Серин треонин: STK17A (серин / треонин-протеинкиназы, 17А, ДАФ киназы, связанных с апоптозиндуцирующей протеинкиназы 1, DRAK1) (FITC) — купить онлайн

Содержание

Серин Треонин — Справочник химика 21

Аминокислоты можно получать путем выделения из белковых гидролизатов, с использованием микробиологических методов, с помощью ферментативных методов или путем химического синтеза. Первые три подхода дают ь-аминокислоты, а при химическом синтезе получаются оь-соедине-ния, которые нужно еще разделить на оптические антиподы. До недавнего времени аминокислоты удавалось полущть только в очень малых количествах, но в последние годы их производство приняло индустриальные масштабы и в 1977 г. достигло 400 ООО т. Аминокислоты используются как вкусовые добавки в пищевой промышленности (глутамат натрия, аспарагиновая кислота, Щ1СТИН, глицин и аланин), как питательные растворы и терапевтические средства в медицине (все протеиногенные аминокислоты), как добавки для улучшения неполноценных питательных белков и фуража (лизин, метионин, триптофан), как промежуточные вещества в косметической промышленности (серин, треонин, цистеин), а также как исходные вещества для синтеза различных пептидов. [c.38]
Синтез незаменимых аминокислот из продуктов обмена углеводов и жиров в организме животных отсутствует. Клетки животных не содержат ферментных систем, катализирующих синтез углеродных скелетов этих аминокислот. В то же время организм может нормально развиваться исключительно при белковом питании, что также свидетельствует о возможности синтеза углеводов из белков. Процесс синтеза углеводов из аминокислот получил название глюконеогенеза. Он доказан прямым путем в опытах на животных с экспериментальным диабетом более 50% введенного белка превращается в глюкозу. Как известно, при диабете организм теряет способность утилизировать глюкозу, и энергетические потребности покрываются за счет окисления аминокислот и жирных кислот. Доказано также, что исходными субстратами для глюконеогенеза являются те аминокислоты, распад которых сопровождается образованием прямо или опосредованно пировиноградной кислоты (например, аланин, серин, треонин и цистеин). Более того, имеются доказательства существования в организме своеобразного циклического процесса—глюкозо-аланинового цикла, участвующего в тонкой регуляции концентрации глюкозы в крови в тех условиях, когда в период между приемами пищи организм испытывает дефицит глюкозы. Источниками пирувата при этом являются указанные аминокислоты, образующиеся в мышцах при распаде белков и поступающие в печень, в которой они подвергаются дезаминированию. Образовавшийся аммиак в печени обезвреживается, участвуя в синтезе мочевины, которая выделяется из организма. Дефицит мышечных белков затем восполняется за счет поступления аминокислот пищи.
[c.548]

Определение качественного и количественного аминокислотного состава белков и пептидов проводят после их гидролиза кислотой или щелочью. Оба вида гидролиза разрушают некоторые аминокислоты. При щелочном гидролизе частично разрушаются цистеин, серии, треонин и происходит частичная рацемизация некоторых аминокислот. При гидролизе соляной кислотой (5,7 н., 105—110° С), которая обычно используется при кислотном гидролизе пептидных связей, практически полностью разрушается триптофан. В связи с этим содержание триптофана в пробах обычно определяют после щелочного гидролиза или спектрофотометрическим методом Кроме того, наблюдаются значительные потери оксиаминокислот (серина, треонина, тирозина), се-русодержащих аминокислот (цистеина, метионина) и частично пролива. При этом степень разрушения аминокислот зависит от чистоты и концентрации НС1, используемой для гидролиза, а также длительности и температуры гидролиза. Следует отметить, что примеси альдегидов при кислотном гидролизе приводят к значительной потере тирозина, а также цистеина, гистидина, глутаминовой кислоты и лизина, а примеси углеводов в больших концентрациях — к разрушению аргинина.

[c.123]

Производные аминокислот обычно циклизуются труднее, особенно в случае глицина, чем те же аминокислоты, входящие в состав пептидов. Для синтеза производных фенил-тиогидантоина (ФТГ) [86, 91] или количественного определения N-концевых остатков ФТК-производные часто циклизуют в 1 н. растворе НС1 в течение 1 час при 100°. Однако в этих условиях ФТГ-производные серина, треонина и цистина нестабильны, поэтому их не удается выделить и количественно определить. Кроме того, все ФТГ-производные в кислой среде разлагаются, причем степень разложения возрастает с увеличением кислотности и повышением температуры [114, 317]. В водной среде максимальный выход ФТГ-производных достигается при действии сильной кислоты при сравнительно низких температурах и по возможности меньшей продолжительности реакции. При низкой температуре реакционной смеси и применении концентрированных кислот (1—5 н.) удалось синтезировать ФТГ-производные серина, треонина и цистина в водной среде [159, 195]. Кроме того, эти соединения легко получаются в среде уксусная кислота — HG1 [289].

[c.240]

Другие группы эритроцитарных антигенов определяют специфичность типа MN. В этом случае антигены также представлены, по-видимому, олигосахаридами, связанными с остатками серина, треонина и аспарагина молекул гликофорина (рис. 5-2). Два идентифицированных антигена имеют следующее строение [86] [c.377]

Образование пептидной связи между двумя аминокислотами или пептидами, помимо самой конденсации, сопряжено с некоторыми дополнительными химическими операциями. Так, при образовании пептидной связи между карбоксильной группой одного реагента и аминогруппой второго часто необходима защита не только концевой а-аминогруппы первого реагента и концевой карбоксильной группы второго, но и других реакционноспособных групп от нежелательных побочных реакций. К числу таких групп относятся боковые аминогруппы лизина и орнитина, гуанидиновая группировка аргинина, гидроксильные группы серина, треонина, оксипролина и тирозина, тиоловая группа цистеина и даже имино-группа имидазольного кольца гистидина. Поэтому при синтезе сложных пептидов применяется целый ряд временных защитных групп, большая часть которых рассматривается» в главе Защитные группы (стр. 190).

[c.158]

Теоретически большинство белков, представленных линейными макромолекулами без больших боковых цепей, удовлетворяют этим критериям и могут образовывать волокна. Однако их способность развертываться в длинные полипептидные цепи в присутствии денатурирующих агентов варьирует в широких пределах. Возможности установления межцепочечных связей в сильной степени зависят от соответствующей доли каждой входящей в состав белка аминокислоты. Так, повышенное содержание в белке серина, треонина, аминокислот с кислыми и основными свойствами приводит к образованию многочисленных электростатических связей и благоприятствует формированию волокон. [c.537]

Серин, треонин, тирозин [c.389]

Эта реакция не пригодна для отщепления С-концевых остатков пролина, так как они не образуют тиогидантоин, остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот, которые образуют циклические ангидриды, а не тиогидантоины (аспарагин и глутамин, наоборот, дают тиогидантоины [301]), а также остатков серина, треонина, цистина, аргинина и лизина [19, 301], которые неустойчивы при циклизации или регенерации аминокислоты из тиогидантоинового производного. Таким образом, этот метод находит весьма ограниченное применение для прямого определения строения пептидов и белков. Для определения С-концевого остатка по разности [107] реакция может оказаться более полезной, но ее все же нельзя использовать для определения аспарагиновой и глутаминовой кислот и пролина. Однако путем микробиологического анализа [107], специфичного для остатков /-аминокислот, эти аминокислоты могут быть определены по потере оптической активности на 50% вследствие рацемизации в том случае, когда они являются С-концевыми.

[c.247]

Следует отметить, что в клетках открыт большой класс цАМФ-зависи-мых протеинкиназ , названных протеинкиназами А они катализируют перенос фосфатной группы на ОН-группы серина и треонина (так называемые серин-треонин-киназы). Другой класс протеинкиназ, в частности активируемый инсулиновым рецептором (см. ранее), действует только на ОН-группу тирозина. Однако во всех случаях добавление высокозарядной и объемной фосфатной группы вызывает не только конформационные изменения фосфорилированных белков, но изменяет их активность или кинетические свойства.

[c.292]

Азидный метод особенно ценен тем, что в общем случае он свободен от рацемизации при проведении реакции только в мягких щелочных условиях, а также поскольку количество защитных групп в полифункциональных боковых радикалах сведено к минимуму, Гидроксигруппы (серина, треонина и тирозина) и боковые цепи (аспарагиновая и глутаминовая кислоты), а также концевые карбоксигруппы аминокомпоненты в процессе пептидного синтеза, проводимого в частично водной среде, могут оставаться незащищенными.

[c.402]

Небольшие олигосахаридные группы часто присоединены к белкам, находящимся на поверхности клеток, а также к секретируемым белкам. Сахарные цепи прикреплены через 0-гликозидную связь к —ОН-группам остатков серина, треонина и оксилизина (только в коллагене) или через Ы-гликозидную связь к амидному азоту аспарагина [43а]. Среди таких гликопротеидов встречаются ферменты, гормоны и струк- [c.117]

Аспарагиновая кислота Гистидин Серин Треонин [c.360]

Для анализа этих соединений, как правило, используется метод исчерпывающего кислотного гидролиза с последующим оире-делением аминокислотного состава гпдролизата. В продуктах гидролиза асфальтетшвых и порфириновых фракций обнаруживается до 12 нингидринположительных соединений, из которых, по крайней мере, шесть идентифицируются как белковые кислоты глицин, аланин, серин, треонин, аспарагиновая и глутаминовая кислоты (рис. 4.2),

[c.134]

Обычные или белковые аминокислоты можно классифицировать по их боковым радикалам. Аминокислоты, содержащие функциональные группы в боковом радикале, например кислые аминокислоты— аспарагиновая и глутаминовая кислота (карбоксильная группа), основные аминокислоты — лизин (аминогруппа), аргинин (гуанидиногруппа) и гистидин (имидазол), а также цистеин (ти-ольная группа) и серин, треонин и тирозин (гидроксильная группа), могут требовать определенной защиты в зависимости от условий создания пептидной связи (см. разд. 23.6.3) и общей стратегии синтеза (см. разд. 23.6.5). Кроме того, в случае аминокислот, содержащих в боковом радикале аминогруппу или карбоксильную группу, сама намечаемая схема синтеза требует четкого разграничения условий синтеза, идущего по этим боковым группам и а-амнно- и карбоксигруппам с тем, чтобы исключить неоднозначность в создаваемой последовательности остатков в конечном продукте. [c.382]

Для гидролиза белков до составляющих их аминокислот обычно используют хлороводородную кислоту (бМ, 24 ч, 120°С, эвакуированные запаянные ампулы). Однако этот метод не лищеи побочных реакций. Из генетически кодированных аминокислот интенсивно распадается триптофан, в то время как выходы серина и треонина составляют только 90—95%. Может происходить также хлорирование тирозина и образование орнитина из аргинина. Нередко метионин частично превращается в соответствующий сульфоксид, а цистеин полностью окисляется в цистин. Глутамин и аспарагин, естественно, гидролизуются до глутаминовой и аспарагиновой кислот. Использование п-толуолсульфокислоты может повысить выход триптофана [11], однако эту аминокислоту обычно определяют после гидролиза с помощью гидроксида бария. С другой стороны, щелочной гидролиз, помимо того, что вызывает рацемизацию, приводит к больщим потерям серина, треонина, цистеина и аргинина. [c.231]

Полярные боковые цепи образуют водородные связи. Типичными полярными и нейтральными боковыми цепями обладают цистеин, серин, треонин, аспарагин, глутамин и тирозин. Из них ys выполняет особую роль, поскольку он способен образовывать поперечные мостики (цистины) между различными частями основной цепи путем присоединения к другому остатку ys (разд. 4.2). Остатки Ser и Thr несут гидроксильные группы, которые могут образовывать водородные связи. В Thr, имеющем асимметрический Ср-атом, активным является только один стереоизомер (рис. . 2,б). Несущие амидные группы аспарагин и глутамин также способны к образованию водородных связей, причем амидные группы функционируют в качестве доноров водорода, а карбонильные — в качестве акцепторов. По сравнению с аспарагином у глутамина имеется лишнее метиленовое звено, придающее полярной группе большую подвижность и ослабляющее ее взаимодействие с основной цепью. Полярная гидроксильная группа Туг, для которой рК = = 10,1 может диссоциировать при высоких значениях pH. Поэтому Туг до некоторой степени аналогичен заряженной группе образованные им водородные связи довольно прочны. Нейтральные полярные остатки могут располагаться как на поверхности, так и внутри белковых молекул. Находясь внутри, они обычно образуют водородные связи между собой или с полипептидным остовом (разд. 3.6). [c.21]

В ЭТОЙ форме они связываются с анионной группой сульфированной смолы. Элюция аминокислоты достигается либо повышением pH и, таким образом, смещением равновесия (2) влево, либо увеличением ионной силы, что приводит к конкурентному связыванию со смолой аминокислот и катионов элюата. Аспарагиновая, глутаминовая и цистеиновая кислоты [последняя образуется в результате окисления цист(е)иновых остатков (см. разд. 23.3.3)] элюируются легче всего, ибо это двухосновные кислоты. Лизин и аргинин, напротив, элюируются с трудом в силу того, что каждый из них несет в боковой группе протонированную группу. М.ежду этими крайними случаями располагаются остальные аминокислоты по мере того как увеличивается гидрофобное взаимодействие их боковых групп с ароматической структурой ионообменной смолы. Не удивительно, что ароматические аминокислоты обладают наибольшим гидрофобным связыванием и выходят лишь перед лизином и аргинином. С другой стороны, присутствие нейтральной полярной группы, такой как гидроксильная или амидная, уменьшает силу гидрофобного взаимодействия, так что серин, треонин, аспа—рагин и глутамин элюируются раньше лейцина, изолейцина и валина. [c.261]

Наши исследования (совместно с М. Ф. Шаховой) методами хроматографии и спектрофотометрии выявили в моркови следующие биологически активные вещества каротиноиды — а- и -каротин, ликопин, полицис-ликопин, флавоксантин и тараксантин аминокислоты — лизин, орнитин, гистидин, цистеин, аспарагин, серин, треонин, пролин, метионин, тирозин, лейцин витамины группы В (холин, бетаин). [c.398]

Еще одним весьма распространенным видом модификации белков является фосфорилирование гидроксигрупп остатков серина, треонина и тирозина, например [c.34]

Метод имеет ряд ограничений. При гидразинолизе разрушаются глутамин, аспарагин, цистеин и цистин аргинин теряет гуанидиновую группировку с образованием орнитина. Гидразиды серина, треонина и глицина лабильны и легко превращаются в свободные аминокислоты, что затрудняет интерпретацию результатов. [c.39]

Реактив Несслера для оксиаминокислот (серин, треонин, оксипролин). [c.486]

Г ЛИЦИН Аланин Валин Лейцин Изолейцин Фенилаланин Пролин Серин Треонин Оксипролин Тирозин [c.287]

Значительная неоднородность структуры шерсти делает ее полное исследование обычными методами очень трудной задачей. Основную часть доступных для определения Й-концевых аминокислот, которые были идентифицированы путем динитро-фенилирования (т. 4, стр. 320), составляют серин, треонин, глицин, аланин и валин. [c.289]

