. Накануне исследования необходимо отказаться от лекарственных средств, влияющих на свёртываемость крови (по согласованию с доктором, назначившим их), а также сообщить врачу, который будет выполнять биопсию, о наличии аллергии. Нежелательно проведение данной манипуляции у женщин в дни менструации. Противопоказано употребление алкоголя.

— Как проводится гистология?

— Полученный при биопсии материал помещается в формалин и направляется на гистологическое исследование в патоморфологический центр. Там материал заливается парафином (чаще всего). После остывания, отвердевания делаются тонкие срезы, на которые наносятся различные реактивы для детального изучения ткани под микроскопом врачом-патоморфологом.

— Сколько делается гистологический анализ?

— Если результат очевидный и не вызывает сомнений, выдача заключения производится в среднем через 7-10 дней. При возникающих сомнениях, подозрениях в точности поставленного диагноза препарат могут изучать дольше.

— Бывают ли ошибки в результатах гистологии?

— К сожалению, особенно в небольших населённых пунктах, могут возникать проблемы с качеством проведения гистологического анализа. Это связано с разными причинами (отсутствие врачей, оборудования, расходных материалов). Но в случае появления сомнений в правильности гистологического заключения обычно назначается пересмотр готовых препаратов в другом патоморфологическом центре.

Хотите больше узнать о других видах анализов? Читайте статьи в нашей рубрике
Записаться на приём к онкологу можно здесь
ВНИМАНИЕ: услуга доступна не во всех городах

Беседовала Марина Воловик

Редакция рекомендует:

Предрак: бояться или не обращать внимания?
У страха глаза велики. Так ли опасна миома?
Рак груди — не приговор!

Для справки:

Ежов Сергей Викторович

В 2007 году окончил лечебный факультет Курского государственного медицинского университета.

2007 — 2009 гг. — клиническая ординатура по специальности «Онкология» в Медицинском радиологическом научном центре РАМН г. Обнинск (сегодня — МРНЦ им. А.Ф. Цыба — филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России).

В настоящее время — врач — онколог-маммолог в «Клинике Эксперт» Воронеж.

Приём ведёт по адресу: ул. Пушкинская, 11.

Гистологическое исследование опухолей| Блог UNIM

Точная постановка диагноза «рак» невозможна без проведения гистологического анализа.

Гистологическое исследование опухолей является одним из самых достоверных и важных диагностических методов. Гистологическое исследование проводят врачи-патоморфологи, оценивая под микроскопом материал после биопсии (непосредственно фрагмент опухоли) или же операционный материал (удаленный орган или его часть). В дальнейшем при необходимости используются дополнительные методы исследования (иммуногистохимия (ИГХ) и молекулярные исследования).

Данное исследование проводится как для выяснения происхождения опухоли, так и для определения стратегии будущего лечения. Вероятность назначения неправильного лечения велика при отсутствии информации о том, что из себя представляет обнаруженная опухоль. Нельзя ориентироваться лишь на клиническую картину, результаты методов визуализации (рентген, КТ, МРТ) или анализов крови. Зачастую онколог не знает, с чем имеет дело, и может лишь высказать свои предположения, поставив диагноз со знаком «?». Тогда и назначается биопсия с последующим морфологическим исследованием.

Морфологическое исследование является заключительным этапом в диагностическом поиске и позволяет онкологам безошибочно выбирать между тем или иным курсом химиотерапии, или же совсем от нее отказаться в случае получения заключения о доброкачественном процессе.

Кроме 100% точности диагноза, в отдельных случаях гистологическое исследование позволяет расширить, или же наоборот, ограничить объем хирургического вмешательства. Приведем несколько примеров.

Опухоль молочной железы. Первая мысль, которая возникает у женщины – рак! Да, это возможно, но… Существует ряд оговорок. После какого метода исследования был выставлен диагноз? Если это цитологическое исследование (мазки), то есть высокая вероятность ошибочно выставленного диагноза. Это обусловлено тем, что даже «нормальные» клетки эпителия после нанесения на стекло (грубо говоря «размазывания») могут принимать атипичный вид и вводить цитолога в заблуждение. В таком случае просто необходимо гистологическое или иммуногистохимическое (ИГХ) исследование биоптата («кусочка опухоли») врачом-патологоанатомом, который достоверно выставит диагноз. Ведь вероятность того, что опухоль доброкачественная, также есть. В таком случае удалять всю молочную железу и калечить пациентку нет необходимости, а можно ограничиться лишь секторальной резекцией (удалить лишь пораженную часть железы). Или же в случае получения диагноза «лимфома» (такое тоже возможно), вообще не проводить оперативного вмешательства.

Поражение желудка. Опять же, есть вероятность того, что это рак. Но также не исключена и лимфома. В ее случае нет необходимости удалять желудок, а можно ограничиться лишь химиотерапией.

Все зависит, конечно, от качества материала, взятого для исследования и квалификации патоморфолога. Ни один диагноз опухоли, злокачественной или доброкачественной, не выставляется лишь одним врачом. В таких случаях принцип коллегиального просмотра очень важен. Минимум два мнения и четыре глаза. Ведь то, что видит один врач, может пропустить другой или не обратить на это внимания.

Подводя резюме под вышесказанным, можно выделить несколько последовательных этапов до момента постановки правильного диагноза:

— обращение пациента к клиническому врачу/онкологу;

— полное и всестороннее обследование с выявлением опухолевого очага;

— биопсия/удаление образования с его доставкой в лабораторию патоморфологии для морфологической диагностики;

— вместе с материалом предоставляются как можно более полные клинические данные и результаты методов обследования.

Как уже было сказано выше, финальной точкой в диагностическом поиске для клинических врачей является заключение патоморфолога.

Стоимость и срок исследования

* Организация и оплата доставки сырого материала (не в блоках) осуществляется клиентом.

По всем возникшим вопросам Вы можете проконсультироваться у нашего медицинского администратора по телефону: 8-800-555-92-67 или написать нам в WhatsApp: +7 925 740 05 87

Гистологическое исследование. Что это такое?

Часть 1. Отбор и фиксация проб

Автор: Ганкина Ю. В., ветеринарный врач-патолог. Ветеринарная клиника неврологии, травматологии и интенсивной терапии, г. Санкт-Петербург.

Думаю, многие примерно представляют, что гистология – это наука о тканях (все врачи проходили курс гистологии в вузах, но было это, чаще всего, достаточно давно). Соответственно, когда доктор отправляет какой-то материал на гистологическое исследование, он понимает, что исследовать будут ткани, которые он отправил. Казалось бы, все и так понятно, но тем не менее возникает множество вопросов как от направляющих материал врачей-клиницистов, так и от врачей-патологов.
Зачем писать направление? Что там писать (почему так много, неужели патологи сами не увидят в микроскопе, что я прислал)? Зачем столько формалина? Почему не подходит формалин с белым осадком, который у нас хранился с времен основания клиники? Почему не спирт? Почему так долго? Для чего нужны дополнительные окраски? Почему вы не делаете электронную микроскопию, хотя у вас есть компьютер? И многое, многое другое.
В серии своих статей я постараюсь ответить на некоторые вопросы врачей-клиницистов, объяснить, что же происходит с материалом после попадания в недра лаборатории и что патологи пытаются в нем рассмотреть.

Что оправляется на гистологическое исследование?

Первое, что приходит в голову, когда заходит речь о гистологии, – это опухоли (любые опухоли: кожные, внутренних органов, нервной системы, костей и пр.

). Конечно, многие врачи предпочитают проведение цитологической диагностики перед хирургическим вмешательством, чтобы затем опираться на нее для определения типа неоплазии. Однако стоит помнить, что ряд неопластических процессов не может быть доподлинно определен при цитологическом исследовании. Зачастую такое исследование имеет погрешность (она может быть различной в зависимости от типа опухоли, ткани и учитываемых в исследовании критериев, согласно литературным источникам). Это касается и новообразований молочных желез, которые составляют большинство биоптатов. Причина в основном состоит в том, что для цитологического исследования предоставляется весьма небольшая часть материала.
Только при гистологическом исследовании могут быть определены архитектоника тканей (в ряде случаев это является важной прогностической информацией), границы неопластического процесса, инвазия лимфатических сосудов и окружающих тканей, хотя некоторые типы новообразований можно с легкостью определить цитологически или цитологическое исследование может дополнять гистологическое (например, в случае мастоцитомы, а иногда – лимфомы и некоторых других).

Первый вопрос, на который должен ответить клиницист: «Что именно из всего операционного материала необходимо оправить на исследование?». Ведь иногда опухоли бывают очень большими, например большой орган или обширный пласт кожи, или, наоборот, очень маленькими. Встречаются идеальные условия, когда патолог находится в соседнем с операционной кабинете, что позволяет ему самому решать, с чем дальше иметь дело. В таком случае материал отправляется целиком, иногда даже до фиксации (допускается его охлаждение (не заморозка!) в течение 24 часов). Однако чаще всего отбором, фиксацией, вырезкой, нарезкой и микроскопией занимаются совершенно разные люди (хорошо, если они имеют возможность связаться друг с другом), поэтому важно знать основные правила отбора материала.

Основные правила отбора материала

Толщина образцов должна быть не более 1 см (иногда 2 см)

Если опухоль располагается в толще кожи, не содержит различимой капсулы, имеет умеренную плотность и диаметр до 1 см, такой образец можно отправить целиком.
Если новообразование (даже небольшого размера – 1–2 см) очень плотной консистенции и имеет плотную капсулу, то фиксатор в него проникать будет тяжелее и дольше или только при определенной температуре. Это может привести к тому, что ткань в центре образца не профиксируется (что особенно важно в том случае, если он будет доставлен в лабораторию в срок, превышающий 1 сутки), поэтому такой образец следует надрезать, причем чем плотнее ткань, тем более тонкие фрагменты нужно получить. В случае, когда образец большой (орган целиком, например селезенка), его также стоит нарезать «книжечкой» на множественные фрагменты толщиной до 1 см (рис. 1).
При опухолевых процессах часто имеются области некроза – обычно в центре неоплазии (но могут быть исключения). Данные фрагменты следует отбирать в последнюю очередь, а в первую очередь нужно брать участок без некроза, если таковой имеется. То же самое касается выраженного гнойного воспаления (если только оно не является основным изменением).
При некоторых неопластических процессах стоит отправлять дренирующий лимфатический узел (молочные железы, некоторые новообразования конечностей). В таком случае этот узел необходимо отправить отдельно, так как постоперационно его может быть сложно обнаружить. Кроме того, не следует забывать, что, например, в одной молочной железе может быть несколько совершенно различных образований, поэтому (в зависимости от имеющейся возможности) либо железа отправляется целиком с указанием расположения образований, либо производится отбор нескольких образцов. В последнем случае каждый из образцов следует поместить в отдельные подписанные контейнеры, а в сопроводительном документе обязательно указать, сколько было отправлено образцов материала, какой это материал и количество контейнеров, поскольку неидентифицированный материал может быть расценен при вырезке как одно новообразование и часть проб в работу может не пойти.

Принципы оценки хирургических границ

Оценивать хирургические границы важно для определения прогнозов, возможности возникновения повторного роста новообразования.

Многие клиницисты желают видеть эту информацию в заключении от патолога. Так ли все просто? Пожалуй, нет. Это сложная задача, в решении которой должны участвовать три составляющие гистологического процесса: врач, который отправляет материал, лаборант/врач/техник, который будет проводить вырезку материала, и патолог, который будет оценивать стекло.
Вырезка – процесс, осуществляемый с фиксированным материалом в лаборатории для его последующей гистологической проводки, нарезки и фиксации. С этой целью отбираются кусочки малого размера (толщиной около 2–3 мм), позволяющего поместить их на стандартное предметное стекло.
Главная проблема заключается в предоставлении возможности участникам данного процесса контактировать друг с другом для достижения взаимопонимания.

Основные методы оценки хирургических границ:

Метод поперечных срезов. Наиболее распространенный метод оценки хирургических границ (метод половин и четвертей). Для этого образец сначала разрезается по короткой оси, делаются срезы полученной области. Затем каждую половину разрезают по длинной оси, таким образом можно получить срезы новообразования в другой плоскости (это может быть один срез четверти новообразования либо несколько тангенциальных (по касательной) срезов в случае крупного образования) (рис. 2). Данный метод наиболее часто используется в рутинной практике, но с его помощью невозможно полностью оценить хирургические границы. Распространение опухоли может быть неравномерным, и клетки могут не попадать в срезы, полученные данным способом.
Метод параллельных срезов. Подобно тому как материал нарезается для фиксации, образец нарезается на множественные фрагменты. Разрезы делаются параллельно, через равные промежутки (рис. 1). Таким образом, качество оценки хирургических границ напрямую зависит от количества таких разрезов, а увеличение этого количества может отражаться на стоимости исследования.
Метод тангенциальных срезов. Множественные тонкие (2–3 мм толщиной) фрагменты отрезаются от края образца по касательной. При обнаружении неопластических клеток в таких образцах новообразование считается удаленным не полностью. Данный метод хорош и может быть более чувствительным, чем метод поперечных срезов, но он не позволяет оценить степень удаления края опухоли от хирургических границ. Для наиболее полной оценки предпочтительным является совмещение методов поперечных и тангенциальных срезов.

При любом методе оценки хирургических границ важной информацией может служить знание о том, как располагалась опухоль относительно тела животного и в каком точно месте имеются неопластические клетки на границе. Для этого может быть удобным использование фотоматериала и красителей.

Для маркировки образцов можно применять красители, которыми удобно отмечать границы материала, поверхности, специальные участки. Они видны в гистологических препаратах и не влияют на качество окраски. Существуют специальные гистологические красители, но можно также использовать водостойкие чернила.

Краски наносят специальными кисточками или ватными палочками, после чего им дают высохнуть в течение 5–10 мин. Далее материал необходимо поместить в фиксатор (от момента отбора материала до помещения его в формалин должно пройти не более 30 минут). Если образец крупный, после окраски и просушки его стоит разрезать. В направлении указывают, какими цветами отмечены те или иные границы/участки и пр. Применение красителей более предпочтительно, чем использование шовного материала разного цвета, с разным количеством стежков.
При отборе биоптатов из желудочно-кишечного тракта отбирают материал из места поражения. Не стоит брать биоптаты из других участков, т. к. они могут сильно отличаться от основного поражения, и в таком случае ответ на исследование может удивить клинициста. При эндоскопической биопсии осуществляют забор материала из слизистой оболочки стенки желудка или кишки с помощью специальных биопсийных щипцов. В идеале для получения адекватного образца ткани биопсийные щипцы надо, проведя через эндоскоп, ориентировать перпендикулярно слизистой органа.

Как правило, эту процедуру достаточно легко выполнить в просвете желудка, но тяжело – в более узких участках, например в двенадцатиперстной кишке. В случае отсутствия специфических повреждений отбирают 6–8 образцов слизистой оболочки в области дна и тела желудка, несколько образцов антрального отдела. Если было обнаружено явное патологическое изменение, такому материалу отдают предпочтение в первую очередь.

При обнаружении язвенного поражения материал отбирают из периферии и центра (при этом нельзя допускать перфорации стенки). Несмотря на то что центральная часть язвы содержит некротическую ткань, диагностически значимые образцы могут быть получены и оттуда.

При выявлении поражений, лежащих глубже слизистой оболочки, можно применить технику, при которой осуществляют многократный забор материала из одного и того же места, углубляясь в стенку и достигая таким образом патологического очага (хотя в этом случае полнослойный забор более предпочтителен).
Биоптаты слизистой оболочки тонкой кишки должны быть достаточно глубокими, чтобы в образце содержались ворсинки на всю длину и область крипт. Следует помнить, что при отборе очень плотного материала образцы могут иметь слишком мелкий размер и быть сильно подвержены артефактам от травмирования браншами щипцов (артефакты сдавливания). По рекомендациям Международной ветеринарной ассоциации мелких домашних животных (the World Small Animal Veterinary Association; WSAVA), в гистологическом описании следует указывать качество образцов для того, чтобы клиницист понимал, насколько точен диагноз и насколько правильно он проводил отбор материала.

Гистологическое исследование аутопсийного материала – последнее, по упоминанию у врачей, но не по значимости. «Человек, не прошедший специальную подготовку по ветеринарной патологии, не должен осуществлять вскрытие с идеей о том, что диагноз будет поставлен во время вскрытия» («A person not specially trained in veterinary pathology should not approach a necropsy with the idea that a diagnosis will be made during the post-mortem examination»; Terrell and Stacy, 2007). Зачастую диагноз не может быть доподлинно установлен до тех пор, пока не будет проведено гистологическое исследование. Материал в таком случае отбирается врачом-патологом. Следует помнить о правилах фиксации (см. далее) и толщине образцов. Как правило, весь материал от одного животного помещается в один контейнер. Некоторые органы фиксируются целиком: головной и спинной мозг (исключение составляют крупные животные, головной мозг которых может быть разрезан на 2–3 крупные части). Мелкие органы: гипофиз, надпочечники, щитовидные железы и пр. – помещают в гистологические кассеты, чтобы избежать утери (рис. 3). При отборе полых органов стоит ввести фиксирующую жидкость в просвет или разрезать его, оставив при этом область интереса интактной. Плоские фрагменты (стенка мочевого пузыря, диафрагма, стенка желудка) могут скручиваться, поэтому их нужно поместить на адсорбирующую подложку. Это может быть поролоновая подложка для гистологических кассет, если образец небольшого размера, или картон при наличии образцов крупного размера (материал просто кладут на подложку, при этом не требуется дополнительной фиксации иглами, швами) (рис. 4). При отборе мышц важно зафиксировать мышечные волокна, так как в процессе химической фиксации мышцы будут сжиматься, что скажется на дальнейшем микроскопическом виде, поэтому мышцы обязательно фиксируют на картонной или деревянной подложке (ею может быть деревянный шпатель) с помощью игл или специальных мышечных зажимов.