Пептиды недостаточно летучи, чтобы их можно было изучать епосредственно с помощью масс-спектрометрии электронного удара. Первые попытки применения масс-спектрометрии для определения последовательности включали предварительное ацилирование аминогрупп и этерификацию карбоксильных групп. Масс-спектры таких производных показали, что расщепление происходит с обеих сторон карбонильных групп. Расщепление связи С—N приводит к ионам ацилия —ЫНСНДС=0+, в то время как расщепление связи С—С дает альдиминиевые ионы —+NH= HR. Это основная тенденция кроме того, происходит дополнительная фрагментация боковых групп некоторых аминокислот, включая валин, лейцин, аспарагин, серин, треонин и цистеин. [c.278]

Серин, треонин и цистеин не вступают в р-цию, т.к. превращаются в 4-алкилиден-5-оксазолиноны (первые два-из-за отщепления Н2О, последний-Н38). [c.15]

Обработка белков 6 М НС1 при 110°С в вакууме приводит к гидролизу пептидных связей, но одновременно с этим происходит разложение триптофана, гидролиз аспарагина и глутамина соответственно до аспарагиновой и глутаминовой кислот, а также частичное разложение серина, треонина, цист(е)ина. Пептидные связи между аминокислотами с объемистыми боковыми группами, такими как Пе и Val, более устойчивы к гидролизу. Хорошо известно, что гидролизуя образцы белков в течение 1, 2 и 3 дней, необходимо экстраполировать количество таких аминокислот, как Ser и Thr к нулевому времени, а Пе и Val — к бесконечному. В случае цист(е)ина целесообразно перед гидролизом либо окислить его в цистеиновую кислоту, либо превратить в 5-карбоксиметилци-стеин или 4-пиридилэтилцистеин (см. разд. 23.3.3), так как все эти соединения стабильны. Обычно, в особенности если белок содержит углеводы, образуются продукты осмоления. После гидролиза соляную кислоту лучше удалить, так как она мешает при после дующем разделении аминокислот. [c.259]

Поскольку многие гликопротеины содержат лишь небольшое количество углеводов, для их анализа могут быть использованы протеолитические ферменты (например, проназы) при обработке этими ферментами образуются гликопептиды с небольшим числом аминокислотных остатков, к которым присоединены интактные углеводные звенья. Такие гликопептнды анализируют [188] классическими методами периодатного окисления [189] и метилирования, а также последовательным ферментативным гидролизом (см. разд. 26.3.2.11) для идентификации моносахаридных звеньев, в результате которого получают единственный аминокислотный остаток, связанный с моносахаридным звеном. Установлено, что осуществляются только два типа такой связи 0-гликозидная связь с серином, треонином, гидроксипролином и гидроксилизином, и Л -гликозидная связь с аспарагином. Показано, что в образовании таких связей могут участвовать только пять моносахаридов -арабиноза, D-ксилоза, D-галактоза, 2-ацетамидо-2-дезокси-0-глюкоза и 2-ацетамидо-2-дезокси-0-галактоза. [c.265]

Общие сведения, В состав фосфопротеидов входит фосф(]рная кислота (0,40—0,88%), соединенная эфирной связью с оксиаминокислотами (серином, треонином). [c.48]

Помимо четырех перечисленных выше типов дезаминирования аминокислот, выявлены особые механизмы дезаминирования серина, треонина и цистеина, которые дезаминируются в ходе реакции дегидратации, катализируемой специфической дегидратазой. [c.372]

Окуда и Хори [116] выделяли лигнин спиртовым раствором едкого натра по Филиппсу (см. Брауне, 1952, стр. 108) из рисовой и пшеничной соломы, сосновой хвои, листьев дуба и японского кедра. Лигнины содержали 2,6, 0,69, 0,35, 0,67 и 0,28% азота соответственно. Гидролиз лигнинов 6 н. соляной кислотой в течение 24 ч и хроматография на бумаге гидролизатов показали присутствие аргинина, лизина, гистидина, фенилаланина, серина, треонина, лейцина, валина, глицина, аланина, пролива, глютаминовой и аспарагиновой кислот. Гидролизат лигнина из рисовой соломы содержал также метионин. [c.120]

Наиболее подробно изученные гликопротеины содержат углеводы, присоединенные к боковым радикалам аспарагина, серина, треонина и гидроксилизина известны также случаи присоединения к цистеину и гидроксипролину [8]. В случае аспарагина присоединенным углеводным звеном служит УУ-ацетилглюкозамин, а способом присоединения —УУ-р-гликозидная связь с амидной группой аспарагина (9). Аспарагин, по-видимому, всегда входит в по- [c.548]

Помимо перечисленных 4 типов дезаминирования аминокислот и ферментов, катализирующих эти превращения, в животных тканях и печени человека открыты также три специфических фермента (серин- и треониндегидратазы и цистатионин-у-лиаза), катализирующих неокислительное дезаминирование соответственно серина, треонина и цистеина. [c.434]

Синтезированы различные производные продуктов расщепления цианокобаламина. Из кобировой кислоты (IV), хлоругольного эфира и а-аминокислот, таких, как серин, треонин и др., и их метиловых эфиров получены соответствующие пептиды кобировой кислоты [187, 188]. [c.604]

Желательно наличие в средах всего набора аминокислот— аланина, аргинина, аспарагиновой кислоты, вали-на, гистидина, глутамино,вой кислоты, глицина, изолейцина, лейцина, лизина, метионина, пролина, серина, треонина, триптофана, тирозина, фенилаланина, цистеина. Однако не все аминокислоты нужны для развития различных микробов. Наряду со свободными аминокислотами некоторые бактерии нуждаются в комплексах аминокислотных остатков — пептидах, пептонах и других белковых веществах. [c.61]

Анализ крови на аминокислоты (48 показателей)

Количественное исследование для выявления функциональных метаболических изменений (48 показателей).

Протеиногенные аминокислоты

Незаменимые глюкогенные

Аргинин (Arg)

Валин (Val)

Гистидин (His)

Метионин (Met)

Треонин (Thr)

Незаменимые кетогенные

Лейцин (Leu)

Лизин (Lys)

Незаменимые глюко-/кетогенные

Изолейцин (Ile)

Триптофан (Trp)

Фенилаланин (Phe)

Заменимые глюкогенные

Аланин (Ala)

Аспарагин (Asn)

Аспарагиновая кислота (Asp)

Глицин (Gly)

Глутамин (Gln)

Глутаминовая кислота (Glu)

Пролин (Pro)

Серин (Ser)

Таурин (Tau)

Заменимые глюко-/кетогенные

Тирозин (Tyr)

Непротеиногенные аминокислоты

Метаболиты цикла образования мочевины

Аргинин-янтарная кислота, аргининосукцинат (Ars)

Гомоцитруллин (Hci)

Орнитин (Orn)

Протеиногенные аминокислоты

Незаменимые глюкогенные

Аргинин (Arg)

Валин (Val)

Гистидин (His)

Метионин (Met)

Треонин (Thr)

Незаменимые кетогенные

Лейцин (Leu)

Лизин (Lys)

Незаменимые глюко-/кетогенные

Изолейцин (Ile)

Триптофан (Trp)

Фенилаланин (Phe)

Заменимые глюкогенные

Аланин (Ala)

Аспарагин (Asn)

Аспарагиновая кислота (Asp)

Глицин (Gly)

Глутамин (Gln)

Глутаминовая кислота (Glu)

Пролин (Pro)

Серин (Ser)

Таурин (Tau)

Заменимые глюко-/кетогенные

Тирозин (Tyr)

Непротеиногенные аминокислоты

Метаболиты цикла образования мочевины

Аргинин-янтарная кислота, аргининосукцинат (Ars)

Гомоцитруллин (Hci)

Орнитин (Orn)

Ацетилтирозин (Aty)

Метод исследования

Высокоэффективная жидкостная хроматография с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХМС/МС).

Единицы измерения

Мкмоль/л (микромоль на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Аминокислоты – органические вещества, содержащие карбоксильные и аминные группы. Известно около 100 аминокислот, но в синтезе белка участвуют только 20. Данные аминокислоты называются «протеиногенными» (стандартными) и по возможности синтеза в организме классифицируются на заменимые и незаменимые. К незаменимым аминокислотам относятся аргинин, валин, гистидин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, треонин, триптофан, фенилаланин. Заменимыми аминокислотами являются аланин, аспарагин, аспартат, глицин, глутамат, глутамин, пролин, серин, тирозин, цистеин. Протеиногенные и нестандартные аминокислоты, их метаболиты участвуют в различных обменных процессах в организме. Дефект ферментов на различных этапах трансформации веществ может приводить к накоплению аминокислот и их продуктов превращения, оказывать отрицательное влияние на состояние организма.

Нарушения метаболизма аминокислот могут быть первичными (врождёнными) или вторичными (приобретенными). Первичные аминоацидопатии обычно наследуются аутосомно-рецессивно или сцеплено с Х-хромосомой и проявляются в раннем детском возрасте. Заболевания развиваются вследствие генетически обусловленного дефицита ферментов и/или транспортных белков, связанных с метаболизмом определенных аминокислот. В литературе описано более 30 вариантов аминоацидопатий. Клинические проявления могут варьироваться от легких доброкачественных нарушений до тяжелого метаболического ацидоза или алкалоза, рвоты, задержки умственного развития и роста, летаргии, комы, синдрома внезапной смерти новорождённых, остеомаляции и остеопороза. Вторичные нарушения обмена аминокислот могут быть связаны с заболеваниями печени, желудочно-кишечного тракта (например, язвенный колит, болезнь Крона), почек (например, синдром Фанкони), недостаточным или неадекватным питанием, новообразованиями. Ранняя диагностика и своевременное лечение позволяют предупредить развитие и прогрессирование симптомов заболевания.

Актуальность рассмотрения нарушений обмена аминокислот определяется тем, что эта патология отражается в первую очередь на функции нервной системы и является одной из основных причин слабоумия. Знание таких патологий необходимо в практике неонатологов и генетиков для профилактики и коррекции олигофрении.

По возможности синтезироваться аминокислоты в организме делятся заменимые и незаменимые. К незаменимым аминокислотам относятся аргинин, валин, изолейцин, лейцин, метионин, фенилаланин, к заменимым аминокислотам — аланин, глицин, тирозин. При дефекте ферментов на разных этапах трансформации аминокислоты и продукты их превращения могут накапливаться и оказывать отрицательное воздействие на организм.

Различают первичные (врождённые) и вторичные (приобретенные) нарушения метаболизма аминокислот. Врождённые заболевания обусловлены дефицитом ферментов и/или транспортных белков, которые связанны с метаболизмом аминокислот. Приобретенные нарушения аминокислот связаны с заболеваниями печени, ЖКТ, почек, недостаточным или неадекватным питанием, новообразованиями.

В норме наибольшая скорость обмена аминокислот характерна для нервной ткани. Поэтому разнообразные наследственные нарушения обмена являются одной из причин изменения функционирования в первую очередь ЦНС.

К числу наиболее серьезных и достаточно распространенных нарушений обмена относятся аномалии метаболизма фенилаланина и тирозина. Причина фенилкетонурии — врождённый дефицит печеночной фенилаланин–4–гидроксилазы. Это приводит к нарушению концентрации в крови, возникает дефицит тирозиновых и триптофановых производных (меланина, катехоламинов, серотонина). При этом в крови и моче значительно увеличиваются концентрации фенилацетилглутамина, фенилпирувата, фенилацетата. В крови повышается концентрация веществ, которые практически полностью отсутствуют в норме (фенилэтиламин, фенилпируват, фениллактат). Это нейротоксические соединения, они нарушают метаболизм липидов в мозге. В сочетании с дефицитом нейромедиаторов (серотонина) этот механизм считается ответственным за прогрессирующее снижение интеллекта у больных и развитие фенилпировиноградной олигофрении.

Лейциноз («болезнь кленового сиропа») — заболевание обусловлено дефицитом дегидрогеназы разветвленных кетокислот, которая катализирует реакцию окислительного декарбоксилирования. В результате нарушается окисление оксикислот с разветвленной цепью — ОКРЦ, которые образуются при катаболизме аминокислот с разветвленной цепью (лейцин, изолейцин, валин). У больных моча имеет специфический запах кленового сиропа. При данном заболевании особенно патогенно накопление лейцина. Это истинно кетогенная аминокислота. Кетоновые тела играют большую роль в энергообеспечении мозга, особенно при гипогликемии. Нарушение обмена лейцина приводит к развитию умственной отсталости, судорогам, мышечной ригидности, летаргии, рвоте. Отмечаются гипогликемия и кетоацидоз. Основным методом лечения является специальная диета.

Тирозинозы — болезни нарушения обмена тирозина — имеют несколько генокопий и носят аутосомно-рецессивный и аутосомно-доминантный типы наследования, сцепленные с полом. Заболеваемость — 1/20000 населения. Наиболее распространенной формой заболевания признается альбинизм. Наиболее частый механизм заболевания — дефект медьсодержащего фермента меланобластов тирозиназы, блокирующего превращение тирозина в диоксифенилаланин, из которого образуется эпинефрин и меланин. У альбиносов белые кожа и волосы, розово-красные глаза, фотодерматит. Больные страдают фотобоязнью и плохо видят днем вследствие депигментации сетчатки. Нарушение тирозинового обмена приводит к повреждению печени и развитию цирроза.

Поскольку тирозинозы имеют много генокопий и в патогенезе прослеживаются дефекты разных ферментов метаболизма тирозина, то клинически выделяют и другие формы. Среди них наиболее известны тирозиноз Медеса, гипертирозинемия I и II типов, хоукинсурия. При них тирозинемия с тирозинурией часто сочетаются с печеночной и почечной недостаточностью. Хоукинсурия имеет аутосомно-доминантный тип наследования и характеризуется выраженным слабоумием. Ферментативные дефекты метаболизма тирозина могут сопровождаться нарушением продукции тиреоидных гормонов на основе аминокислоты тирозина. Например, дефект йодтирозиндейодиназы – один из механизмов наследственного гипотиреоза с кретинизмом.

Кроме патологических процессов и заболеваний, связанных с обменом аминокислот, следует отметить, что данные вещества широко применяются в спортивном питании. Также в настоящее время популярны системы вегетарианского питания, исключающие поступления в организм белков животного происхождения, а значит, и некоторых незаменимых аминокислот. Комплексное исследование аминокислотного профиля может быть полезно и для данных категорий в целях оценки влияния режима питания на обменные процессы в организме.

Исследование помогает определить уровень аминокислот в крови, их производных, оценить состояние аминокислотного обмена, диагностировать или подтвердить (при наличии характерных симптомов) нарушения обмена аминокислот.

Когда назначается исследование?

Оценка метаболизма незаменимых и заменимых аминокислот.
Выявление функционального дисбаланса в обмене витаминов.
Корректировка диеты.
Нормализация обмена веществ при системных нозологических состояниях у детей старше 1 года и у взрослых на фоне нарушений реабсорбции аминокислот в почечных канальцах.

Что означают результаты?