После того как ткань перестала «жить» (отдельно от организма, без специальных условий ткани существовать не могут), она начинает подвергаться разрушению под действием собственных ферментов и бактерий, поэтому, чтобы материал сохранился, его необходимо зафиксировать. Фиксация должна проводиться сразу после отбора (исключением может служить срочное гистологическое исследование замороженного материала, о чем речь пойдет позже, в таком случае проводится фиксация охлаждением). Наиболее частым методом фиксации является химическая фиксация с помощью различных веществ. Фиксация всегда приводит к большим или меньшим изменениям структуры и объема ткани, степень выраженности которых зависит от рН фиксатора, его концентрации, температуры, продолжительности воздействия и других факторов.

Концентрация ионов водорода фиксатора должна соответствовать таковой в тканях, в связи с этим фиксатор должен иметь рН, близкий к нейтральному. Слишком продолжительная фиксация приводит к значительному уплотнению материала, что в дальнейшем затрудняет его обработку (к вопросу о бессрочном хранении зафиксированного материала).

Рассмотрим некоторые фиксаторы:

Этиловый спирт – этот фиксатор иногда пытаются использовать при отсутствии других химических веществ. Быстро фиксирует ткани, осаждает белки, вымывает жиры, иногда применяется для выявления гликогена, железа, амилоида. Главным его недостатком является сильное пересушивание и уплотнение тканей, поэтому фиксация в спирте не должна превышать одних суток. Также стоит учитывать, что дальнейшая проводка после фиксации спиртом будет несколько отличаться от таковой при фиксации формалином, поэтому всегда нужно уточнять, является ли фиксация этиловым спиртом или другими фиксаторами на его основе приемлемой в вашей лаборатории.
Специальные фиксирующие жидкости:

Фиксатор Буэна используется чаще в экспериментальной патологии. Содержит пикриновую кислоту, окрашивающую образец, что в дальнейшем не мешает работе с ним. Продолжительность фиксации составляет 1–24 часа, после чего материал отмывают и переносят в спирт.
Фиксатор Дэвидсона. Содержит формалин, этанол и ледяную уксусную кислоту. Приводит к быстрому обесцвечиванию тканей, что затрудняет дальнейшую работу с ними. Фиксация не должна превышать 24 часов. Используется в экспериментальной патологии, хорошо подходит для фиксации глаз лабораторных грызунов.
Формалин (водный раствор формальдегида, стабилизированный метанолом) – самый недорогой и наиболее широко применяемый фиксатор. Используется 10%-й нейтральный забуференный формалин (указывается только процентное соотношение формальдегида). Если в требованиях лаборатории не указан другой фиксатор, то всегда для гистологического исследования используют именно его. В водных незабуференных растворах формальдегид со временем превращается в муравьиную кислоту, метиловый спирт и ацетон, которые ухудшают качество фиксации, как и выпадение белого осадка параформальдегида. Кроме того, забуференный формалин лучше сохраняет антигенные свойства ткани. Не стоит забывать, что формалин имеет резкий специфический запах, раздражает слизистые оболочки, является канцерогеном, поэтому любые работы с зафиксированными тканями должны проводиться только в перчатках и исключительно в вытяжном шкафу. При одновременном отборе материала для гистологического и цитологического исследований не следует подвергать стекла с цитологией действию паров формалина, необходимо максимально разделить нахождение этих двух типов материала. Длительность фиксации составляет 24–48 часов при комнатной температуре.

Соотношение объема фиксатора и фиксируемой ткани должно быть не менее 1:10–1:20.
Чаще всего объем жидкости лимитирован размерами тары (рис.

5), поэтому при отборе материала убедитесь, что подобранная тара имеет подходящий объем, который обычно указан на упаковке (объем образца можно оценить визуально, сравнить с объемом шприцев и пр.). Проследите, чтобы крышка банки была плотно закрыта. Не используйте банки с узким горлышком, т. к. после фиксации материал становится плотным и не может быть извлечен из таких емкостей (банку в подобных случаях разбивают или разрезают). Стеклянная тара не всегда идеальна, поскольку может разбиться при транспортировке. Контейнер можно положить в полиэтиленовый пакет (пакеты для продуктов с зажимом или специальные пакеты для биопроб), чтобы предотвратить вытекание фиксатора и загрязнение окружающих предметов. Обязательно нужно проследить за тем, чтобы проба при транспортировке не замерзла (если велика вероятность замерзания, к формалину можно добавить изопропиловый спирт из расчета 1 часть спирта к 10 частям формалина). Замерзание образца приводит к нарушению структуры ткани и часто к невозможности оценить ее гистологически, поэтому размороженные образцы не подходят для гистологического исследования.

При фиксации нужно проследить, чтобы органы, размещенные на дне или у края контейнера, профиксировались целиком (поверхность, обращенная к дну, может прилипнуть и не зафиксироваться, чтобы избежать этого, материал стоит встряхнуть или «отклеить» от дна). При фиксации сильно кровенаполненных органов (например, селезенки) кровь будет разбавлять фиксатор, поэтому требуется больший объем фиксатора или предпочтительнее сделать отмывание органа. Для этого орган помещается в соответствующий объем фиксатора (1:10, как обычно), но через 12 часов фиксатор меняют на новый.

Выводы

Информация, которая указана в данной статье, достаточно проста, но, к сожалению, врачи очень часто пренебрегают важными правилами, приведенными ниже, что делает исследования менее информативными.

Материал должен быть зафиксирован сразу после отбора пробы (в срок до 30 минут).
Для фиксации следует использовать только 10%-й нейтральный забуференный формалин (если лабораторией не указано использование другого фиксатора).
Толщина образца не должна превышать 1–2 см (используйте линейку для измерения толщины образцов).
Соотношение «ткань-фиксатор» должно составлять 1:10–1:20.
Не нужно замораживать образцы для гистологического исследования.

Продолжение следует

Литература:

Washabau R. J., Day M. J., Willard M. D., Hall E. J., Jergens A. E., Mansell J., Minami T. and Bilzer T. W. Endoscopic, Biopsy, and Histopathologic Guidelines for the Evaluation of Gastrointestinal Inflammation in Companion Animals. The WSAVA International Gastrointestinal Standardization Group. ACVIM Consensus Statement, J Vet Intern Med. 2010; 24:10–26.
Sontas B. H., Yüzbaşıoğlu Öztürk G., Toydemir T. F., Arun S. S., Ekici H. Fine-needle aspiration biopsy of canine mammary gland tumours: a comparison between cytology and histopathology. Reprod Domest Anim. 2012 Feb; 47(1): 125–30.
Handbook of small animal gastroenterology, 2003.
Day M. J., Bilzer T., Mansell J., Wilcock B., Hall E. J., Jergens A., Minami T., Willard M. and Washabau R. Histopathological Standards for the Diagnosis of Gastrointestinal Inflammation in Endoscopic Biopsy Samples from the Dog and Cat: A Report from the World Small Animal Veterinary Association Gastrointestinal Standardization Group. J Comp Path. 2008, Vol. 138, S1eS43.
Jubb, Kennedy, and Palmer’s pathology of domestic animals / edited by M. Grant Maxie. 6th Edition, 2016.
Kamstock D. A., et al. Recommended Guidelines for Submission, Trimming, Margin Evaluation, and Reporting of Tumor Biopsy Specimens in Veterinary Surgical Pathology. Veterinary Pathology. 48(1) 19–31.
Todd R. Tams, Clarence A. Rawlings. Small Animal Endoscopy, 3rd Edition, 2011.
Jоrg M. Steiner (ed.). Small Animal Gastroenterology, 2008.
Kiupel M. (ed.). Surgical pathology of tumors of domestic animals. Volume 1: Epithelial tumors of the skin, 2018.

Гистологические исследования — показания, анализы, результаты

directions

Гистологическое исследование представляет собой анализ биоматериала на тканевом уровне. Этот метод исследования является инвазивным, и его проводят только в случаях уже развившегося заболевания. При диагностике врач может определить точный метод лечения и выбрать необходимую тактику. Профилактическое направление очень важно для выявления ранних форм патологии. Своевременное обнаружение болезни позволит избежать ещё более разрушающих последствий для организма, поэтому лучше всего проходить все обследования вовремя. Сдать необходимые анализы Вы сможете в нашем медицинском центре.

Врачи-специалисты

Старшая медицинская сестра

Медицинская сестра

Медицинская сестра эндоскопического кабинета

Врач-терапевт

Анализ на коронавирус методом ПЦР. Результат в течение 24 часов, с момента поступления биологического материала в лабораторию

Наши клиники в Санкт-Петербурге

Медицентр Юго-Запад
Пр.Маршала Жукова 28к2
Кировский район

Автово
Проспект Ветеранов
Ленинский проспект

Получить подробную информацию и записаться на прием Вы можете по телефону +7 (812) 640-55-25

Методы гистологических исследований:

Биопсия – это изучение тканей и органов, которые были удалены во время хирургического вмешательства. При нём исследуются маленькие кусочки тканей и органов. С помощью этого способа можно выявить предопухолевую патологию.

Ни в коем случае не стоит забывать, что безобидные родинки могут оказаться злокачественной опухолью, а бородавки – раком. Только результаты гистологического исследования смогут ответить, какое это новообразование.

Показания к проведению исследования:

подтверждение либо установка диагноза;
контроль над заболеванием;
установление стадии опухоли.

С помощью гистологического исследования можно выявить возникновение полипа. Данное аномальное разрастание тканей образуется там, где есть слизистая оболочка – в носу, желудке, толстой и тонкой кишке, теле матки.

Полип желудка – редкое заболевание, которое невозможно определить без биопсии по симптомам. Существуют некоторые клинические симптомы, которые появляются не часто: кровотечения, рвота, боль в животе. В большинстве случаев образования находят во время обследования по поводу других заболеваний. Причиной появления полипов могут послужить нарушения в слизистой оболочке или воспалительные процессы.

Так же в бессимптомном виде протекает полип шейки матки. Очень редко рост полипов в этой области становится толчком к возникновению кровотечений, нерегулярных менструаций, сильной боли, обильных выделений белого цвета.

Биопсия эндометрия проводится для диагностики состояния слизистой оболочки. При помощи этой процедуры могут выявить утолщение и разрастание слизистой матки, а так же карциномы. Исследование эндометрия происходит как обычным методом, так и пайпелем – небольшой пластмассовой трубкой, диаметр которой составляет в среднем 3 мм. Некоторые врачи репродуктологи назначают пайпель-биопсию как специальное обследование, чтобы исключить невынашивание плода.

Гистологические исследования могут быть частью мониторинга беременности. Хорионы – это клетки, содержащие в себе тот же генетический материал, что и плод. Биопсия хорионов может выявить такие заболевания как: синдром Эдвардса, Патау, Дауна и многие другие генные болезни, сопровождающиеся умственной отсталостью или уродствами. Проводят её на сроке до 12 недель. Исследование клеток плаценты назначается во втором триместре. Амниоцентез проводят значительно позже при сроке 16-24 недели. Диагностические способности данного вида анализа намного выше, чем двух предыдущих, но вместе с этим, чем больше срок, тем опаснее будет прерывание беременности. Пункция пуповины плода направлена на выявление хромосомных и генных болезней. Она проводится при сроке 22-25 недель.

Подготовка к проведению биопсии может носить особый характер в зависимости от вида гистологических исследований. Обязательно назначается общий анализ крови и на ВИЧ, СПИД, гепатит и др., а женщинам следует дополнительно пройти гинекологическое обследование и сдать мазок (при биопсии матки). Можно отметить следующие несколько общих правил, которые необходимо соблюдать:

заблаговременно предупредите врача о приёме каких-либо лекарственных средств, а так же скажите, на какие препараты у Вас имеется аллергия;
не принимайте спиртные напитки за несколько дней до проведения гистологического исследования.

818,827,814,1176,990,873

Гришин Сергей Андреевич 19.10.2020 18:16
medi-center.ru

Наблюдались с Covid всей семьей в Меди-центре на Охтинской. От всех нас огромный привет и благодарность Дерешовскому Александру Сергеевичу и Алетдинову Жану Вячеславовичу. Эти бесстрашные сталкеры ежедневно ходят в запретные зоны брать мазки, обследовать и назначать лечение, успокаивать и консультировать больных, оказывать им психологическую помощь. Приятно было увидеть Александра Сергеевича в должности врача, поздравляем с окончанием академии!

Николаев Арсений Витальевич 03.09.2020 13:34
medi-center.

Добрый день! Хочу поблагодарить травматолога Риахи Аймена за его профессионализм и высокую ответственность в своем деле! Повредил связки, первый раз в жизни, сильно переживал. На первом же приеме получил квалифицированную помощь и рекомендации для скорейшего выздоровления. Я очень любопытный человек и меня приятно порадовал тот факт,что я смог получить ответы на все свои вопросы,связанные с растяжением(как травмой), материалами для фиксации ноги и др. Это очень важное качество врача, когда он может объяснить процессы из своей сферы на профессиональном, но при этом понятном языке для простого обывателя. Спасибо МедиЦентр за ваше отношение к подбору персонала!

Добрый день! Хочу выразить огромную благодарность Неврологу Старостенко Яна, я была по ОМС, с проблемой болей , очень благодарна за чуткий подход . мне стало намного лучше. спасибо большое! наконец то чувствую себя человекеком.

Я лечусь в клинике на Охтинской аллее . Очень приятный , вежливый персонал , все чисто , аккуратно … врач у которого я лечусь , очень внимательный , «не разводит». Могу смело советовать эту клинику!!!

От всей души с наилучшими пожеланиями в наступающем Новом 2020 году поздравляю Степанову Наталью Юрьевну, завед.отделением на Охтинской аллее 18 и весь ее коллектив!!! Спасибо за отзывчивость, помощь и понимание нас — ваших пациентов! Приумножайте свой труд, успехов вам всем и всего самого дорогого, что может быть у человека — здоровья и любви!!! С уважением Ольга Александровна Остапко.

Добрый день! Я хотела бы поблагодарить Клинику МедиЦентр (на алее Поликарпова) и ЛОР-врача Ершову Татьяну Викторовну за их работу. К Татьяне Викторовне на приём первый раз попала в 2016 году. С этого момента, при возникновении проблем с горлом или носом, обращаюсь только к Татьяне Викторовне. Всегда внимательное отношение к описанной симптоматике и тщательный осмотр, направления на уточняющие состояние анализы и, как результат, правильное лечение. Спасибо! С уважением, Мария

Гистологические исследования. Особенности диагностики | Морозовская ДГКБ ДЗМ

В Морозовской больнице проводится весь спектр исследований биопсийного и операционного материала. Ежегодно исследуется материал почти 20 тысяч человек. В их числе пациенты Морозовской больницы, городских детских стационаров и поликлиник, акушерских стационаров.

По словам заведующего патологоанатомическим отделением Морозовской ДГКБ Алексея Николаевича Кислякова, в основе патоморфологических (гистологических) исследований лежит изучение изменений, происходящих в тканях, при помощи микроскопа. Врачами анализируется биопсийный материал, получаемый исключительно в диагностических целях.

Это могут быть фрагменты ткани пациента (кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей, мягких тканей, головного и спинного мозга). Кроме того, обязательному исследованию подлежит операционный материал, т. е. все то, что удаляется во время операции (орган или его часть, опухоль).

В отделении проводится прижизненная диагностика широкого спектра детских болезней. Особое место занимают онкологические случаи.

«Мы анализируем фрагменты тканей, полученные с помощью биопсии или изъятые во время операции. Например, при проведении гастро- и колоноскопии, удалении аппендицита или патологическом родоразрешении исследования позволяют подтвердить диагноз на микроскопическом уровне. Если говорить об онкологии, которая является авангардом морфологической службы, то диагностика с учетом общей клинической картины, лабораторных и параклинических данных (КТ, МРТ) позволяет быстро и точно не только определить наличие патологии, но уточнить ее конкретный вид и индивидуальные характеристики. А от этого зависит, насколько точно будет поставлен диагноз и назначено эффективное лечение», — отметил Алексей Кисляков.

Для того чтобы специалист смог увидеть и проанализировать микроскопическую картину ткани, образец проходит специальную подготовку. Сначала врач-патологоанатом оценивает его макроскопически: измеряет, описывает внешний и внутренний вид (размер, цвет, плотность, структуру). После этого происходит вырезка, при которой врач отбирает определенные фрагменты пораженного органа или опухоли для гистологического исследования.

Лабораторный процесс преаналитического этапа гистологического исследования осуществляется в автоматизированном режиме на современном оборудовании. Процесс подготовки подразумевает поочередное выполнение следующих действий:

Фиксация — помещение вырезанного образца в кассете в специальный химический раствор для сохранения структуры ткани;
Процессинг (проводка) — процесс обезвоживания, обезжиривания и пропитки материала парафином;
Заливка парафиновых блоков — материал после обработки заливается расплавленным парафином, затем охлаждается, в результате чего формируются парафиновые блоки, содержащие образцы тканей. Блоки могут храниться долгие годы и использоваться для проведения дополнительных гистологических исследований или пересмотров, а также в научных целях;
Микротомия — изготовление срезов образцов и их перенесение на специальные предметные стекла. Толщина каждого среза, как правило, не превышает 4 мкм (0,004 мм).
Окрашивание стекол со срезами гематоксилином и эозином. Изготовленные препараты позволяют увидеть микроскопическую картину образца.

Полученные после обработки материала гистологические препараты врач анализирует и описывает. Благодаря конференц-микроскопу существует возможность одновременного совместного просмотра образцов несколькими специалистами. Кроме того, наличие сканера гистологических препаратов позволяет проводить дистанционное консультирование биопсийного и операционного материала, в том числе, иностранными коллегами.