Референсные значения, мкмоль/л

Компонент	Возраст	Новые референсные значения
Аргинин (Arg)	1 — 2 года	29,00 — 134,00
	2 — 18 лет	21,40 — 113,10
	> 18 лет	7,00 — 111,00
Валин (Val)	1 — 2 года	83,00 — 300,00
	2 — 18 лет	152,10 — 443,00
	> 18 лет	129,60 — 316,40
Гистидин (His)	1 — 2 года	22,00 — 116,00
	2 — 18 лет	52,80 — 88,50
	> 18 лет	46,00 — 95,00
Метионин (Met)	2 — 18 лет	52,80 — 88,50
	2 — 18 лет	13,80 — 32,60
	> 18 лет	12,90 — 32,90
Треонин (Thr)	1 — 2 года	47,00 — 237,00
	2 — 18 лет	67,20 — 211,10
	> 18 лет	60,50 — 237,50
Лейцин (Leu)	1 — 2 года	48,00 — 175,00
	2 — 18 лет	70,00 — 163,20
	> 18 лет	75,70 — 157,00
Лизин (Lys)	1 — 2 года	49,00 — 204,00
	2 — 18 лет	103,50 — 262,60
	> 18 лет	116,20 — 271,60
Изолейцин (Ile)	1 — 2 года	31,00 — 105,00
	2 — 18 лет	33,70 — 120,80
	> 18 лет	36,70 — 94,70
Триптофан (Trp)	1 — 2 года	17,00 — 75,00
	2 — 18 лет	31,00 — 87,70
	> 18 лет	31,80 — 69,00
Фенилаланин (Phe)	1 — 2 года	28,00 — 80,00
	2 — 18 лет	33,90 — 82,80
	> 18 лет	29,50 — 92,00
Аланин (Ala)	1 — 2 года	139,00 — 474,00
	2 — 18 лет	173,90 — 523,70
	> 18 лет	188,30 — 624,20
Аспарагин (Asn)	1 — 2 года	25,00 — 91,00
	2 — 18 лет	25,10 — 67,90
	> 18 лет	27,90 — 67,60
Аспарагиновая кислота (Asp)	1 — 2 года	0,00 — 20,00
	2 — 18 лет	0,00 — 11,40
	> 18 лет	0,00 — 14,70
Глицин (Gly)	1 — 2 года	111,00 — 426,00
	2 — 18 лет	121,10 — 397,80
	> 18 лет	98,70 — 383,90
Глутамин (Gln)	1 — 2 года	316,0 — 1020,0
	2 — 18 лет	311,60 — 732,20
	> 18 лет	314,60 — 746,00
Глутаминовая кислота (Glu)	1 — 2 года	31,00 — 202,00
	2 — 18 лет	40,00 — 99,00
	> 18 лет	40,00 — 159,70
Пролин (Pro)	1 — 2 года	85,00 — 303,00
	2 — 18 лет	90,00 — 267,00
	> 18 лет	90,00 — 226,70
Серин (Ser)	1 — 2 года	69,00 — 271,00
	2 — 18 лет	79,50 — 179,80
	> 18 лет	69,00 — 170,50
Таурин (Tau)	1 — 2 года	37,00 — 177,00
	2 — 18 лет	30,20 — 194,30
	> 18 лет	35,90 — 227,90
Тирозин (Tyr)	1 — 2 года	26,00 — 1115,00
	2 — 18 лет	32,20 — 104,50
	> 18 лет	26,30 — 84,80
Аргинин-янтарная кислота, аргининосукцинат (Ars)	1 — 2 года	0,00 — 2,00
	2 — 18 лет	0,00 — 2,00
	> 18 лет	0,00 — 2,00
Гомоцитруллин (Hci)	1 — 2 года	0,00 — 5,00
	2 — 18 лет	0,00 — 5,00
	> 18 лет	0,00 — 5,00
Орнитин (Orn)	1 — 2 года	20,00 — 130,00
	2 — 18 лет	26,30 — 121,50
	> 18 лет	30,40 — 184,30
Цитруллин (Cit)	1 — 2 года	9,00 — 38,00
	2 — 18 лет	21,40 — 48,80
	> 18 лет	17,50 — 41,10
Аденозилгомоцистеин (Agc)	1 — 2 года	0,00 — 2,00
	2 — 18 лет	0,00 — 2,00
	> 18 лет	0,00 — 2,00
Гомоцистин (Hcy)	1 — 2 года	0,00 — 3,00
	2 — 18 лет	0,00 — 5,00
	> 18 лет	0,00 — 3,00
Цистатионин (Cys)	1 — 2 года	0,00 — 4,00
	2 — 18 лет	0,00 — 4,00
	> 18 лет	0,00 — 4,00
Цистеинсульфат (SSC)	1 — 2 года	—
	2 — 18 лет	0,00 — 8,00
	> 18 лет	0,00 — 8,00
Цистин (Cys)	1 — 2 года	2,00 — 32,00
	2 — 18 лет	0,00 — 38,70
	> 18 лет	7,40 — 46,00
Альфа-аминоадипиновая кислота (Aad)	1 — 2 года	0,00 — 4,00
	2 — 18 лет	0,00 — 5,00
	> 18 лет	0,00 — 5,00
Пипеколиновая кислота (PA)	1 — 2 года	—
	2 — 18 лет	0,00 — 3,10
	> 18 лет	0,00 — 3,20
Сахаропин (Sac)	1 — 2 года	—
	2 — 18 лет	0,00 — 3,00
	> 18 лет	0,00 — 3,00
Гидроксилизин (Hly)	1 — 2 года	0,00 — 4,00
	2 — 18 лет	0,00 — 3,00
	> 18 лет	0,00 — 3,00
Гидроксипролин (Hyp)	1 — 2 года	8,00 — 61,00
	2 — 18 лет	10,40 — 37,70
	> 18 лет	4,90 — 21,90
1-Метилгистидин (1-MH)	1 — 2 года	0,00 — 11,00
	2 — 18 лет	1,50 — 6,00
	> 18 лет	2,30 — 7,00
3-Метилгистидин (3-MH)	1 — 2 года	0,00 — 4,00
	2 — 18 лет	0,00 — 24,90
	> 18 лет	0,00 — 23,10
Ансерин (Ans)	1 — 2 года	0,00 — 3,00
	2 — 18 лет	0,00 — 3,00
	> 18 лет	0,00 — 3,00
Бета-аланин (Bal)	1 — 2 года	0,00 — 28,00
	2 — 18 лет	0,00 — 10,00
	> 18 лет	0,00 — 10,00
Карнозин (Car)	1 — 2 года	0,00 — 13,00
	2 — 18 лет	0,00 — 5,00
	> 18 лет	0,00 — 5,00
Саркозин (Sar)	1 — 2 года	0,00 — 5,00
	2 — 18 лет	2,00 — 19,40
	> 18 лет	2,40 — 12,90
Альфа-аминомасляная кислота (Abu)	1 — 2 года	7,00 — 28,00
	2 — 18 лет	10,20 — 40,10
	> 18 лет	11,80 — 45,90
Бета-аминоизомасляная кислота (bAib)	1 — 2 года	0,00 — 9,00
	2 — 18 лет	0,00 — 3,90
	> 18 лет	0,00 — 3,20
Гамма-аминомасляная кислота (gAbu)	1 — 2 года	0,00 — 4,00
	2 — 18 лет	0,00 — 5,00
	> 18 лет	0,00 — 5,00
Фосфосерин (Pse)	1 — 2 года	0,00 — 109,00
	2 — 18 лет	0,00 — 4,00
	> 18 лет	0,00 — 4,00
Фосфоэтаноламин (Pet)	1 — 2 года	0,00 — 6,00
	2 — 18 лет	0,00 — 12,70
	> 18 лет	0,00 — 14,20
Этаноламин (Eta)	1 — 2 года	0,00 — 70,00
	2 — 18 лет	0,00 — 14,00
	> 18 лет	0,00 — 15,30
Алло-изолейцин (Ail)	1 — 2 года	0,00 — 2,00
	2 — 18 лет	0,00 — 3,00
	> 18 лет	0,00 — 3,00
Ацетилтирозин (Aty)	1 — 2 года	0,00 — 115,00
	2 — 18 лет	0,00 — 106,00
	> 18 лет	0,00 — 130,00

Повышение общего количества аминокислот наблюдается:

при эклампсии, нарушении толерантности к фруктозе, диабетическом кетоацидозе, почечной недостаточности, синдроме Рейе.

Снижение общего количества аминокислот наблюдается:

при голодании, гиперфункции коры надпочечников, длительной лихорадке, хорее Гентингтона, синдроме мальабсорбции при тяжелых заболеваниях желудочно-кишечного тракта, гиповитаминозе, нефротическом синдроме, ревматоидном артрите.

Скрининг позволяет исключить многие аминоацидопатии (по той или иной аминокислоте).

Скачать пример результата

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, эндокринолог, репродуктолог, андролог, ревматолог, онколог, терапевт, специалист антивозрастной медицины, геронтолог, психиатр, хирург, кардиолог, нефролог, диетолог.

БИБЛИОТЕКА

Опухолевые супрессоры и мутаторные гены

Копнин Б.П.

ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

3.7. Компоненты сигнальных путей TGFb-Smad

Как опухолевые супрессоры классифицированы и некоторые компоненты сигнальных путей, регулируемых TGF-β. Этот цитокин, в зависимости от типа клеток-мишеней и их микроокружения, может вызывать остановку размножения, стимуляцию дифференцировки, а в некоторых случаях и апоптоз. Свои антипролиферативные и дифференцировочные эффекты (они наблюдаются в нормальных эпителиальных, эндотелиальных и гемопоэтических клетках) TGF-β реализует по следующему механизму. Его связывание с RII-субъединицей рецептора, обладающей серин-треонин киназной активностью, вызывает рекрутирование и фосфорилирование второй субъединицы рецептора — RI, также являющейся серин-треониновой киназой. Основной мишенью киназы Tb-RI являются, в зависимости от типа клеток, белки Smad2 или Smad3 — так называемые рецепторные Smad. Их фосфорилированные формы образуют комплекс с белком Smad4, который транспортируется в ядро и, образуя еще более сложные комплексы с другими транскрипционными кофакторами, функционирует в качестве активаторов транскрипции одних генов и репрессоров других генов. В частности, он репрессирует ген MYC и транс-активирует гены ингибиторов циклинзависимых киназ (CKIs) p15^Ink4b, p27^Kip1 и p21^Waf1/Cip1, что ведет к ингибированию функции Cdk4, Cdk2 и остановке клеточного цикла в G1. При этом, репрессия MYC играет ключевую роль в проведении антипролиферативного сигнала TGF-β, так как именно она «разрешает» стимуляцию транскрипции генов CKI комплексом Smad2(3)/Smad4/Sp1 (предполагается, что Myc закрывает места посадки этого комплекса в генах p15^Ink4b, p27^Kip1 и p21^Waf1/Cip1). При гиперэкспрессии онкогена МYC, которая характерна для многих новообразований человека, TGF-β не способен вызвать понижение его экспрессии, достаточное для «разрешения» стимуляции транскрипции генов CKI, и в результате TGF-β не оказывает антипролиферативного действия.

Инактивирующие мутации компонентов этого сигнального пути, а именно рецептора TGF-β (TbR-II), Smad2 и Smad4 характерны для опухолей толстого кишечника, рака поджелудочной железы, желчного пузыря, легкого, а также некоторых других новообразований. Герминальные мутации в одном из аллелей генов TbR-II или Smad4 ассоциированы с развитием семейных форм рака толстого кишечника и желудка. Интересно, что у трансгенных мышей с повреждением одного из аллелей гена TbR-II, Smad2 или Smad4 частота развития опухолей не повышается, однако гетерозиготная инактивация одновременно и гена Smad4 и гена APC резко увеличивает вероятность развития инвазирующих опухолей кишечника. Сходная картина наблюдается у мышей с нокаутом одного из аллелей гена Smad3. В этом случае наблюдается развитие в молодом возрасте множественных метастазирующих колоректальных карцином.

Основы правильного питания — Школа здоровья — ГБУЗ Городская поликлиника 25 г. Краснодара МЗ КК

25 сентября 2019 г.

Значение белков, жиров и углеводов (БЖУ) в питании человека

Значение белка в питании здорового человека

Белки – сложные азотсодержащие биополимеры, мономерами которых служат α-аминокислоты. Белки – высокомолекулярные соединения. Их молекулярная масса колеблется от 6000 до 100000 и более. Аминокислотный состав различных белков неодинаков и является важнейшей характеристикой каждого белка, а также критерием его ценности в питании. Аминокислоты – органические соединения, в которых имеются две функциональные группы – карбоксильная, определяющая кислотные свойства молекул и аминогруппа, придающая этим соединениям основные свойства.

Среди большого число природных аминокислот в составе белков с наибольшим постоянством обнаруживают следующие 20 аминокислот: глицин (гликокол), аланин, серин, треонин, метионин, цистин, валин, лейцин, изолейцин, глутаминовая кислота, глутамин, аспарагиновая кислота, аспарагин, аргинин, лизин, фенилаланин, тирозин, гистидин, триптофан, пролин.

Все белки принято делить на простые (протеины) и сложные (протеиды). Под простыми понимают соединения, включающие в свой состав лишь полипептидные цепи, под сложными белками – соединения, в которых наряду с белковой молекулой имеется также небелковая часть – так называемая простетическая группа. В зависимости от пространственной структуры белки можно разделить на глобулярные и фибриллярные. К числу простых глобулярных белков относятся, в частности, альбумины, глобулины, проламины и глютелины. Альбумины и глобулины широко распространены в природе и составляют основную часть белков сыворотки крови, молока и яичного белка. Проламины и глютелины относятся к растительным белкам и встречаются в семенах злаков, образуя основную массу клейковины. Эти белки нерастворимы в воде. К проламин относятся глиадин пшеницы, зеин кукурузы, гордеин ячменя. Аминокислотный состав этих белков характеризуется низким содержанием лизина, а также треонина, метионина и триптофана и чрезвычайно высоким – глутаминовой кислоты.

Представители структурных белков, так называемые протеиноиды, являются фибриллярными белками главным образом животного происхождения. Эти белки выполняют в организме опорную функцию. Они нерастворимы в воде и весьма устойчивы к перевариванию пищеварительными ферментами. К ним относятся кератины (белки волос, ногтей, эпидермиса), эластин (белок связок, соединительной ткани сосудов и мышц), коллаген (белок костной, хрящевой, рыхлой и плотной соединительной ткани). При длительном кипячении в воде коллаген превращается в водорастворимый белок – желатин (глютин). Коллаген содержит значительное количество необычных для других белков аминокислот оксипролина и оксилизина, но в нем отсутствует триптофан.

Основные функции белков в организме.

1. П л а с т и ч е с к а я. Белки составляют 15-20% сырой массы различных тканей (в сравнении – липиды и углеводы лишь 1-5%) и являются основным строительным материалом клетки, ее органоидов и межклеточного вещества. Белки наряду с фосфолипидами образуют остов всех биологических мембран, играющих важную роль в построении клеток и их функционировании.