«При диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований, когда постановка диагноза с помощью рутинных гистологических исследований невозможна или требуется уточнение важных иммунофенотипических параметров опухоли, в патологической анатомии применяется дополнительный метод исследования — иммуногистохимия. Она является составной частью гистологического исследования и проводится на том же материале. Иммуногистохимическое исследование позволяет определить гистогенез (происхождение) опухоли, установить ее конкретную нозологическую форму, оценить ее пролиферативный потенциал, то есть, степень возможного роста. В ряде случаев также определяют антигены-таргеты, которые являются «мишенями» для специфической терапии»,- отметил доктор медицинских наук, профессор, врач-патологоанатом Морозовской ДГКБ Александр Гаврилович Талалаев.

Некоторые злокачественные образования требуют также генетического подтверждения. В таком случае проводится флуоресцентная гибридизация in situ (FISH-тест). С ее помощью в анализируемом образце ткани можно выявить генетические аномалии, позволяющие отличить один вид опухоли от другой и выделить маркеры, отвечающие за лекарственную чувствительность опухоли.

Завершающим этапом является формирование заключения, то есть гистологического диагноза. Если речь идет об онкологии, заключение формулируется строго в соответствии с Международной классификацией онкологических заболеваний Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ). Классификатор состоит из нескольких томов по каждому разделу онкологии. Он регулярно обновляется, дополняется и уточняется.

В патологоанатомическом отделении, которое существует со дня основания Морозовской больницы, работают высококвалифицированные специалисты: врачи-патологоанатомы, лаборанты. Все специалисты обладают экспертными компетенциями и накопленным опытом проведения исследований, от которых зависит точность поставленного диагноза и эффективность назначенного лечения.

Что такое отчет о гистопатологии или биопсии?

Национальный институт рака определяет гистопатологию как «исследование пораженных клеток и тканей с помощью микроскопа». Гистология — это исследование тканей, а патология — это изучение болезни. Таким образом, гистопатология буквально означает изучение тканей в связи с заболеванием.

В гистопатологическом отчете описывается ткань, отправленная на исследование, и особенности того, как рак выглядит под микроскопом.Отчет о гистопатологии иногда называют отчетом о биопсии или отчетом о патологии.

Изображения героев / Getty Images

Гистопатологические отчеты

Врач-специалист, проводящий обследование под микроскопом, называется патологоанатомом. Исследуемая ткань поступает в результате биопсии или хирургической процедуры, во время которой отбирают образец подозрительной ткани и отправляют в лабораторию.

Затем его обрабатывают и разрезают на очень тонкие слои (называемые срезами), окрашивают и исследуют под микроскопом, чтобы охарактеризовать детали клеток в ткани.

При некоторых заболеваниях хирург может очень быстро интерпретировать образец ткани с помощью замороженных срезов. Однако замороженные срезы или срезы редко используются при лимфоме из-за проблем с интерпретацией и отбором образцов.

При лимфомах лимфатические узлы являются тканью, наиболее часто исследуемой при гистопатологии. Для постановки окончательного диагноза при многих типах рака крови также может потребоваться биопсия костного мозга.

Компоненты отчета о гистопатологии

Гистопатологические отчеты о хирургических образцах рака становятся все более сложными.Они могут включать:

Микроскопический вид пораженной ткани
Специальные пятна
Молекулярные методы
Прочие испытания

Молекулярные методы относятся к способности анализировать клетки и ткани на молекулярном уровне, то есть на уровне белков, рецепторов и генов, кодирующих эти вещи.

Интерпретация отчета о гистопатологии

Многие результаты такого исследования тканей связаны с прогнозом.Прогностические индикаторы могут включать степень опухоли и степень распространения, а также то, был ли удален рак с небольшим количеством окружающих его здоровых клеток, или если есть доказательства того, что рак распространился за пределы того, что было удалено.

Системы оценки различаются в зависимости от типа оцениваемого рака, но обычно клетки оцениваются в зависимости от того, насколько ненормальными они выглядят под микроскопом, причем опухоли 1-й степени выглядят более нормально, а опухоли 4-й степени отражают большее количество аномалий.Взаимодействие с другими людьми

Таким образом, опухоль высокой степени злокачественности — это, как правило, опухоль, в клетках которой больше аномалий. Оценивание — это не то же самое, что постановка. Стадия больше связана с тем, где находится рак в организме и насколько далеко он распространился.

Молекулярные описания

Помимо гистопатологии, для оценки наличия рака в тканях могут использоваться другие методы, в том числе цитология тонкоигольной аспирации, и некоторые из этих методов могут более широко использоваться в медицинских учреждениях по всему миру.

Лейкемии и лимфомы диагностируют по сочетанию их внешнего вида:

Цитохимия: ферментов, которые могут вызывать определенные химические реакции
Иммунофенотип: маркеров или поверхностных белков, которые могут быть обнаружены с помощью тестов на антитела
Кариотип: хромосомных изменений
Морфология: Внешний вид клеток

Другие методы отбора проб

Часто при лимфомах и других видах рака метод, называемый иммуногистохимией, используется для оценки типа опухоли, прогноза и лечения.Взаимодействие с другими людьми

Иммуногистохимия включает использование антител для прикрепления к определенным меткам или маркерам на внешней стороне раковых клеток. Эти маркеры, к которым прикрепляются антитела, часто имеют в своем названии «CD», что означает кластер дифференцировки.

Например, CD23 и CD5 представляют собой микроскопические метки, которые, если они присутствуют в раковых клетках, могут поддерживать представление о том, что хронический лимфолейкоз (CLL) / малая лимфоцитарная лимфома (SLL) является возможным диагнозом.

Однако эти же маркеры присутствуют и в других злокачественных новообразованиях, поэтому врачи используют своего рода процесс устранения, основанный на доступной информации и том, что известно о различных злокачественных новообразованиях и их «типичных» маркерах CD.

Другой пример маркера CD — это CD20, который присутствует в некоторых лимфомах, но отсутствует в других. Диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома или DLBCL — очень распространенная лимфома, связанная с маркером CD20.

Для данного образца клеток лейкемии или лимфомы маркеры могут быть протестированы с использованием всей панели антител, которые прикрепляются к различным маркерам, со встроенными положительными и отрицательными контролями.

Могут быть проведены молекулярные и хромосомные исследования для изучения перестроек генов и специфических изменений хромосом.Иногда вставленные или удаленные гены связаны с информацией о прогнозе.

Например, при хроническом лимфолейкозе или ХЛЛ теряется определенный фрагмент хромосомы, и часто вместе с ним теряется ген, который помогает подавить рак.

В целом делеция 17p обнаруживается примерно у 5-10% людей с ХЛЛ. ХЛЛ с делецией 17р — это форма ХЛЛ, которую сложнее лечить с помощью традиционной химиотерапии.

Гистопатология

Что такое гистопатология?

Гистопатология — это диагностика и исследование заболеваний тканей, включающая исследование тканей и / или клеток под микроскопом.Гистопатологи несут ответственность за диагностику тканей и помогают клиницистам управлять уходом за пациентом.

Почему важна гистопатология?

Гистопатологи — это врачи, которые тесно сотрудничают с другими клиническими специалистами. Они могут поставить диагноз, исследуя небольшой кусочек ткани кожи, печени, почек или другого органа. Это называется биопсией.

Они тщательно исследуют ткань под микроскопом, ища изменения в клетках, которые могут объяснить причину болезни пациента.Ежегодно в Великобритании исследуется около 20 миллионов гистопатологических слайдов.

Диагноз рака

Гистопатологи предоставляют услуги диагностики рака; они обрабатывают клетки и ткани, удаленные из подозрительных « бугорков и шишек », определяют природу аномалии и, в случае злокачественности, предоставляют врачу информацию о типе рака, его степени и, для некоторых видов рака, о его реакции на определенные методы лечения .

С помощью сложных методов визуализации теперь можно получить биопсию ткани из ранее недоступных участков, таких как поджелудочная железа или забрюшинное пространство (за

брюшина, оболочка, выстилающая брюшную полость).Затем ткань обрабатывают, обычно в течение ночи, прежде чем исследовать под микроскопом. В определенных ограниченных обстоятельствах с использованием специальных методов образец можно исследовать немедленно. В связи с быстро меняющимися тенденциями развития молекулярной патологии патологи лидируют с новыми методами, такими как флуоресцентная гибридизация in situ.

(FISH) и полимеразной цепной реакции (ПЦР) для картирования генетического материала в тканях или опухолях, которые необходимы для лечения многих видов рака.

Роль гистопатолога

Многие гистопатологи специализируются на определенных органах, таких как печень или кожа, рассекая («разрезая» или «обрезая») ткани для ежедневного наблюдения под микроскопом. Для больших образцов, таких как образцы кишечника или груди после операции, они препарируются, чтобы выбрать наиболее подходящие области для исследования под микроскопом. Гистопатологи пишут отчеты об образцах, обращаются к литературе (результаты прошлых и текущих исследований), а многие также занимаются преподаванием и исследованием.