2. К а т а л и т и ч е с к а я. Белки являются основным компонентом всех без исключения известных в настоящее время ферментов. При этом простые ферменты представляют собой чисто белковые соединения. В построении сложных ферментов наряду с молекулами белка участвуют и низкомолекулярные соединения (коферменты). Ферментам принадлежит решающая роль в ассимиляции пищевых веществ организмом человека и в регуляции всех внутриклеточных обменных процессов.

3. Г о р м о н а л ь н а я. Значительная часть гормонов по своей природе является белками или полипептидами. К их числу принадлежит инсулин, гормоны гипофиза (АКТГ, соматотропный, тиреотропный и др.), паратиреоидный гормон.

4. Ф у н к ц и я с п е ц и ф и ч н о с т и. Чрезвычайное разнообразие и уникальность индивидуальных белков обеспечивают тканевую индивидуальную и видовую специфичность, лежащую в основе проявлений иммунитета и аллергии. В ответ на поступление в организм чужеродных для него белков – антигенов – в иммунокомпетентных органах и клетках происходит активный синтез антител, представляющих особый вид глобулинов (иммуноглобулины). Специфическое взаимодействие антигена с соответствующими антителами составляет основу иммунных реакций, обеспечивающих защиту организма от чужеродных агентов.

5. Т р а н с п о р т н а я. Белки участвуют в транспорте кровью кислорода (Hb), липидов (липопротеиды), углеводов (гликопротеиды), некоторых витаминов, гормонов, лекарственных веществ и др. Вместе с тем специфические белки-переносчики обеспечивают транспорт различных минеральных солей и витаминов через мембраны клеток и субклеточных структур.

Белки организма – чрезвычайно динамичные структуры, постоянно обновляющие свой состав вследствие непрерывно протекающих и тесно сопряженных друг с другом процессов их распада и синтеза. Организм человека практически лишен резерва белка, причем углеводы и жиры также не могут служить его предшественниками. В связи с этим единственным источником пополнения фонда аминокислот и обеспечения равновесия процессов синтеза и распада белков в организме могут служить пищевые белки, являющиеся вследствие этого незаменимыми компонентами пищевого рациона.

Белки, содержащиеся в пищевых продуктах, не могут однако, непосредственно усваиваться организмом и должны быть предварительно расщеплены в желудочно-кишечном тракте до составляющих их аминокислот, из которых организм формирует характерные для него белковые молекулы. Из 20 аминокислот, образующихся при гидролизе белков, 8 (валин, лейцин, изолейцин, треонин, фенилаланин, триптофан, метионин, лизин) не синтезируются в организме человека и поэтому являются незаменимыми факторами питания. Для детей в возрасте до года незаменимой аминокислотой служит также гистидин. Другие 11 аминокислот могут претерпевать в организме взаимопревращения и не являются незаменимыми. Поскольку для построения подавляющего большинства белков организма человека требуются все 20 аминокислот, но в различных соотношениях, дефицит любой из незаменимых аминокислот в пищевом рационе неизбежно ведет к нарушению синтеза белков.

При нарушении сбалансированности аминокислотного состава рациона синтез полноценных белков также нарушается, что ведет к возникновению ряда патологических изменений. В связи с этим пищевые белки следует рассматривать, прежде всего, как поставщики в организм человека незаменимых аминокислот. Наряду с использованием для синтеза белковых молекул аминокислоты могут окисляться в организме и служить источником энергии. Конечными продуктами катаболизма аминокислот являются углекислый газ, вода и аммиак, который выводится из организма в виде мочевины и некоторых других менее токсичных соединений.

Недостаточное поступление с пищей белков нарушает динамическое равновесие процессов белкового анаболизма и катаболизма, сдвигая его в сторону преобладания распада собственных белков организма, в том числе и белков ферментов.

Избыточное поступление пищевых белков также небезразлично для организма. Оно вызывает усиленную работу пищеварительного аппарата, значительную активацию процессов межуточного обмена аминокислот и синтеза мочевины, увеличивает нагрузку на клубочковый и канальцевый аппарат почек, связанную с усиленной экскрецией конечных продуктов азотистого обмена. При этом может возникать перенапряжение указанных процессов с их последующим функциональным истощением. Избыточное поступление в организм белков может также вести к образованию в желудочно-кишечном тракте продуктов их гниения и неполного расщепления, способных вызывать интоксикацию человека.

Важным показателем качества пищевого белка может служить и степень его усвояемости, которая объединяет протеолиз в желудочно-кишечном тракте и последующее всасывание аминокислот. По скорости переваривания протеолитическими ферментами пищевые белки можно расположить в следующей последовательности: 1) рыбные и молочные, 2) мясные, 3) белки хлеба и круп.

Хлеб и хлебобулочные изделия, крупы и макаронные изделия содержат 5-12% белка; с учетом значительного потребления этих продуктов жителями нашей страны они вносят весьма существенный вклад в обеспечение человека белком. Однако белок хлебобулочных изделий и круп дефицитен по ряду аминокислот, в первую очередь по лизину, и не является достаточно полноценным.

Страница не найдена |

404. Страница не найдена

Архив за месяц

ПнВтСрЧтПтСбВс

10111213141516

17181920212223

24252627282930

3031

15161718192021

25262728293031

123

45678910

17181920212223

2728293031

1234

567891011

891011121314

11121314151617

28293031

1234

12345

6789101112

567891011

12131415161718

19202122232425

3456789

17181920212223

24252627282930

12345

13141516171819

20212223242526

2728293031

15161718192021

22232425262728

2930

Архивы

Июн

Июл

Авг

Сен

Окт

Ноя

Дек

Метки

Настройки
для слабовидящих

Молекулярные изменения при спорадическом раке яичников

Также как и при других опухолях, ключевую ответственность за мультишаговый процесс канцерогенеза в яичниках несут мутации нормальных генов, регулирующих рост и дифференцировку клеток. 60 онкогенов были идентифицированы при РЯ, значение не всех их в патогенезе этих опухолей уточнено. Мутации протоонкогенов, превращающие их в онкогены, могут иметь различное выражение: инсерция (вставка нуклеотидов), инверсия (замена порядка локусов на обратный в хромосомах), делеция, транслокация (перемещение генетического материала), амплификация, гипометилирование.

3 основных категории генов причастны к возникновению РЯ – прото-онкогены, которые являются промоторами роста и дифференцировки клеток, супрессорные гены – негативные регуляторы роста клеток и гены, отвечающие за исправления дефектов ДНК.

Наиболее значимы из онкогенов при РЯ – гены KiRAS, HRAS.

KiRAS кодирует белок р21 (гуанозин трифосфат, который в норме взаимодействует с рецепторами тирозин киназ и активирует сигнальную трансдукцию). Особенно часто описывается мутация гена KiRAS при муцинозном РЯ.

Мутации гена H-RAS встречаются реже. Они ответственны за усиление транскрипционных сигналов через ER, рецепторы глюкокортикоидов.

АКТ2 – ген, кодирующий серин-треонин протеин киназу, его амплификация отмечается в 10-15% случаев спорадического РЯ. Встречаются мутации этого гена главным образом у больных с III и IV стадиями и никогда при доброкачественных и пограничных опухолях. Мутации АКТ-2 ведут к активации и гиперэкспрессии EGF, IGF, PDGF, FGF (эпидермального, инсулиноподобного, выделенного из тромбоцитов и фибробластного факторов роста).

PIK3CA амплифицирован у 58% пациенток, активация этого гена влияет на неблагоприятный прогноз РЯ.

Амплификация или оверэкспрессия гена Erb В2 (Her2/neu) наблюдается в 26% случаев рака яичников, материалы по поводу прогностической значимости дефектов этого гена овариальных опухолей противоречивы.

При РЯ обнаружены мутации или потеря экспрессии следующих супрессорных генов р53 (в 50%): VHL, ENIT, RASSFIA, p27^kipi, PAI-I и др.

Характерными для РЯ являются потеря гетерозиготности, делеции аллелей (отмечаются в 3, 6, 7, 9, 11, 17, 18, 19 и 22 хромосомах). Мутации или потеря супрессорных генов ведут к ослаблению их сдерживающего влияния на пролиферацию, дезрегулируют физиологическую гибель клеток.

При спорадическом РЯ описывается и микросателлитная нестабильность, обусловленная мутациями или потерей генов группы MMR, отвечающая в норме за исправление дефектов ДНК.

По монографии А.М. Гарина, И.С. Базина
«Десять наиболее распространенных злокачественных опухолей»,
г. Москва, 2006

Антивозрастной экспресс-уход «Ольга Ромашко Повернем время вспять» 3 в 1

Сыворотка «ОЛЬГА РОМАШКО» повернем время вспять 80 мл
Состав (INCI)	вода дистиллированная, глицерин
Живые молекулы — бесценные естественные компоненты клеток нашей кожи:
1.	Аминокислоты: Аланин, Аргинин, Аспарагиновая кислота, Валин, Глутамин, Глицин, Гистидин, Изолейцин, Лейцин, Лизин, Метионин, Пролин, Серин, Треонин, Триптофан, Цистеин;
2.	Витамины: A, B1, B2, B6, C, D1, E, F, K, U, P, PP, Никотинамид, Фолиевая кислота, Холин;
3	Минеральные соли: Na, K, Mg, Zn;
4.	Моносахариды: Глюкоза, Маннит, Мальтоза, Рибоза, Сахароза, Фруктоза;
5.	Фрагменты РНК и ДНК: Аденилсульфат, Урацил, 2-дезоксирибоза; Sensicare C 1000, пищевая отдушка Джинджер.
Применение	Сыворотки можно использовать и самостоятельно, и в сочетании с кремами. Она усиливает действие любого крема, как для лица, так и для век. Наносить ее можно утром и вечером, смазывая тампоном кожу лица, шеи и век. Дать сыворотке подсохнуть и нанести подходящий Вам крем. Результат виден через 2 недели. На флаконе указана четкая инструкция по применению сыворотки.
Частота использования	до 30 лет – 1 раз в неделю, до 40 лет – 2 раза в неделю, от 40 лет — 3 раза в неделю.
Рекомендации	Для нанесения сыворотки на лицо подходит тампон. В этом случае сыворотка распределяется более равномерно и исключается возможность попадания ее в глаза. Гипоаллергенно. Хранить в холодильниике.
Страна производитель	Россия
Крем- маска для лица «ОЛЬГА РОМАШКО» лифтинг 25 мл
Состав по INCI:
Olive Oil; Bulls Bone Marrow Oil; Coconut Oil; Сaprylic/Capric Triglycerides; Wheat Germ Oil; Jojoba Oil, Aqua Destillata; Pentaerythrityl dioleate(and)Glyceryl dioleate; Sorbitan oleate; Tocopheryl acetate; Glicerol;
Живые молекулы:
1.	Аминокислоты: Alanine, Arginine, Asparagine; Aspartic Acid; Cysteine, Glutamine, Glutamic Acid, Glicine, Histidine, Isoleucine, Leucine, Lysine, Methionine, Phenylalanine, Proline, Serine, Threonine, Tryptophan,Tyrosine, Valine;
2.	Витамины: A, B1, B2, B6, С, D1, E, F, H, K, U, Р, Folic Acid, Cholin, Nicotinamide;
3.	Минеральные соли: Na, K, Ca, Mg, Zn;
4.	Моносахариды: Glucose, Sucrose, Mannitol, Maltose, Fructose , Ribose;
5.	Мононуклеотиды: Adeninsulfate, Uracile, 2-desoksiribose; SENSICARE C 1000; Fragrance.
Применение	Наносите крем-маску в любое время суток на 30-40 минут. Промокните теплой влажной махровой салфеткой и приступайте к макияжу. Смывать не нужно.
После 35 лет используйте 2-3-4 раза в неделю на ночь, а после 50 можно каждый день. Ваша кожа сама подскажет Вам частоту применения. Она самый лучший эксперт!
Гипоаллергенно. Открыли баночку — Храните крем в холодильнике. Полный состав на каждой коробке снизу. Сохраните её.
Производство	Россия
Пенка для лица «ОЛЬГА РОМАШКО»очищение 75 мл
Состав по INCI:
Aqua Distillata; Olive Oil; Soybean Oil; Сucumis sativa extract; Emulsifying Wax; Stearic Acid; Glycerol; Triethanolamine; Disodium Laureth Sulfosuccinate; Vital Moleculas; SENSICARE C 1000.
Живые молекулы:
1.	Аминокислоты: Alanine, Arginine, Asparagine, Aspartic Acid, Cysteine, Glutamine, Glutamic Acid, Glicine, Histidine, Isoleucine, Leucine, Lysine, Methionine, Phenylalanine, Proline, Serine, Threonine, Tryptophan,Tyrosine, Valine;
2.	Витамины: A, B1, B2, B6, С, D1, E, F, H, K, U,Р,PP, Folic Acid,Cholin, Nicotinamide;
3.	Минеральные соли: Na, K, Ca, Mg, Zn;
4.	Моносахариды: Glucose, Sucrose, Mannitol, Maltose, Fructose , Ribose;
5.	Мононуклеотиды: Adeninsulfate, Uracile, 2-desoksiribose.
Применение	Гипоаллергенно. Применять можно и утром, и вечером. Наносите Пенку на смоченное теплой водой лицо и шею. Слегка «размыльте» и смойте слегка теплой водой. После вскрытия тубы — храните её в холодильнике. Рецептуры запатентованы.
Кожа — очищенная, нежная, упругая.
Производство	Россия

Фосфорилирование серина / треонина при передаче цитокинового сигнала

Дарнелл Дж. Э. Младший, Керр И. М., Старк Г. Р.. Пути Jak-STAT и активация транскрипции в ответ на IFN и другие внеклеточные сигнальные белки Science 1994 264 : 1415–1421

PubMed Статья Google Scholar

Ihle JN. Семейство протеинтирозинкиназ Janus и его роль в передаче сигналов цитокинов Adv Immunol 1995 60 : 1–35

CAS PubMed Статья Google Scholar

Ларнер А.С., Дэвид М., Фельдман Г.М., Игараши К., Хакетт Р.Х., Уэбб Д.С., Свитцер С.М., Петрикоин Э.Ф. III, Финблум Д.С.Фосфорилирование тирозина ДНК-связывающих белков множеством цитокинов Science 1993 261 : 1730–1733

CAS PubMed Статья Google Scholar

Ларнер AC, Finbloom DS. Фосфорилирование белкового тирозина как механизм, регулирующий активацию цитокинами генов раннего ответа Biochim Biophys Acta 1995 1266 : 278–287

PubMed Статья Google Scholar

Finbloom DS, Larner AC.Индукция генов раннего ответа интерферонами, интерлейкинами и факторами роста путем фосфорилирования тирозина латентных факторов транскрипции. Последствия для хронических воспалительных заболеваний Arthr Rheum 1995 38 : 877–889

CAS Статья Google Scholar

Finbloom DS, Larner AC. Регулирование сигнального пути Jak / STAT Cell Signal 1995 7 : 739–745