Они также будут посещать междисциплинарные встречи, чтобы их выводы можно было обсудить с другими клиницистами. Затем процедуры детально планируются и адаптируются к каждому пациенту.

Гистопатологи также работают напрямую с пациентами, например, они могут выполнять такие процедуры, как тонкая игла в клиниках головы и шеи или груди. На них все чаще ложатся ключевые обязанности по скринингу рака, в настоящее время на рак груди, кишечника и шейки матки, и в ближайшем будущем ожидается появление других программ.

Гистопатологи также исследуют клетки в мазках, аспиратах или биологических жидкостях (цитопатология), например, в мазках мочи или шейки матки. Другие узкие специальности включают судебную патологию, невропатологию и педиатрическую патологию.

За своим столом я делаю несколько дел под микроскопом, диктуя отчеты по ходу дела. Я обычно подстригаюсь утром. Моими интересами являются патология печени / поджелудочной железы и головы и шеи, поэтому я могу смотреть на печень, удаленную при трансплантации, частичную резекцию печени или резекцию поджелудочной железы по поводу опухоли.

Техник-гистолог — Изучите карьеру в сфере здравоохранения

Чем занимается техник-гистолог?

Техники-гистологи (HT), также известные как техники-гистологи, являются специализированными медицинскими лабораторными работниками. Они играют решающую роль в диагностике и лечении заболеваний, превращая образцы тканей в предметные стекла.

Гистология — это исследование микроскопических структур тканей. После того, как образец ткани взят у пациента, гистологи становятся людьми, ответственными за взятие образца и создание этих микроскопических структур.После того, как образцы подготовлены, патолог исследует слайды для диагностических или исследовательских целей.

Выявление и понимание процессов заболевания, включая рак, было бы невозможным без навыков и вклада этих высококвалифицированных специалистов в области здравоохранения.

Сфера деятельности

Техники-гистологи работают с патологами и руководителями лабораторий. Техники работают с прецизионным оборудованием и работают с различными красителями и химическими веществами, чтобы сделать аномалии тканей видимыми в микроскоп.Патологоанатомы используют эти слайды для исследования или постановки диагноза.

Общие роли и обязанности техника-гистолога включают:

Подготовка тонких срезов тканей человека, животных или растений на предметных стеклах для анализа с помощью:
- Исследование, фиксация и обработка ткани для надлежащего хранения образцов
- Окружение ткани парафиновым воском в процессе, называемом заливкой
- Вырезание образца ткани микротомом или криостатом
- Установка образца ткани на предметное стекло
- Окрашивание или окрашивание образца, чтобы подчеркнуть отклонения от нормы
Исследование ткани в соответствии с потребностями патолога
По мере необходимости, управление расходными материалами и лабораторные процедуры контроля качества

Техники-гистологи (HT) vs.гистотехнологии (HTL)

Техник-гистолог и гистотехнолог обычно выполняют очень похожие задачи в своих повседневных операциях. Основное отличие состоит в том, что гистотехнолог имеет более продвинутое образование и подготовку, чтобы дать ему квалификацию, необходимую для получения необходимой сертификации. Гистотехнолог также обычно может выполнять более сложные методы и становиться супервизором, руководителем или преподавателем.

Специализации

Техники-гистологи могут специализироваться в таких областях, как биопсия мышц или почек, иммуногистохимическое окрашивание, образцы дерматологии и замороженные срезы.

Производственная среда

Технические специалисты обычно работают рано утром в клинической патологии или в частных лабораториях, поэтому слайды могут быть готовы для патологоанатомов, когда они начнут свой рабочий день. Некоторые техники могут работать в исследовательских, ветеринарных, фармацевтических и судебно-медицинских лабораториях. Также возможно продвижение в таких областях, как образование, разработка тестов, обеспечение качества и менеджмент.

Стать техником-гистологом

Техники-гистологи должны обладать сильной мелкой моторикой и быть внимательными к деталям.Знания биологии, химии, анатомии, физиологии и медицинской терминологии необходимы для успеха в этой должности.

Требования к высшему образованию

После окончания средней школы (или ее эквивалента) большинство продолжают получать дополнительное образование и обучение. Типичный путь к тому, чтобы стать техником-гистологом, включает:

Получение степени ассоциированного специалиста
Завершение программы аккредитованного сертификата техника-гистолога

Некоторые программы на получение степени младшего специалиста включают в себя ротацию клинических гистологов в медицинском учреждении, которая позволяет вам завершить свое образование и программу сертификации как одну программу.

Сертификация

Большинство техников-гистологов получают сертификаты Американского общества клинической патологии (ASCP) и практикуют под сертификатом HT (ASCP) или HTL (ASCP). Лицензирование также требуется в некоторых штатах.

Карьерные возможности и перспективы

По данным Бюро статистики труда, средняя годовая зарплата гистолога составляет около 54000 долларов.

Ожидается, что количество вакансий для медицинских и клинических лаборантов, включая техников-гистологов, будет расти быстрее, чем в среднем, по данным Бюро статистики труда.По мере старения населения возрастает потребность в диагностике заболеваний с помощью лабораторных процедур. Также существует повышенная потребность в пренатальном тестировании на генетические заболевания. Технологи и техники медицинских лабораторий, в том числе гистологи, будут востребованы для работы с оборудованием, необходимым для диагностики и лечения.

Обладая дополнительной подготовкой и опытом, технический специалист-гистолог может перейти к обучению, разработке тестов или обеспечению качества. Некоторые могут стать гистотехнологами и наблюдать за работой других в лаборатории.

По номерам

Подготовка слайдов для гистологии: 5 простых шагов

Если вы занимаетесь биологическими исследованиями, скорее всего, на каком-то этапе вы отправили образцы тканей в гистологическую лабораторию. Каким-то образом они волшебным образом создали для вас прекрасные слайды, каждое из которых содержит тонкие срезы ваших образцов, готовые для микроскопической оценки.

Вы когда-нибудь задумывались, как техник-гистолог готовит этот гистологический препарат? Читайте о пяти важных этапах изготовления гистологических препаратов.

Пять этапов подготовки гистологических слайдов

1. Тканевая фиксация

Подготовка слайдов начинается с фиксации образца ткани. Это важный этап подготовки ткани, и его цель — предотвратить автолиз и гниение тканей. Для достижения наилучших результатов образцы ваших биологических тканей следует сразу же после сбора поместить в фиксатор.

Хотя существует много типов фиксаторов, большинство образцов фиксируют в 10% нейтральном забуференном формалине.Оптимальное соотношение объема формалина к образцу должно быть не менее 10: 1 (например, 10 мл формалина на 1 см ³ ткани). Это позволит большинству тканей адекватно зафиксироваться в течение 24-48 часов. Емкости с формалином должны быть закрытыми, герметичными и правильно маркированными.

2. Перенос образцов в кассеты

После фиксации образцы обрезаются с помощью скальпеля, чтобы они могли поместиться в кассету для тканей с соответствующей маркировкой. Образцы не должны быть настолько большими, чтобы заполнять кассету — их обрезают так, чтобы не касаться краев.Кроме того, они не должны быть слишком толстыми (в идеале они должны быть менее 4 мм), в противном случае они рискуют получить «вафли» при закрытии крышки кассеты. Заполненные кассеты для тканей затем хранят в формалине до начала обработки.

3. Обработка тканей

Обработка тканей в тонкие микроскопические срезы обычно выполняется с помощью парафинового блока, как показано ниже:

Обезвоживание , при котором образец погружается в спирт с возрастающей концентрацией для удаления воды и формалина из ткани.
Очистка , в которой органический растворитель, такой как ксилол, используется для удаления спирта и пропитывания парафином.
Заливка , где образцы пропитаны заливочным агентом — обычно парафином. Ткань окружается большим блоком расплавленного парафина, образуя то, что теперь называется «блоком». Когда блок затвердевает, он обеспечивает опорную матрицу, позволяющую разрезать очень тонкие срезы.

4.Раздел

Ваш образец ткани теперь готов к разрезанию на секции, которые можно разместить на предметном стекле.

Воск удаляется с поверхности блока, чтобы обнажить ткань.
Блоки охлаждаются на охлаждаемой тарелке или ванночке для льда в течение 10 минут перед разделением.
Микротом используется для срезания очень тонких срезов ткани с блока в виде ленты.

Микротом можно предварительно настроить на резку разной толщины, но большинство тканей разрезаются примерно на 5 мкм.Вы можете узнать о других способах разрезания тканей здесь.

После разрезания тканевые ленты осторожно переносят в теплую водяную баню. Здесь им позволяют плавать на поверхности, а затем их можно зачерпнуть на горку, помещенную под уровень воды. Заряженные слайды лучше всего подходят для этого процесса — они улучшают адгезию ткани к стеклу и помогают снизить вероятность смывания срезов с слайда во время окрашивания.

Предметные стекла

должны быть четко маркированы, а затем дать им высохнуть в вертикальном положении при 37 ^o C в течение нескольких часов, чтобы аккуратно расплавить излишки парафинового воска, оставив участок ткани нетронутым.

5. Окрашивание

Большинство клеток прозрачны и в неокрашенном виде кажутся почти бесцветными. Поэтому гистохимические пятна (обычно гематоксилин и эозин) используются для обеспечения контраста срезов ткани, делая структуры ткани более заметными и более простыми для оценки. После окрашивания поверх образца ткани на предметном стекле устанавливают покровное стекло с использованием клея оптического качества, чтобы защитить образец.

Препарат для гистологического слайда в упаковке

Итак, как видите, подготовка слайдов для гистологии — это несложно — это довольно замысловатое произведение искусства! Хотя вы, возможно, захотите узнать, как это сделать, чтобы сократить расходы в лаборатории, я бы посоветовал вам дважды подумать над этим и вместо этого отправить образцы в гистологическую лабораторию для этой цели, особенно если оценка ткани является важной частью. вашего исследования.Вы сэкономите много времени и стресса, оставив эту работу опытному технику-гистологу, и ваши слайды будет намного легче оценивать.

Хотя гистология отлично подходит для визуализации целых тканей с низким разрешением, она ограничивает, если вы хотите исследовать субклеточные структуры, например, при изучении изменений в опухолях головного мозга. В этом случае требуется более подробный и мощный метод, такой как электронная микроскопия рака мозга.

Если гистология имеет достаточное разрешение для ваших нужд, вы предпочитаете делать свои собственные слайды или отправлять ткани в гистологическую лабораторию для обработки? Оставьте комментарий ниже.

Дополнительная литература

Если вы нашли эту статью полезной, возможно, вы захотите ознакомиться с некоторыми из наших статей по теме ниже:

Первоначально опубликовано 4 апреля 2012 г. Проверено и обновлено 19 ноября 2020 г.

Вам это помогло? Тогда поделитесь, пожалуйста, со своей сетью.

Что происходит с образцами биопсии и цитологии?

Стандартные процедуры и методы используются для обработки почти всех типов биоптатов.Эти процедуры представляют собой обычные способы подготовки образца в лаборатории. Другие процедуры, описанные ниже, также могут выполняться на определенных типах образцов (например, на лимфатических узлах и костном мозге).

Как обычно обрабатываются биопсии

После извлечения образец биопсии помещается в контейнер со смесью воды и формальдегида (формалина) или другой жидкости для его сохранения. На контейнере указано имя пациента и другая идентифицирующая информация (например, номер больницы и дата рождения) и место проведения биопсии (где именно на теле она была взята).Затем его отправляют в лабораторию патологии. Затем патологоанатом или обученный лаборант смотрит на образец без микроскопа. Это называется общий экзамен . (В медицине грубый означает , видимый без микроскопа, ). Это делается для записи того, что можно увидеть, просто глядя на ткань, измеряя ее или ощущая на ощупь. Макросъемка включает размер, цвет, консистенцию и другие характеристики образца ткани. Персонал лаборатории может даже сфотографировать образец как часть записи.Общий осмотр важен, поскольку патолог может увидеть признаки, указывающие на рак. Это также помогает патологу решить, какие части большой биопсии наиболее важны для просмотра под микроскопом.

Для небольших биопсий, таких как пункционная биопсия или стержневая биопсия, обычно исследуют весь образец под микроскопом. Салфетки помещаются в небольшие контейнеры, называемые кассетами . Кассеты надежно удерживают ткань во время обработки. После обработки, которая может занять несколько часов (но обычно проводится в течение ночи), образец ткани помещают в форму с горячим парафином.Воск остывает, образуя твердый блок, который защищает ткань.

Этот парафиновый восковой блок с заделанной тканью разрезают на очень тонкие срезы с помощью инструмента, называемого микротом . Эти тонкие срезы образца помещают на предметные стекла и погружают в серию пятен или красителей, чтобы изменить цвет ткани. Благодаря цвету клетки легче увидеть под микроскопом. Для большинства образцов биопсии рутинная обработка — это все, что требуется. На этом этапе (обычно на следующий день после проведения биопсии) патолог смотрит на ткань под микроскопом.Такой взгляд на твердые образцы называется гистологией , которая представляет собой исследование структур клеток и тканей.

Специальная обработка биопсии: Замороженный участок (во время операции)

Иногда информация об образце ткани необходима во время операции, чтобы принять немедленное решение. Если хирург не может дождаться дня или более, необходимого для рутинной обработки и гистологии, он или она запросит консультацию по патологии во время операции (во время операции).Это часто называется экзаменом замороженного раздела .

Как делается замороженный участок?

Когда выполняется исследование замороженного среза, свежая ткань отправляется из операционной прямо к патологоанатому. Поскольку пациент часто находится под общей анестезией (засыпает лекарствами), важно быстро осмотреть ткань. Обычно это занимает от 10 до 20 минут. Патолог тщательно исследует свежую ткань, чтобы решить, какую ее часть следует рассматривать под микроскопом.Вместо того, чтобы обрабатывать ткань восковыми блоками, ткань быстро замораживается в специальном растворе, который образует вокруг ткани нечто похожее на кубик льда. Затем его тонко разрезают (нарезают) на специальной машине, быстро окрашивают (погружают в ряд красителей) и рассматривают под микроскопом. Замороженные срезы обычно не показывают особенности ткани так четко, как срезы ткани, залитые воском, но они достаточно хороши, чтобы помочь хирургу принимать решения во время операции.

Когда заканчивается замороженный участок?

Чтобы узнать, является ли опухоль раком: Иногда тип необходимой операции зависит от того, является ли опухоль раковой (злокачественной).Например, простого удаления опухоли может быть достаточно для лечения опухоли, которая не является раковой (доброкачественной), но может потребоваться удаление большего количества ткани и / или лимфатических узлов, если опухоль является раковой. В таком случае хирург может отправить опухоль на исследование замороженного среза. Часто это может дать достаточно информации, чтобы помочь хирургу решить, какой тип операции лучше всего подходит для пациента. Иногда, однако, замороженный участок не дает однозначного ответа, и для получения четкого ответа кусочек ткани должен пройти обычную или даже специальную обработку.Когда это происходит, хирург обычно останавливает операцию и закрывает хирургический разрез (разрез). После получения результатов может потребоваться еще одна операция.

Чтобы убедиться, что рак полностью удален: Хирургическое лечение рака часто представляет собой сложный баланс между удалением достаточного количества ткани, чтобы почувствовать, что рак полностью удален, и оставлением достаточного количества нормальной ткани, чтобы ограничить повреждение. Если хирург обеспокоен тем, что рак не был удален полностью, срез края ткани, который был удален (называемый полем , ), отправляется на диагностику замороженного среза.Если на границе нет раковых клеток, дополнительная операция обычно не требуется. Но если раковые клетки обнаружены, можно предположить, что некоторые из них еще остались в ткани пациента. Если это происходит, хирург обычно удаляет больше ткани, чтобы попытаться удалить все раковые клетки и снизить вероятность повторного рака. Если невозможно удалить больше ткани, могут быть другие варианты, такие как облучение, чтобы убить оставшиеся раковые клетки.

Процесс для хирургии Мооса (хирургия под микроскопом)

Эта процедура используется для лечения некоторых видов рака кожи.В хирургии Мооса хирург удаляет тонкий слой кожи, в который могла проникнуть опухоль, а затем проверяет образец под микроскопом. Если раковые клетки видны, удаляются другие слои и проверяются до тех пор, пока в образцах кожи не будут обнаружены раковые клетки. Этот процесс идет медленно, но это означает, что можно сохранить больше нормальной кожи рядом с опухолью. Хирургия Мооса — это узкоспециализированная методика, которую должны использовать только обученные врачи.

Как обрабатываются цитологические образцы

Порядок обработки цитологических образцов зависит от типа образца.Некоторые образцы размазываются на предметных стеклах микроскопа врачом, который получает образец. Эти слайды, которые называются мазками , затем отправляются в цитологическую лабораторию, где их окунают в серию пятен (цветных красителей), очень похожих на те, которые используются для образцов биопсии.

Другие образцы, такие как биологические жидкости, нельзя легко поместить на предметное стекло микроскопа, потому что они слишком разбавлены (в большом объеме жидкости слишком мало клеток). Процедуры используются для концентрирования этих клеток на предметном стекле до того, как они будут окрашены.

После обработки и окрашивания образцы исследуют под микроскопом. Аномальные клетки обнаруживаются и помечаются специальной ручкой. Затем патолог исследует отмеченные клетки, чтобы поставить диагноз.

Как долго хранятся образцы патологии?

Федеральный закон под названием CLIA (Поправки по улучшению клинических лабораторий) регулирует регулирование и сертификацию клинических лабораторий. Чтобы получить аккредитацию CLIA, лаборатории должны хранить человеческие образцы в течение минимального времени.Например, CLIA говорит, что лаборатории должны хранить:

Цитологические препараты минимум 5 лет
Гистопатологические слайды за не менее 10 лет
Блоки парафиновые не менее 2 лет

В некоторых штатах действуют собственные законы, согласно которым лаборатории должны хранить образцы патологий дольше, чем время, указанное в правилах CLIA. А в некоторых лабораториях есть правила хранения образцов дольше, чем это требуется федеральными законами или законами штата.