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Капур Р., Эверетт Е.Т., Уффманн Дж., МакЭндрюс-Хилл М., Купер Р., Райдер Дж., Вик Т., Уильямс Д.А.Сверхэкспрессия фактора стволовых клеток человека нарушает развитие меланоцитов, тучных клеток и тимоцитов: роль опосредованной рецепторной тирозинкиназой активации митоген-активируемой протеинкиназы в дифференцировке клеток Кровь 1997 90 : 3018–3026

CAS PubMed Google Scholar

Капур Р., Маджумдар М., Сяо Х, МакЭндрюс-Хилл М., Шиндлер К., Уильямс Д.А. Передача сигналов через взаимодействие ограниченного мембраной фактора стволовых клеток и тирозинкиназы рецептора c-kit: генетические доказательства дифференциальной роли в эритропоэзе Кровь 1998 91 : 879–889

CAS PubMed Google Scholar

Дуронио В., Шайд М.П., Эттингер С.Нижестоящие сигнальные события регулируются активностью фосфатидилинозитол-3-киназы Cell Signal 1998 10 : 233–239

CAS PubMed Статья Google Scholar

Craddock BL, Welham MJ. Интерлейкин-3 индуцирует ассоциацию протеин-тирозинфосфатазы SHP2 и фосфатидилинозитол-3-киназы с тирозин-фосфорилированным белком массой 100 кДа в гематопоэтических клетках J Biol Chem 1997 272 : 29281–293289

PubMed Статья Google Scholar

Андерсон С.М., Бертон Е.А., Кох Б.Л.Фосфорилирование Cb1 после стимуляции интерлейкином-3 и его ассоциация с Grb2, Fyn и фосфатидилинозитол-3-киназой J Biol Chem 1997 272 : 739–745

CAS PubMed Статья Google Scholar

Миншалл С., Аркинс С., Фройнд Г.Г., Келли К.В. Потребность в фосфатидилинозитол-3-киназе для защиты гемопоэтических предшественников от апоптоза зависит от внеклеточного фактора выживания. J Immunol 1996 156 : 939–947

CAS PubMed Google Scholar

Kubota Y, Angelotti T, Niederfellner G, Herbst R, Ullrich A.Активация фосфатидлинозитол-3-киназы необходима для дифференцировки клеток FDC-P1 после стимуляции рецепторных тирозинкиназ типа III Cell Growth Differ 1998 9 : 247–256

CAS PubMed Google Scholar

Vanhaesebroeck B, Leevers SJ, Panayotou G, Waterfield MD. Фосфоинозитид-3-киназы: консервативное семейство сигнальных преобразователей Trends Biochem Sci 1997 22 : 267–272

CAS Статья Google Scholar

Pullen N, Thomas G.Модульное фосфорилирование и активация p70S6K FEBS Lett 1997 410 : 78–82

CAS PubMed Статья Google Scholar

Вниз J. Механизмы и последствия активации протеинкиназы B / Akt Curr Opin Cell Biol 1998 10 : 262–267

CAS PubMed Статья Google Scholar

Delcommenne M, Tan C, Gray V, Rue L, Woodgett J, Dedhar S.Фосфоинозитид-3-ОН-киназа-зависимая регуляция гликоген-синтазы-киназы 3 и протеинкиназы B / AKT с помощью интегрин-связанной киназы Proc Natl Acad Sci USA 1998 95 : 11211–11216

CAS PubMed Статья Google Scholar

Scheid MP, Duronio V. Диссоциация цитокин-индуцированного фосфорилирования Bad и активация PKB / akt: участие MEK перед фосфорилированием Bad Proc Natl Acad Sci USA 1998 95 : 7439–7444

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Чжа Дж., Харада Х., Ян Э., Джокель Дж., Корсмейер С.Дж.Фосфорилирование серина агониста смерти Плохо в ответ на фактор выживания приводит к связыванию с 14-3-3, а не с Bcl-xL Cell 1996 87 : 619-628

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

дель Песо Л., Гонсалес-Гарсия М., Пейдж С, Эррера Р., Нуньес Г. Интерлейкин-3-индуцированное фосфорилирование BAD через протеинкиназу Akt Science 1997 278 : 687–689

CAS PubMed Статья Google Scholar

Datta SR, Dudek H, Tao X, Masters S, Fu H, Gotoh Y, Greenberg ME.Akt-фосфорилирование BAD связывает сигналы выживания с внутренним механизмом смерти клетки Cell 1997 91 : 231–241

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Scheid MP, Duronio V. Активность фосфатидилинозитол-3-ОН киназы не требуется для активации митоген-активирующей протеинкиназы цитокинами J Biol Chem 1996 271 : 18134–18139

CAS PubMed Статья Google Scholar

Scheid MP, Schubert KM, Duronio V.Регулирование плохого фосфорилирования и ассоциации с Bcl-xL киназой MAPK / ERK J Biol Chem 1999 274 : 31108–31113

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Scheid MP, Lauener RW, Duronio V. Роль активности фосфатидилинозитол-3-ОН-киназы в ингибировании апоптоза в гемопоэтических клетках: ингибиторы фосфатидилинозитол-3-ОН-киназы выявляют разницу в передаче сигналов между интерлейкином-3 и гранулоцитарно-макрофагальным колониестимулирующим фактором25 Biochem J : 159–162

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

25
Craddock BL, Orchiston EA, Hinton HJ, Welham MJ.Диссоциация апоптоза от пролиферации, активации протеинкиназы B и плохого фосфорилирования в передаче сигналов фосфоинозитид 3-киназы, опосредованной интерлейкином-3 J Biol Chem 1999 274 : 10633–10640
CAS PubMed Статья Google Scholar

26
Hinton HJ, Welham MJ. Цитокин-индуцированная активация протеинкиназы B и плохое фосфорилирование не коррелируют с выживаемостью гемопоэтических клеток J Immunol 1999 162 : 7002–7009
CAS PubMed Google Scholar

27
Веннстрем S, Вниз Дж.Роль фосфоинозитид-3-киназы в активации ras и митоген-активированной протеинкиназы эпидермальным фактором роста Mol Cell Biol 1999 19 : 4279–4288
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

28
Sutor SL, Vroman BT, Armstrong EA, Abraham RT, Karnitz LM. Зависимый от фосфатидилинозитол-3-киназы путь, который по-разному регулирует c-Raf и A-Raf J Biol Chem 1999 274 : 7002–7010
CAS PubMed Статья Google Scholar

29
Дамен Дж. Э., Лю Л., Ростен П., Хамфрис Р. К., Джефферсон А. Б., Майерус П. В., Кристал Дж.Белок массой 145 кДа, индуцированный для связывания с Shc множеством цитокинов, представляет собой инозитолтетрафосфат и фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфат-5-фосфатазу Proc Natl Acad Sci USA 1996 93 : 1689–1693
CAS PubMed Статья Google Scholar

30
Хубер М., Хельгасон С.Д., Шейд М.П., Дуронио В., Хамфрис Р.К., Кристал Дж. Целенаправленное нарушение SHIP приводит к индуцированной стальным фактором дегрануляции тучных клеток EMBO J 1998 17 : 7311–7319
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

31
Дэвид М., Петрикоин Э, Бенджамин С., Пайн Р., Вебер М.Дж., Ларнер А.С.Потребность в активности MAP-киназы (ERK2) в экспрессии генов, стимулированной интерфероном альфа и интерфероном бета, посредством белков Stat Science 1995 269 : 1721–1723
CAS PubMed Статья Google Scholar

32
Сакацуме М., Станкато Л.Ф., Дэвид М., Сильвеннойнен О., Сахаринен П., Пирс Дж., Ларнер А.С., Финблум Д.С. Гамма-активация Raf-1 интерфероном является Jak1-зависимой и p21 ras-независимой J Biol Chem 1998 273 : 3021–3026
CAS PubMed Статья Google Scholar

33
Stancato LF, Sakatsume M, David M, Dent P, Dong F, Petricoin EF, Krolewski JJ, Silvennoinen O, Saharinen P, Pierce J, Marshall CJ, Sturgill T, Finbloom DS, Larner AC.Бета-интерферон и онкостатин M активируют Raf-1 и митоген-активированную протеинкиназу через JAK1-зависимый путь Mol Cell Biol 1997 17 : 3833–3840
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

34
Войновски Л., Циммер А.М., Бек Т.В., Хан Х., Бернал Р., Рапп У.Р., Циммер А. Апоптоз эндотелия у Braf-дефицитных мышей Nat Genet 1997 16 : 293–297
CAS PubMed Статья Google Scholar

35
Войновски Л., Станкато Л.Ф., Циммер А.М., Хан Х., Бек Т.В., Ларнер А.С., Рапп У.Р., Циммер А.Протеинкиназа c-raf-1 необходима для развития мышей Mech Dev 1998 76 : 141–149
CAS PubMed Статья Google Scholar

36
Yu CL, Meyer DJ, Campbell GS, Larner AC, Carter-Su C, Schwartz J, Jove R. Повышенная ДНК-связывающая активность Stat3-родственного белка в клетках, трансформированных онкопротеином Src Science 1995 269 : 81–83
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

37
Чатурведи П., Редди М.В., Редди Е.П.Киназы Src, а не JAK, активируют STAT во время индуцированной IL-3 пролиферации миелоидных клеток Онкоген 1998 16 : 1749–1758
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

38
Джайн Н., Чжан Т., Фонг С.Л., Лим С.П., Цао Х. Подавление активности Stat3 путем активации митоген-активированной протеинкиназы (MAPK) Онкоген 1998 17 : 3157–3167
CAS PubMed Статья Google Scholar

39
Stancato LF, Yu CR, Petricoin EF III, Larner AC.Активация Raf-1 интерфероном гамма и онкостатином M требует экспрессии фактора транскрипции Stat1 J Biol Chem 1998 273 : 18701–18704
CAS PubMed Статья Google Scholar

40
МакКубри Д.А., Стилман Л.С., Хойл П.А., Блэлок В.Л., Вайнштейн-Оппенгеймер С.Р., Франклин Р.А., Червински Х., Бош Э., МакМахон М. Различная способность активированных онкопротеинов Raf устранять зависимость от цитокинов, предотвращать апоптоз и индуцировать синтез аутокринного фактора роста в гемопоэтических клетках человека Лейкемия 1998 12 : 1903–1929
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

41
Mayo MW, Wang X-Y, Algate PA, Arana GF, Hoyle PE, Steelman LS, McCubrey JA.Синергизм между разрушением мотива AUUUA и вставкой энхансера приводит к аутокринной трансформации интерлейкин-3-зависимых гемопоэтических клеток Кровь 1995 86 : 3139–3150
CAS PubMed Google Scholar

42
Ван X-Y, McCubrey JA. Злокачественная трансформация, индуцированная генами цитокинов: сравнение способности генов зародышевой линии и мутировавших генов интерлейкина 3 трансформировать гемопоэтические клетки с помощью транскрипционных и посттранскрипционных механизмов Cell Growth Differ 1996 7 : 487–500
CAS PubMed Google Scholar

43
Ван XY, McCubrey JA.Дифференциальные эффекты длинных концевых повторов ретровирусов на экспрессию гена интерлейкина-3 и аутокринную трансформацию Лейкемия 1997 11 : 1711–1725
CAS PubMed Статья Google Scholar

44
Блэлок В.Л., Вайнштейн-Оппенгеймер К., Чанг Ф., Хойл П.Е., Ван XY, Элгейт, Пенсильвания, Франклин Р.А., Оберхаус С.М., Стилман Л.С., МакКубри Дж. Сигнальная трансдукция, регуляторы клеточного цикла и антиапоптотические пути, регулируемые IL-3 в гемопоэтических клетках, возможные участки для вмешательства с помощью противоопухолевых препаратов Лейкемия 1999 13 : 1109–1166
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

45
Причард, Калифорния, Болин Л., Слэттери Р., Мюррей Р. Л., МакМахон М.Послеродовая летальность, неврологические и желудочно-кишечные дефекты у мышей с целевым нарушением протеинкиназы A-Raf Curr Biol 1996 6 : 614–617
CAS PubMed Статья Google Scholar

46
Сэмюэлс М.Л., Вебер М.Дж., Бишоп Дж.М., МакМахон М. Условная трансформация клеток и быстрая активация каскада митоген-активируемых протеинкиназ эстрадиол-зависимой протеинкиназой Raf-1 человека Mol Cell Biol 1993 13 : 6241–6252
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

47
Pritchard CA, Samuels ML, Bosch E, McMahon M.Условно онкогенные формы протеинкиназ A-Raf и B-Raf проявляют разные биологические и биохимические свойства в клетках NIH-3T3 Mol Cell Biol 1995 15 : 9430–9442
Статья Google Scholar

48
Lloyd AC, Obermuller F, Staddon S, Barth CF, McMahon M, Land H. Взаимодействующие онкогены сходятся, чтобы регулировать комплексы циклин / Cdk Genes Dev 1997 11 : 663–677
CAS PubMed Статья Google Scholar

49
Вудс Д., Пэрри Д., Червински Х., Бош Э, Лис Э, МакМахон М.Raf-индуцированная пролиферация или остановка клеточного цикла определяется уровнем активности Raf с остановкой, опосредованной p21 ^Cip Mol Cell Biol 1997 17 : 5598–5611
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

50
Ян М., Дай Т., Дик Дж. К., Кириакис Дж. М., Зон Л. И., Вудгетт Дж. Р., Темплтон Д. Активация стресс-активированной протеинкиназы путем фосфорилирования MEKK1 ее активатора SEK1 Nature 1994 372 : 798–800
CAS PubMed Статья Google Scholar

51
Lin A, Minden A, Martinetto H, Claret FX, Lange-Carter C, Mercurio F, Johnson GL, Karin M.Идентификация киназы с двойной специфичностью, которая активирует киназы Jun и p38-Mpk2 Science 1995 268 : 286–290
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

52
Карин М., Минден А., Лин А., МакМахон М., Ланге-Картер С., Дериджард Б., Дэвис Р.Дж., Джонсон Г.Л. Дифференциальная активация митоген-активируемых протеинкиназ ERK и JNK с помощью Raf-1 и MEKK Science 1994 266 : 1719–1723
PubMed Статья Google Scholar

53
Сюй С., Роббинс Д., Фрост Дж., Данг А., Ланге-Картер С., Кобб М.Х.MEKK1 фосфорилирует MEK1 и MEK2, но не вызывает активацию митоген-активированной протеинкиназы Proc Natl Acad Sci USA 1995 92 : 6808–6812
CAS PubMed Статья Google Scholar

54
Johnson NL, Gardner AM, Diener KM, Lange-Carter CA, Gleavy J, Jarpe MB, Minden A, Karin M, Zon LI, Johnson GL. Пути передачи сигналов, регулируемые митоген-активируемой / внеклеточной киназой киназы, вызывают гибель клеток J Biol Chem 1996 271 : 3229–3237
CAS PubMed Статья Google Scholar

55
Занке Б.В., Руби Е.А., Виннетт Э., Чан Дж., Рэндалл С., Парсонс М., Будро К., Макиннис М., Ян М., Темплтон Д.Д., Вудгетт-младший.Пути митоген-активируемых протеинкиназ у млекопитающих регулируются путем образования специфических комплексов киназа-активатор J Biol Chem 1996 271 : 29876–29881
CAS PubMed Статья Google Scholar

56
Хан Дж., Ли Дж. Д., Биббс Л., Улевич Р. Дж. Киназа MAP, нацеленная на эндотоксин и гиперосмолярность в клетках млекопитающих Science 1994 265 : 808–811
CAS Статья Google Scholar

57
Meier R, Rous J, Cuenda A, Nebreda AR, Cohen P.Клеточные стрессы и цитокины активируют несколько гомологов митоген-активируемой протеинкиназы в клетках PC12 и KB Euro J Biochem 1996 236 : 796–805
CAS Статья Google Scholar

58
Хиби М, Лин А, Смил Т, Минден А, Карин М. Идентификация онкобелковой и УФ-чувствительной протеинкиназы, которая связывает и потенцирует домен активации c-Jun Genes Dev 1993 7 : 2135–2148
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

59
Lange-Carter CA, Johnson GL.Ras-зависимая регуляция MEK-киназы в клетках PC12 фактором роста Science 1994 265 : 1458–1461
CAS PubMed Статья Google Scholar

60
Ван XZ, Рон Д. Стресс-индуцированное фосфорилирование и активация CHOP (GADD153) киназой p38 MAP Science 1996 272 : 1347–1349
CAS Статья Google Scholar

61
Уильямс Дж. Г., Робертс TM.Пути передачи сигнала с участием протоонкогена Raf Cancer Metast Rev 1994 13 : 105–116
CAS Статья Google Scholar

62
Макилрой Дж., Чен Д., Вьясов К., Микаэли Т., Бэкер Дж. М.. Специфическая активация фосфатидилинозитол-3′-киназы p85 – p110 стимулирует синтез ДНК с помощью Ras- и p70 S6-киназ-зависимых путей Mol Cell Biol 1997 17 : 248–255
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

63
Rodriguez-Viciana P, Marte BM, Warne PH, Downward J.Фосфатидилинозитол-3’киназа: один из эффекторов Ras Phil Trans Roy Soc London Series B: Biol Sci 1996 351 : 225–231
CAS Статья Google Scholar

64
Edelmann HM, Kuhne C, Petritsch C, Ballou LM. Регуляция клеточного цикла киназы p70 S6 и митоген-активируемых протеинкиназ p42 / p44 в фибробластах 3T3 мыши Swiss J Biol Chem 1996 271 : 963–971
CAS PubMed Статья Google Scholar

65
Бленис Дж., Граммер Т.Доказательства MEK-независимых путей, регулирующих пролонгированную активацию киназ ERK-MAP Онкоген 1997 14 : 1635–1642
PubMed Статья CAS Google Scholar

66
Lenormand P, McMahon M, Pouyssegur J. Онкогенный Raf-1 активирует киназу p70 S6 через митоген-активируемый протеинкиназно-независимый путь J Biol Chem 1996 271 : 15762–15768
CAS PubMed Статья Google Scholar

67
Гельфанд Е.В., Исидзука Т., Ошиба А, Саката Н., Терада Н., Джонсон Г.Л.Агрегация FcεRI на тучных клетках стимулирует активность аминоконцевой киназы c-Jun J Biol Chem 1996 271 : 12762–12766
PubMed Статья Google Scholar

68
Calvo V, Wood M, Gjertson C, Vik T, Bierer BE. Активация 70 кДа киназы S6, индуцированная цитокинами интерлейкин-3 и эритропоэтин и ингибируемая рапамицином, не является абсолютным требованием для пролиферации клеток Eur J Immunol 1994 24 : 2664–2671
CAS PubMed Статья Google Scholar

69
Прайс DJ, Grove JR, Calvo V, Avruch J, Bierer BE.Индуцированное рапамицином ингибирование 70-килодальтонной протеинкиназы S6 Science 1992 257 : 973–977
CAS PubMed Статья Google Scholar

70
Sugiyama H, Papst P, Gelfand EW, Terada N. Чувствительность киназы p70 S6 к рапамицину устраняется аминокислотной заменой Thr229 J Immunol 1996 157 : 656–660
CAS PubMed Google Scholar

71
Терада Н., Франклин Р.А., Лукас Дж. Дж., Бленис Дж., Гельфанд Е. В..Неспособность рапамицина блокировать пролиферацию после того, как покоящиеся клетки вошли в клеточный цикл, несмотря на инактивацию киназы p70 S6 J Biol Chem 1993 268 : 12062–12068
CAS PubMed Google Scholar

72
Thomas G, Hall MN. Передача сигналов Tor и контроль роста клеток Curr Opin Cell Biol 1997 9 : 782–787
CAS PubMed Статья Google Scholar

73
Sigal NH, Dumont FJ.Циклоспорин A, FK-506 и рапамицин: фармакологические пробы передачи сигнала лимфоцитов Annu Rev Immunol 1992 10 : 519–560
CAS PubMed Статья Google Scholar

74
Зон И.М., Кэмпбелл С.Л., Хосрави-Фар Р., Россман К.Л., Дер С.Дж. Белки семейства Rho и трансформация Ras: менее проходимый RHOad становится перегруженным Онкоген 1998 17 : 1415–1438
CAS PubMed Статья Google Scholar

75
Gorvel JP, Chang TC, Boretto J, Azuma T, Chavrier P..Дифференциальные свойства D4 / LyGDI по сравнению с RhoGDI: фосфорилирование и селективность rho GTPase FEBS Lett 1998 422 : 269–273
CAS PubMed Статья Google Scholar

76
Робертс А., Ким С., Чжэнь Л., Лоу Дж., Капур Р., Петриняк Б., Спаетти А., Поллок Дж., Борнео Дж., Брэдфорд, Великобритания, Аткинсон С.Дж., Динауэр М.К., Уильямс Д.А. Дефицит специфической для гемопоэтических клеток ГТФазы семейства Rho, Rac2, характеризуется множественными нарушениями функции нейтрофилов и нарушением защиты хозяина Иммунитет 1999 10 : 183–196
CAS PubMed Статья Google Scholar

77
Редди Б.С., Сими Б., Патель Н., Алиага К., Рао К.В.Влияние количества и типов пищевых жиров на кишечную бактериальную 7-альфа-дегидроксилазу и фосфатидилинозитол-специфическую фосфолипазу С и активность диацилглицерин-киназы слизистой оболочки толстой кишки и активность PKC на стадиях развития опухоли толстой кишки Cancer Res 1996 56 : 2314–2320
PubMed Google Scholar

78
Мюррей Н.Р., Дэвидсон Л.А., Чапкин Р.С., Густафсон В.С., Шаттенберг Д.Г., Филдс А.П. Сверхэкспрессия протеинкиназы C bII вызывает гиперпролиферацию толстой кишки и повышенную чувствительность к канцерогенезу толстой кишки J Cell Biol 1999 145 : 699–711
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

79
Дэвидсон Л.А., Луптон-младший, Цзян Й.Х., Чанг В.С., Аукема Х.М., Чапкин Р.С.Пищевой жир и клетчатка изменяют экспрессию изофермента протеинкиназы С в толстой кишке крысы J Nutrit 1995 125 : 49–56
CAS PubMed Google Scholar

80
Lafave LM, Kumarathasan P, Bird RP. Влияние пищевых жиров на протеинкиназу С толстой кишки и индукцию аберрантных очагов крипт Липиды 1994 29 : 693–700
CAS PubMed Статья Google Scholar

81
Муфсон РА.Роль фосфорилирования серина / треонина в передаче сигнала гематопоэтического цитокинового рецептора FASEB J 1997 11 : 37–44
CAS PubMed Статья Google Scholar

82
Рао П., Китамура Т., Миядзима А., Муфсон, РА. Передача сигналов рецептора человеческого IL-3: быстрая индукция гидролиза фосфатидилхолина не зависит от протеинкиназы C, но зависит от фосфорилирования тирозина в трансфицированных клетках NIH 3T3 J Immunol 1995 154 : 1664–1674
CAS PubMed Google Scholar

83
Ринаудо М.С., Су К., Фальк Л.А., Гальдер С., Муфсон Р.А.Рецептор интерлейкина-3 человека модулирует уровни мРНК и белка bcl-2 с помощью протеинкиназы C в клетках TF-1 Кровь 1995 86 : 80–88
CAS PubMed Google Scholar

84
Муфсон Р.А., Губина Е., Ринаудо М., Бакстер Г. Ингибитор фосфатидилхолинфосфолипазы C, D609, блокирует индуцированную интерлейкином-3 (IL-3) экспрессию bcl-2, но не экспрессию c-myc в человеческих IL-3-зависимых клетках Exp Cell Res 1998 240 : 228–235
CAS PubMed Статья Google Scholar

85
Губина Е., Ринаудо М.С., Салласи З., Блумберг П.М., Муфсон Р.А.Сверхэкспрессия изоформы протеинкиназы C эпсилон, но не дельта, в интерлейкин-3-зависимых клетках человека подавляет апоптоз и индуцирует экспрессию bcl-2 Кровь 1998 91 : 823–829
CAS PubMed Google Scholar

86
Сакамото К.М., Миньякка, ЖК, Гассон, Дж. Передача сигнала колониестимулирующим фактором гранулоцитов-макрофагов и рецепторами интерлейкина-3 Рецептные каналы 1994 2 : 175–181
CAS PubMed Google Scholar

87
Квон Э.М., Сакамото КМ.Молекулярный механизм действия гранулоцитарно-макрофагального / колониестимулирующего фактора J Invest Med 1996 44 : 442–446
CAS Google Scholar

88
Lee HJ, Mignacca RC, Sakamoto KM. Активация транскрипции egr-1 колониестимулирующим фактором гранулоцитов-макрофагов, но не интерлейкином 3, требует фосфорилирования белка, связывающего элемент ответа цАМФ (CREB) на серине 133 J Biol Chem 1995 270 : 15979–15983
CAS PubMed Статья Google Scholar

89
Wong A, Sakamoto KM.Гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор индуцирует активацию транскрипции egr-1 посредством независимого от протеинкиназы А сигнального пути J Biol Chem 1995 270 : 30271–30273
CAS Статья Google Scholar

90
Watanabe S, Kubota H, Sakamoto KM, Arai K. Характеристика цис -действующих последовательностей и транс -действующих сигналов, регулирующих ранний ростовой ответ 1 и промоторов c-fos через рецептор гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора в клетках BA / F3 Кровь 1997 89 : 1197– 1206
CAS PubMed Google Scholar

91
Mignacca RC, Lee HJ, Kwon EM, Sakamoto KM.Механизм транскрипционной активации раннего гена Egr-1 в ответ на PIXY321 Кровь 1996 88 : 848–854
CAS PubMed Google Scholar

92
Сакамото К.М., Фрейзер Дж. К., Ли Х. Дж., Леман Э, Гассон Дж. Гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор и пути передачи сигналов интерлейкина-3 сходятся на сайте связывания CREB в промоторе egr-1 человека Mol Cell Biol 1994 14 : 5975–5985
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

93
Франк Д.А., Махаджан С., Ритц Дж.Иммуносупрессия, индуцированная флударабином, связана с ингибированием передачи сигналов STAT1 Nature Med 1999 5 : 444–447
CAS PubMed Статья Google Scholar

94
Голлоб Дж. А., Шниппер С. П., Мерфи Е. А., Ритц Дж., Фрэнк Д. А.. Функциональный синергизм между IL-12 и IL-2 включает в себя митоген-активированную протеинкиназу p38 и связан с увеличением фосфорилирования серина STAT J Immunol 1999 162 : 4472–4481
CAS PubMed Google Scholar

95
Франк Д.А., Робертсон М.Дж., Бонни А., Ритц Дж., Гринберг М.Э.Передача сигналов интерлейкина 2 включает фосфорилирование белков Stat Proc Natl Acad Sci USA 1995 92 : 7779–7783
CAS PubMed Статья Google Scholar

96
Франк Д.А., Вартиковски Л. BCR / ABL приводит к конститутивной активации белков Stat, имеет общий эпитоп с фосфорилированным тирозином Stats Лейкемия 1996 10 : 1724–1730
CAS PubMed Google Scholar

97
Карлессо Н., Фрэнк Д.А., Гриффин Д.Д.Тирозилфосфорилирование и ДНК-связывающая активность сигнальных трансдукторов и активаторов транскрипционного белка (STAT) в линиях гемопоэтических клеток, трансформированных Bcr / AB1 J Exp Med 1996 183 : 811-820
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

98
Каррас Дж. Г., Ван З., Хо Л., Ховард Р. Г., Фрэнк Д. А., Ротштейн TL. Сигнальный преобразователь и активатор транскрипции-3 (STAT3) постоянно активируется в нормальных самообновляющихся клетках B-1, но индуцируется только в обычных B-лимфоцитах J Exp Med 1997 185 : 1035–1042
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

99
Франк Д.А., Махаджан С., Ритц Дж.В-лимфоциты пациентов с хроническим лимфоцитарным лейкозом содержат сигнальный преобразователь и активатор транскрипции (STAT) 1 и STAT3, конститутивно фосфорилированные по остаткам серина J Clin Invest 1997 100 : 3140–3148
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

100
Потт С., Хиддеманн В. Аналоги пурина в лечении хронического лимфоцитарного лейкоза Лейкемия 1997 11 : S25 – S28
PubMed Google Scholar

101
Дурбин Дж. Э., Хакенмиллер Р., Саймон М. С., Леви, Делавэр.Целенаправленное нарушение гена Stat1 мыши приводит к нарушению врожденного иммунитета к вирусным заболеваниям Cell 1996 84 : 443–450
CAS Статья Google Scholar

102
Симпсон С.Дж., Шах С., Комиски М., де Йонг Ю.П., Ван Б., Мизогучи Е., Бхан А.К., Терхорст К. Т-клеточная патология в двух моделях экспериментального колита зависит преимущественно от интерлейкина 12 / сигнального преобразователя и активатора транскрипционного (Stat) -4 пути, но не зависит от экспрессии интерферона гамма Т-клетками J Exp Med 1998 187 : 1225–1234
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

103
Такеда К., Ногучи К., Ши В., Танака Т., Мацумото М., Йошида Н., Кихимото Т., Акира С.Целенаправленное нарушение гена Stat3 мыши приводит к эмбриональной летальности Proc Natl Acad Sci USA 1997 94 : 3801–3804
CAS PubMed Статья Google Scholar

104
Такеда К., Каманака М., Танака Т., Кишимото Т., Акира С. Нарушение IL-13-опосредованных функций макрофагов у мышей с дефицитом STAT6 J Immunol 1996 157 : 3220–3222
CAS PubMed Google Scholar

105
Каплан MH, Schindler U, Smiley ST, Grusby MJ.Stat6 необходим для опосредования ответов на IL-4 и развития клеток Th3 Иммунитет 1996 4 : 313–319
CAS PubMed Статья Google Scholar