Что это значит для вас

Некоторые люди хотят получить второе мнение по поводу диагноза, сделанного на их образце ткани (образце).Это называется обзором патологии. Это означает, что нужно попросить другого врача взглянуть на вашу биопсийную ткань и поставить диагноз на основании увиденного.

Образцы тканей человека не выбрасываются сразу после тестирования. Поэтому в большинстве случаев, если ткани достаточно, образец можно отправить другому врачу или в лабораторию.

Иногда более длительное хранение образцов может быть полезным и по другим причинам. Например, если у пережившего рак развивается опухоль через несколько лет после удаления первой, врачи захотят узнать, является ли эта новая опухоль старой, возвращающейся (рецидив), или совершенно новым раком.

Это часто можно определить, основываясь на расположении двух опухолей и сравнивая гистопатологические слайды обоих образцов. Но иногда также могут помочь дополнительные тесты (например, иммуногистохимические окрашивания), которые можно провести с использованием ткани из парафинового блока исходного образца.

Сделайте карьеру в ИСТОЛОГИИ

Чем занимается гистологический персонал?

Гистологи и гистологи готовят образцы тканей для исследования патологом.Их работа является важной частью определения того, страдает ли пациент дисфункцией или злокачественным новообразованием.

Чем может заниматься гистолог в рабочий день?

Подготовьте срезы тканей человека, животных или растений для диагностических, исследовательских или учебных целей.
Обработайте ткань и вставьте в парафиновые блоки, затем установите тонкие срезы ткани на предметное стекло для микроскопического исследования.
Окрашивайте ткань, чтобы различать различные структуры или компоненты.Затем слайд оценивается патологом или другим научным исследователем.
Наблюдать и управлять гистологической лабораторией.

Делаете карьеру в гистологии?

Гистологи / гистотехнологи проходят большую подготовку и выполняют более сложные процедуры, чем гистологические техники. Гистологи выполняют рутинные процедуры подготовки образцов и помогают гистологам.

Большинство гистологов работают в лабораториях клинической патологии; некоторые могут работать в ветеринарии, гистологии растений или морей, фармакологии, а также в медицинских или исследовательских лабораториях.

Какую зарплату получают гистотехнологи?

Гистотехнолог: 36000–52450 долларов США

Как мне стать гистотехнологом или гистологом?

Студенты, намеревающиеся сделать одну из этих профессий, должны подготовиться, пройдя сложные школьные курсы по естествознанию, математике и английскому языку.

Гистотехнологи должны либо иметь степень бакалавра по утвержденной специальности (например, биология, химия) и один год опыта работы в гистопатологической лаборатории, либо пройти формальную образовательную программу по гистотехнологии.Они также должны сдать национальный экзамен.

Есть три пути к тому, чтобы стать гистологом. Студенты могут получить аттестат о среднем образовании и проработать два года в клинической лаборатории по гистопатологии. Они могут пройти аккредитованную программу по гистотехнологии или получить степень младшего специалиста и проработать один год в клинической лаборатории по гистотехнологии. Они также должны сдать национальный экзамен. Сертификат можно получить в Американском обществе клинической патологии.

Где еще я могу узнать о том, как стать гистологом или гистологом?

Национальное общество гистотехнологии
10320 Little Patuxent Parkway, Suite 804 / Columbia, MD 21044
тел: 443-535-4060 / веб: http://nsh.org

Американское общество клинической патологии
33Вт. Monroe Street Suite 1600 / Chicago, IL 60603

Учебные заведения в Вирджинии по гистологии:

шагов к обработке тканей для гистопатологии: Leica Biosystems

1.Получение свежего образца

Образцы свежих тканей будут поступать из различных источников. Следует отметить, что они очень легко могут быть повреждены при удалении от пациента или подопытного животного. Важно, чтобы с ними обращались осторожно и как можно скорее после вскрытия правильно зафиксировали. В идеале фиксация должна производиться на месте удаления, например в операционной, или, если это невозможно, сразу после транспортировки в лабораторию.

2. Фиксация

Образец помещают в жидкое фиксирующее средство (фиксатор), такое как раствор формальдегида (формалин). Он будет медленно проникать в ткань, вызывая химические и физические изменения, которые укрепляют и сохраняют ткань, а также защищают ее от последующих этапов обработки. ² Существует ограниченное количество реагентов, которые можно использовать для фиксации, поскольку они должны обладать особыми свойствами, которые делают их пригодными для этой цели.Например, компоненты ткани должны сохранять некоторую химическую активность, чтобы впоследствии можно было применить определенные методы окрашивания. ³ Формалин, обычно в виде раствора с фосфатным буфером, является наиболее популярным фиксатором для сохранения тканей, которые будут обрабатываться для изготовления парафиновых срезов. В идеале образцы должны оставаться в фиксаторе достаточно долго, чтобы фиксатор проник во все части ткани, а затем в течение дополнительного периода, чтобы позволить химическим реакциям фиксации достичь равновесия (время фиксации).Обычно это означает, что образец должен фиксироваться в течение от 6 до 24 часов. Большинство лабораторий используют ступень для фиксации в качестве первой станции в своем процессоре.

После фиксации может потребоваться дальнейшее рассечение образцов для выбора подходящих участков для исследования. Образцы, которые должны быть обработаны, будут помещены в кассеты с соответствующей маркировкой (небольшие перфорированные корзины), чтобы отделить их от других образцов. Продолжительность графика обработки, используемого для обработки образцов, будет зависеть от типа и размеров самых больших и самых маленьких образцов, конкретного используемого процессора, выбранных растворителей, температуры растворителя и других факторов.Следующий пример основан на шестичасовом графике, подходящем для использования на быстром процессоре ткани Leica Peloris ™.

3. Обезвоживание

Поскольку расплавленный парафин является гидрофобным (не смешивается с водой), большую часть воды из образца необходимо удалить, прежде чем он может быть пропитан воском. Этот процесс обычно выполняется путем погружения образцов в серию растворов этанола (спирта) с возрастающей концентрацией до получения чистого безводного спирта.Этанол смешивается с водой во всех пропорциях, поэтому вода в образце постепенно заменяется спиртом. Серия увеличивающихся концентраций используется, чтобы избежать чрезмерного искажения ткани.

Типичная последовательность дегидратации образцов толщиной не более 4 мм:

70% этанол 15 мин
90% этанол 15 мин
100% этанол 15 мин
100% этанол 15 мин
100% этанол 30 мин.
100% этанол 45 мин.

На этом этапе все, кроме крошечного остатка прочно связанной (молекулярной) воды, должны были быть удалены из образца.

4. Клиринг

К сожалению, хотя ткань теперь практически не содержит воды, мы все еще не можем пропитать ее воском, потому что воск и этанол в значительной степени не смешиваются. Следовательно, мы должны использовать промежуточный растворитель, который полностью смешивается как с этанолом, так и с парафином. Этот растворитель вытеснит этанол в ткани, а затем он, в свою очередь, будет вытеснен расплавленным парафином. Этот этап процесса называется «очисткой», а используемый реагент — «очищающим агентом».Термин «клиринг» был выбран потому, что многие (но не все) очищающие агенты придают оптическую прозрачность или прозрачность ткани из-за их относительно высокого показателя преломления. Другая важная роль очищающего агента заключается в удалении значительного количества жира из ткани, который в противном случае представляет собой барьер для инфильтрации воска.

Популярным очищающим агентом является ксилол, и для полного вытеснения этанола требуется несколько изменений.

Типичная последовательность очистки образцов толщиной не более 4 мм:

ксилол 20 мин
ксилол 20 мин
ксилол 45 мин

5.Восковая инфильтрация

Теперь ткань может быть инфильтрована подходящим гистологическим воском. Хотя многие различные реагенты были оценены и использовались для этой цели в течение многих лет, гистологические воски на основе парафина являются наиболее популярными. Типичный воск является жидким при 60 ° C и может проникать в ткань при этой температуре, а затем ему дают остыть до 20 ° C, где он затвердевает до консистенции, позволяющей равномерно разрезать срезы. Эти воски представляют собой смеси очищенного парафинового воска и различных добавок, которые могут включать смолы, такие как стирол или полиэтилен.Следует принимать во внимание, что эти восковые композиции обладают очень особыми физическими свойствами, которые позволяют тканям, пропитанным воском, быть разрезанными по толщине до, по крайней мере, 2 мкм, с образованием лент, когда разрезы разрезаются на микротоме, и для сохранения достаточной эластичности. полностью расплющить во время флотации на теплой водяной бане.

Типичная последовательность инфильтрации для образцов толщиной не более 4 мм будет следующей:

воск 30 мин
воск 30 мин
воск 45 мин

6.Встраивание или блокировка

Теперь, когда образец полностью пропитан воском, из него нужно сформировать «блок», который можно закрепить в микротоме для разрезания срезов.