106
Фельдман GM, Розенталь Л.А., Лю X, Хейс М.П., Виншоу-Борис А., Леонард В.Дж., Хеннигхаузен Л., Финблум Д.С. STAT5-дефицитные мыши демонстрируют, что гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор индуцирует пролиферацию и экспрессию генов Кровь 1997 90 : 1768–1776
CAS PubMed Google Scholar

107
Теглунд С., Маккей С., Шуэц Э., ван Дерсен Дж. М., Стравоподис Д., Ван Д., Браун М., Боднер С., Гросвельд Дж., Иле Дж.Белки Stat 5a и Stat5b играют важную и несущественную или избыточную роль в цитокиновых ответах Cell 1998 93 : 841–850
CAS PubMed Статья Google Scholar

108
Родиг С.Дж., Мераз М.А., Уайт Дж.М., Лампе П.А., Райли Дж.К., Артур С.Д., Кинг К.Л., Шихан ККФ, Инь Л., Пенника Д., Джонсон Е.М., Шрайбер Р.Д. Нарушение гена Jak1 демонстрирует обязательную и неизбыточную роль Jaks в биологических ответах, индуцированных цитокинами. Cell 1998 93 : 373–383
CAS PubMed Статья Google Scholar

109
Парганас Э., Ван Д., Стравоподис Д., Топхэм Д. Д., Марин Дж. С., Теглунд С., Ванин Э. Ф., Боднер С., Коламоничи О. Р., ван Деурсон Д. М., Гросвельд Г., Иле Дж. Н..Jak2 необходим для передачи сигналов через различные рецепторы цитокинов Cell 1998 93 : 385–395
CAS PubMed Статья Google Scholar

110
Томис, округ Колумбия, Ли В., Берг Л.Дж. Т-клетки от Jak3-дефицитных мышей имеют интактный TCR, но повышенный апоптоз J Immunol 1997 159 : 4708–4719
CAS PubMed Google Scholar

111
Sohn SJ, Forbush KA, Nguyen N, Witthuhn B, Nosaka T., Ihle JN, Perlmutter RM.Потребность в Jak3 в зрелых Т-клетках: его роль в регуляции гомеостаза Т-клеток J Immunol 1998 160 : 2130–2138
CAS PubMed Google Scholar

112
Перикл Ф, Киркен Р.А., Бронте В., Сконоккиа Г., ДаСильва Л., Сегал Д.М. У мышей с опухолью с ослабленным иммунитетом наблюдается избирательная потеря экспрессии STAT5a / b в T- и B-лимфоцитах J Immunol 1997 159 : 2580–2585
CAS PubMed Google Scholar

113
Перикл Ф, Пинто Л.А., Хикс С., Киркен Р.А., Сконоккиа Дж., Руснак Дж., Долан М.Дж., Ширер Дж., Сегал Д.М.Инфекция ВИЧ-1 вызывает избирательное снижение экспрессии белка STAT5 J Immunol 1998 160 : 28–31
CAS PubMed Google Scholar

114
Ямасита Х., Сюй Дж., Эрвин Р.А., Фаррар В.Л., Киркен Р.А., Руи Х. Дифференциальный контроль состояния фосфорилирования пролин-соседних сериновых остатков Ser725 и Ser730 Stata в пролактин-чувствительных клетках J Biol Chem 1998 273 : 30218–30224
CAS PubMed Статья Google Scholar

115
Киркен Р.А., Малабарба М.Г., Сюй Дж., Лю X, Фаррар В.Л., Хеннигхаузен Л., Ларнер А.С., Гримли П.М., Руи Х.Пролактин стимулирует фосфорилирование серина / тирозина и образование гетерокомплексов множественных изоформ Stat5 в лимфоцитах Nb2 J Biol Chem 1997 272 : 14098–14103
CAS PubMed Статья Google Scholar

116
Киркен Р.А., Малабарба М.Г., Сюй Дж., ДаСильва Р.А., Лю Х., Хеннигаузен Л., Руи Х., Фаррар В.Л. Две дискретные области бета рецептора интерлейкина-2 (ИЛ2) независимо опосредуют активацию ИЛ2 нечувствительной к PD98059 / рапамицину / вортманнину серинкиназы Stat5a / b J Biol Chem 1997 272 : 15459–15465
CAS PubMed Статья Google Scholar

117
Лу КП, Ханес С.Д., Хантер Т.Пептидил-пролилизомераза человека, необходимая для регуляции митоза Nature 1996 380 : 544–547
CAS PubMed Статья Google Scholar

118
Шен М., Стукенберг П.Т., Киршнер М.В., Лу КП. Важная митотическая пептидил-пролилизомераза Pin1 связывает и регулирует митоз-специфические фосфопротеины Genes Dev 1998 12 : 706-720
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

119
Лу Пи, Чжоу XZ, Шен М, Лу КП.Функция WW-доменов как фосфосерин- или фосфотреонин-связывающих модулей Science 1999 283 : 1325–1328
CAS PubMed Статья Google Scholar

120
Ранганатан Р., Лу К.П., Хантер Т., Ноэль Дж. П. Структурный и функциональный анализ митотической ротамазы Pin1 предполагает, что распознавание субстрата зависит от фосфорилирования Cell 1997 89 : 875–886
CAS PubMed Статья Google Scholar

121
Яффе М.Б., Шутковски М., Шен М., Чжоу XZ, Стукенберг П.Т., Рафельд Ю.Ю., Сюй Дж., Куанг Дж., Киршнер М.В., Фишер Дж., Кантли Л.К., Лу К.П.Последовательно-специфическая и зависимая от фосфорилирования изомеризация пролина: потенциальный митотический регуляторный механизм Science 1997 278 : 1957–1960
CAS PubMed Статья Google Scholar

122
Шен М., Фогт В., Хаггблом С., Хантер Т., Лу К.П. Характеристика и регуляция клеточного цикла родственных теломерных белков человека Pin2 и TRF1 предполагает роль в митозе Proc Natl Acad Sci USA 1997 94 : 13618–13622
CAS PubMed Статья Google Scholar

123
Благосклонный М.В., Яннакаку П., Эль-Дейри В.С., Кингстон Д.Г., Хиггс П.И., Некерс Л., Фоджо Т.Фосфорилирование Raf-1 / bcl-2: этап от повреждения микротрубочек до гибели клеток Cancer Res 1997 57 : 130–135
CAS PubMed Google Scholar

124
Ван Х.Г., Рапп У.Р., Рид Дж. Bcl-2 направляет протеинкиназу Raf-1 в митохондрии Cell 1996 87 : 629–638
CAS PubMed Статья Google Scholar

125
Thompson CB, Gajewski TF.Апоптоз встречает передачу сигнала: устранение плохого влияния Cell 1996 87 : 589–592
PubMed Статья Google Scholar

126
Рид Дж. К., Мияшита Т., Такаяма С., Ван Х. Г., Сато Т., Краевски С., Эйме-Семпе С., Бродруг С., Китада С., Ханада М. Белки семейства BCL-2: регуляторы клеточной смерти, участвующие в патогенезе рака и устойчивости к терапии J Cell Biochem 1996 60 : 23–32
CAS PubMed Статья Google Scholar

127
Ито Т., Дэн Х, Карр Б., Май WS.Фосфорилирование Bcl-2, необходимое для антиапоптозной функции J Biol Chem 1997 272 : 11671–11673
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

128
Руволо П.П., Дэн Х, Карр Б.К., Май WS. Функциональная роль митохондриальной протеинкиназы С-альфа в фосфорилировании Bcl2 и подавлении апоптоза J Biol Chem 1998 273 : 25436–25442
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

129
Дэн Х, Ито Т., Карр Б., Мамби М., Мэй ВС.Обратимое фосфорилирование Bcl-2 вслед за IL-3 или бриостатином опосредуется взаимодействием PP2A J Biol Chem 1998 271 : 34157–34163
Статья Google Scholar

130
Мэй В.С., Тайлер П.Г., Ито Т., Армстронг, Д.К., Катша К.А., Дэвидсон, NE. Интерлейкин-3 и бриостатин-1 опосредуют гиперфосфорилирование BCL2 альфа в связи с подавлением апоптоза J Biol Chem 1994 269 : 26865–26870
CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

131
Роди Ди-джей, Джейн Р. В., Сангани Х. Дж., Холтон Р. А., Уоллес Б. А., Маковски Л.Скрининг библиотеки пептидов, представленных на фаге, позволяет идентифицировать человеческий bcl-2 как таксол-связывающий белок J Mol Biol 1999 285 : 197–203
CAS PubMed Статья Google Scholar

132
Благосклонный М.В., Шульте Т., Нгуен П., Трепель Дж., Некерс Л.М. Таксол-индуцированный апопсис и фосфорилирование белка Bcl-2 включает c-Raf-1 и представляет собой новый путь передачи сигнала c-Raf-1 Cancer Res 1996 56 : 1851–1854
CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

133
Благосклонный М.В., Чуман Ю., Берган ЖК, Фоджо Т.Путь митоген-активируемой протеинкиназы незаменим для индуцированного микротрубочками активного лекарственного фосфорилирования и апоптоза Raf-1 / Bcl-2 в лейкозных клетках Лейкемия 1999 13 : 1028–1036
CAS PubMed Статья Google Scholar

134
Hu ZB, Minden MD, McCulloch EA. Фосфорилирование Bcl-2 после воздействия ретиноевой кислоты на лейкозные клетки человека Кровь 1998 92 : 1768–1775
CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

135
Haldar S, Jena N, Croce C.Инактивация Bcl-2 путем фосфорилирования Proc Natl Acad Sci USA 1995 92 : 4507–4511
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

136
Haldar S, Chintapilli J, Croce CM. Таксол вызывает фосфорилирование bcl-2 и гибель клеток рака простаты Cancer Res 1996 56 : 1253–1255
CAS Google Scholar

137
Haldar S, Basu A, Croce CM.Bcl2 является защитником целостности микротрубочек Cancer Res 1997 57 : 229–233
CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

138
Haldar S, Basu A, Croce CM. Серин-70 является одним из критических сайтов для лекарственно-индуцированного фосфорилирования Bcl2 в раковых клетках Cancer Res 1998 58 : 1609–1615
CAS PubMed Google Scholar

139
Басу А., Халдар С.Дамагиновые препараты, содержащие микротрубочки, вызвали необходимость фосфорилирования bcl2 для фосфорилирования остатков серина-70 и серина-87 белка bcl2 Int J Oncol 1998 13 : 659–664
CAS PubMed Google Scholar

140
Шривастава Р.К., Шривастава А.Р., Корсмейер С.Ю., Нестерова М., Чо-Чунг Ю.С., Лонго Д.Л. Участие микротрубочек в регуляции фосфорилирования и апоптоза Bcl2 посредством циклической AMP-зависимой протеинкиназы Mol Cell Biol 1998 18 : 3509–3517
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

141
Srivastava RK, Mi QS, Hardwick JM, Longo DL.Делеция области петли Bcl-2 полностью блокирует апоптоз, индуцированный паклитакселом Proc Natl Acad Sci USA 1999 96 : 3775–3780
CAS PubMed Статья Google Scholar

Серин-треонинкиназы протеина — Базовая нейрохимия

Протеинкиназы различаются по своему клеточному и субклеточному распределению, субстратной специфичности и регуляции

Эти свойства определяют функциональную роль, которую играют более 70 типов протеинкиназ, обнаруженных в ткани млекопитающих, большинство из которых, как известно, экспрессируются в нейронах [2,3].В этой главе рассматриваются основные классы протеин-серин-треониновых киназ в головном мозге, перечисленные в таблице 24-1. Основные классы протеинтирозинкиназ в головном мозге обсуждаются в главе 25. Среди наиболее изученных протеинкиназ в головном мозге есть протеинкиназы, активируемые вторичными посредниками cAMP, cGMP, Ca ²⁺ и DAG [1,2].

цАМФ-зависимая протеинкиназа (протеинкиназа A; PKA) состоит из каталитических и регуляторных субъединиц. Холофермент киназы, состоящий из тетрамера двух каталитических (C) и двух регуляторных (R) субъединиц, неактивен.цАМФ активирует холофермент путем связывания с регуляторными субъединицами, тем самым вызывая диссоциацию холофермента на свободные регуляторные и свободные активные каталитические субъединицы [1]. Три изоформы субъединицы C, каждая примерно 40 кДа, и четыре изоформы субъединицы R, каждая от 50 до 55 кДа, были клонированы из тканей млекопитающих. Три субъединицы C, обозначенные как Cα, Cβ и Cγ, проявляют очень похожую и широкую субстратную специфичность, то есть они фосфорилируют большое количество физиологических субстратных белков и, как правило, могут считаться изоформами друг друга.Четыре субъединицы R состоят из двух форм белков типа I и типа II. RIIα и RIIβ, но не RIα и RIβ, подвергаются аутофосфорилированию, как описано ниже. Большинство этих R- и C-субъединиц протеинкиназы широко распространены в клетках головного мозга.

Активность PKA присутствует во всей клетке, связанной с плазматической мембраной, цитоплазматической и ядерной фракциями. Киназа сильно расщеплена внутри клетки, в значительной степени посредством серии якорных белков, называемых якорными белками А-киназы (AKAP) [4].Известно несколько форм AKAP, многие из которых составляют примерно от 75 до 79 кДа. AKAP специфически связываются с субъединицами RIIα и RIIβ протеинкиназы и тем самым привязывают эти регуляторные субъединицы и связанные с ними каталитические субъединицы к определенным субклеточным сайтам, например, постсинаптическим плотностям. Постсинаптическая плотность — это специализация дистальных дендритов, которые соприкасаются с пресинаптическими нервными окончаниями и, как полагают, содержат некоторые рецепторы нейротрансмиттеров и другие белки, необходимые для синаптической передачи.Таким образом, AKAPs удерживают протеинкиназу в непосредственной близости от каскада белков сигнальной трансдукции, которые она фосфорилирует, чтобы регулировать синаптическую передачу. На важную роль, которую играют AKAP в физиологических условиях, указывают эксперименты, в которых было показано, что синтетические полипептиды, нарушающие взаимодействия AKAP-RII, нарушают специфические физиологические эффекты PKA [4].

cGMP-зависимая протеинкиназа (PKG) представляет собой димер двух идентичных субъединиц. Каждая субъединица с M _r из ~ 75000 содержит регуляторный домен, который связывает cGMP, и каталитический домен [1,4a].Как и цАМФ-зависимый фермент, цГМФ активирует неактивный холофермент путем связывания с регуляторным доменом молекулы; однако, в отличие от цАМФ-зависимого фермента, активация цГМФ-зависимого холофермента не сопровождается диссоциацией субъединиц. PKG показывает гораздо более ограниченное клеточное распределение и субстратную специфичность, чем PKA. Это отражает меньшее количество вторичных мессенджеров цГМФ в регуляции функции клеток.

Кальций / кальмодулин-зависимые протеинкиназы (CaM-киназы; CaMKs) являются одним из двух основных классов кальций-зависимых киназ в нервной системе.Мозг содержит по крайней мере шесть основных типов CaMK, каждый из которых имеет очень разные свойства. CaMK II, как и цАМФ-зависимый фермент, демонстрирует широкое клеточное распределение и субстратную специфичность и может считаться «многофункциональной протеинкиназой» в том смысле, что он, вероятно, опосредует многие действия вторичного мессенджера Ca ²⁺ во многих типах нейроны [1,5]. По аналогии с PKG, CaMK II содержит регуляторный домен, который в состоянии покоя связывается с каталитическим доменом и ингибирует его; это ингибирование снимается, когда Ca ²⁺ / кальмодулин связывается с регуляторным доменом.Было клонировано несколько изоформ этого фермента, включая несколько субъединиц α и β ~ 50 и 60 кДа соответственно. Фермент существует в физиологических условиях в виде больших мультимерных комплексов идентичных или различных изоформ.

CaMKs I и IV, по-видимому, также играют важную роль в обеспечении многих действий вторичного мессенджера Ca ²⁺ в нервной системе, хотя их точная субстратная специфичность остается известной лишь частично [6]. Одна интересная особенность CaMK I и IV заключается в том, что оба, по-видимому, активируются не только связыванием Ca ²⁺ / кальмодулин, но также при их фосфорилировании другими протеинкиназами, которые были названы киназой CaMK I и киназой CaMK IV соответственно. [6].Эти киназы CaMK также могут быть Ca ²⁺ / кальмодулин-зависимыми ферментами. Клонирован фермент киназа CaMK IV. Интересно, что эта киназа сама фосфорилируется и ингибируется PKA, тем самым обеспечивая заметный механизм взаимодействия каскадов цАМФ и Ca ²⁺, как будет более подробно описано ниже.

Остальные три типа CaMK представляют собой киназу фосфорилазы, киназу легкой цепи миозина и CaMK III [1,7]. Эти ферменты, по-видимому, фосфорилируют меньшее количество субстратных белков, а в некоторых случаях только одного типа в физиологических условиях, и поэтому каждый из них может опосредовать относительно меньшее действие Ca ²⁺ в нервной системе.

Протеинкиназа C (PKC) включает другой основной класс Ca ²⁺-зависимых протеинкиназ и активируется Ca ²⁺ в сочетании с DAG и фосфатидилсерином [8]. Были клонированы множественные формы PKC, и известно, что мозг содержит по крайней мере семь видов фермента. Вариантные формы PKC демонстрируют различное клеточное распределение в головном мозге и разные регуляторные свойства. Например, они различаются по относительной способности Ca ²⁺ и DAG активировать их: для некоторых требуются как Ca ²⁺, так и DAG, тогда как другие могут активироваться только DAG, по-видимому, без увеличения клеточного Ca ^{2. +} концентраций.Однако эти ферменты проявляют сходную субстратную специфичность и, как следствие, часто считаются изоформами.

PKC существует в физиологических условиях в виде одиночных полипептидных цепей примерно 80 кДа. Каждый полипептид содержит регуляторный домен, который в состоянии покоя связывается с каталитическим доменом и ингибирует его. Это ингибирование снимается, когда Ca ²⁺ и / или DAG связывается с регуляторным доменом. PKC проявляет широкую субстратную специфичность и опосредует многочисленные функции вторичного мессенджера Ca ²⁺ в нейронах-мишенях.

В базовых условиях PKC является преимущественно цитоплазматическим белком. После активации Ca ²⁺ или DAG фермент связывается с плазматической мембраной, местом расположения многих из его известных физиологических субстратов, включая рецепторы и ионные каналы. Фактически, перемещение PKC из цитоплазмы к мембране долгое время использовалось как экспериментальная мера активации фермента. Такую транслокацию часто анализировали по связыванию сложного эфира форбола; сложные эфиры форбола являются агентами, способствующими развитию опухолей, которые избирательно связываются и активируют PKC.Недавно были решены молекулярные основы транслокации PKC из цитоплазмы на плазматическую мембрану. Активированная PKC, но не неактивная форма фермента, связывается с высоким сродством с рядом мембранно-ассоциированных белков, называемых рецепторами для активированной C-киназы (RACK) [9]. Таким образом, RACK функционируют по аналогии с AKAP для PKA, направляя или рекрутируя эти широко экспрессируемые ферменты в субклеточные сайты, где требуется их активность.

Различные действия внеклеточных сигналов опосредуются зависимыми от вторичных мессенджеров протеинкиназами.Было показано, что внутриклеточное применение путем микроинъекции или трансфекции PKA, PKG, CaMK II или PKC в определенные типы нейронов имитирует определенные физиологические реакции (регуляция ионных каналов, высвобождение нейротрансмиттеров и транскрипция генов) на конкретных первых мессенджеров (нейротрансмиттеров или нервных импульсов). ) для этих нейронов [1,5,10–12]. Там, где доступны специфические ингибиторы киназ, было показано, что их применение блокирует способность нейротрансмиттеров вызывать эти ответы.Взятые вместе, эти данные демонстрируют, что активация этих зависимых от вторых мессенджеров протеинкиназ является одновременно необходимым и достаточным шагом в последовательности событий, посредством которых определенные первые мессенджеры производят некоторые из своих физиологических эффектов.

Трансгенные методологии предоставили дополнительные доказательства важности зависимых от вторичных мессенджеров протеинкиназ в регуляции передачи сигналов в головном мозге. Лучшим примером на сегодняшний день являются мыши, лишенные субъединиц CaMK II.У этих животных обнаруживаются недостатки в форме синаптической пластичности, долгосрочной потенциации в гиппокампе, а также аномальное пространственное обучение, форма обучения, зависящая от функции гиппокампа (см. Также главу 50).

Каскад митоген-активируемых протеинкиназ не зависит от второго мессенджера

Хотя вторые мессенджер-зависимые протеинкиназы были идентифицированы первыми как играющие важную роль в функции нейронов, теперь мы знаем, что многие другие типы протеинкиназ серин-треонин могут быть также существенно (см. Таблицу 24-1).Действительно, одним из наиболее важных открытий 1990-х годов было определение каскадов митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK).

MAPK были впервые описаны как «митоген-активируемые протеинкиназы», и было показано, что они играют важную роль в росте клеток. Те же ферменты были описаны в головном мозге как «протеинкиназы, связанные с микротрубочками» из-за их фосфорилирования белков, связанных с микротрубочками, и других белков цитоскелета нейронов. Однако механизмы, с помощью которых активность ферментов контролируется внеклеточными сигналами, оставались загадкой до недавних лет, когда эти механизмы были выяснены в основном на основе достижений в передаче сигналов дрожжей и последующей идентификации гомологичных сигнальных белков в клетках млекопитающих [3, 13,14].

Базовая схема каскадов МАПК представлена на. MAPK, неактивный в базовых условиях, активируется фосфорилированием другой протеинкиназой, называемой MAPK-киназой. Сама киназа MAPK активируется фосфорилированием еще одной протеинкиназой, называемой киназой MAPK-киназы. Киназа киназы MAPK активируется при взаимодействии с членом суперсемейства Ras малых G-белков, которые связаны с плазматической мембраной (см. Главу 20). Точный механизм активации остается неизвестным, но считается, что Ras и родственные белки в активированной GTP-связанной форме могут связывать киназу киназы MAPK и, таким образом, притягивать киназу к плазматической мембране, где она активируется еще неизвестными факторами. , возможно, даже дополнительная киназа, MAPK kinase kinase kinase.Механизм, регулирующий активацию Ras и родственных белков внеклеточными сигналами, довольно сложен и включает многочисленные «линкерные» белки, например Shc, Grb и Sos, которые связывают Ras с различными белками тирозинкиназы, связанными с плазматической мембраной. рецепторы (см. главы 19, 20 и 25).

Рисунок 24-3

Схематическая диаграмма путей митоген-активируемой протеинкиназы (MAP-kinase) . Справа от показан исходный путь, очерченный в дрожжах.Слева показаны гомологичные пути, недавно идентифицированные в клетках млекопитающих, включая мозг. MEKK, (подробнее …)

Наиболее изученное семейство MAPK в головном мозге — это протеинкиназы, регулируемые внеклеточными сигналами (ERK), которые активируются нейротрофинами и родственными факторами роста () [3,13,14 ]. Киназы MAPK, ответственные за фосфорилирование и активацию ERK, называются киназами ERK II (MEK). MEK фосфорилирует ERK по остаткам треонина и тирозина, которые необходимы для активации ERK.Таким образом, MEK является примером протеинкиназы с двойной функцией, которая может фосфорилировать субстратный белок по этим двум типам остатков. Фосфорилированные остатки треонина и тирозина во всех известных формах ERK разделены одной аминокислотой, что дает консервативную последовательность треонин-аминокислота-тирозин (T-X-Y). Киназы киназы MAPK, ответственные за активацию MEK, включают группу протеин-серин-треониновых киназ, называемую Raf. Raf, в свою очередь, частично активируется одной из трех известных форм Ras, которая активируется в ответ на связывание многих типов факторов роста с их рецепторами.Таким образом, нейротрофины, такие как фактор роста нервов (NGF), нейротрофический фактор головного мозга (BDNF) и связанные с ними факторы роста, такие как эпидермальный фактор роста и инсулин, связываются с рецепторами плазматической мембраны, которые обладают внутренней активностью протеинтирозинкиназы в их цитоплазматической среде. домены. Активация этой активности при связывании фактора роста приводит к активации Ras через каскад линкерных белков, как упоминалось выше (см. Главу 19).

Мозг содержит множество форм ERK, MEK и Raf (обозначенных ERK1, 2, 3; MEK1, 2; Raf 1, 2, 3 и т. Д.), Которые экспрессируются в различных популяциях нейронов.Учитывая, что основными активаторами каскада ERK являются факторы роста, неудивительно, что эти ферменты участвуют в росте, дифференцировке и выживании нейронов. Более того, стало очевидно, что эти ферменты также могут играть роль в синаптической передаче в нервной системе взрослого человека.

Второе семейство MAPK называется стресс-активируемыми протеинкиназами (SAPK) [3,13,14]. Сюда входят JNK, или киназы Jun, названные первоначально в честь их фосфорилирования фактора транскрипции c-Jun.SAPK были впервые идентифицированы в периферических тканях на основании их активации в ответ на клеточные формы стресса, включая рентгеновское облучение и осмотический стресс. Совсем недавно было продемонстрировано, что они активируются в головном мозге несколькими цитокинами, а также синаптической активностью. Как показано на фиг. 5, SAPK активируются киназами SAPK (SEK), которые, в свою очередь, активируются киназами MEK. Ras-подобные малые G-белки, участвующие в активации киназы MEK, представляют собой Rac и Cdc-42. В этом случае оказывается, что Rac / Cdc-42 запускает активацию киназы MEK, стимулируя ее фосфорилирование еще одной протеинкиназой, называемой киназой, активируемой p21 (PAK).Таким образом, PAK можно рассматривать как киназу киназы киназы MAPK, которая аналогична каскаду протеинкиназ, обнаруживаемых в дрожжах ().

Драматической особенностью каскадов MAPK является ряд последовательных вовлеченных протеинкиназ. Хотя эволюционная основа таких каскадов остается неизвестной, очевидно, что они возникли очень рано и могут обеспечить основу для взрывного усиления инициирующего внеклеточного сигнала, который действует на очень редкие рецепторы плазматической мембраны. Одной из основных задач в текущих исследованиях является определение точных механизмов бесчисленных эффектов MAPK путем идентификации их физиологических белков-субстратов.Среди наиболее охарактеризованных белков-субстратов — факторы транскрипции [3,13,14] (см. Главу 26). Считается, что фосфорилирование c-Jun с помощью JNK увеличивает транскрипционную активность c-Jun. Elk-1, также являющийся фактором транскрипции, фосфорилируется и активируется ERK. При фосфорилировании Elk-1 объединяется с другими белками с образованием фактора ответа сыворотки, который связывается с элементом ответа сыворотки, присутствующим в промоторах многих генов, включая c-Fos, другой фактор транскрипции.

Другие типы белков также известны как физиологические субстраты для MAPK.Тирозингидроксилаза, фермент, ограничивающий скорость синтеза катехоламиновых нейротрансмиттеров, фосфорилируется ERK, что, по-видимому, увеличивает активность фермента в ответ на другие активирующие стимулы (см. Ниже и главу 12). Фосфолипаза A ₂, первый фермент в генерации простагландина и родственных метаболитов арахидоновой кислоты, фосфорилируется и активируется ERK. Цитоскелетные белки, такие как белки, связанные с микротрубочками и тау-белок, также являются заметными субстратами, хотя точное влияние фосфорилирования на физиологическую активность этих белков остается плохо изученным.Наконец, среди субстратов для MAPK есть еще другие протеинкиназы. Таким образом, одним из важных эффекторных механизмов ERK является фосфорилирование и активация рибосомной S6-киназы (RSK), протеин-серин-треонинкиназы, впервые идентифицированной для ее фосфорилирования и регуляции рибосомных белков, но теперь известно, что она фосфорилирует другие типы субстратов, включая фактор транскрипции. белок, связывающий элемент ответа цАМФ (CREB) [12]. Аналогичный мотив наблюдается для SAPK, которые, по-видимому, также вызывают некоторые из своих биологических эффектов через фосфорилирование и активацию других серин-треониновых киназ, таких как MAPK-активированная протеинкиназа (MAPKAP) [14].

Мозг содержит много других типов протеинкиназ, не зависящих от вторичного мессенджера.

Примеры независимых от вторичного мессенджера протеинкиназ приведены в таблице 24-1. Многие из них включают ферменты, которые первоначально были идентифицированы как ассоциированные с определенным белком-субстратом, но, как было показано позже, играют более широкую роль в передаче сигналов мозга [1–3]. Функциональная роль одной из них, β-адренергической рецепторной киназы (βARK), типа киназы рецептора G-белка (GRK), обсуждается ниже.

Другими примерами протеин-серин-треониновых киназ являются циклин-зависимые киназы (CDK), первоначально идентифицированные по их роли в контроле клеточного цикла [3]. Такие киназы, опять-таки первоначально идентифицированные у дрожжей, относятся к большому количеству белков, называемых белками цикла деления клетки (Cdc). Прототипом CDK является Cdc-2, который фосфорилируется и активируется другой протеинкиназой, называемой CDK-активирующей киназой (CAK). Это фосфорилирование зависит от присутствия белка, называемого циклином, который необходим для активности Cdc-2.Для активности САК требуется еще одна протеинкиназа, называемая САК-активирующей киназой (САКАК), хотя детали этих каскадов остаются предварительными. Хотя функцию Cdc-2 лучше всего понять в контексте контроля клеточного цикла, как указано выше, было показано, что фермент фосфорилирует нейрон-специфические белки, что повышает вероятность того, что CDK, экспрессируемые в высоких концентрациях в неделящихся взрослых нейронах , модулировать аспекты синаптической передачи.

Большинство протеин-серин-треониновых киназ подвергаются аутофосфорилированию

Аутофосфорилирование большинства протеинкиназ связано с увеличением активности киназ [1,5].В некоторых случаях, например, с субъединицей RII PKA, аутофосфорилирование, по-видимому, представляет собой механизм положительной обратной связи для активации киназы, в данном случае за счет увеличения скорости диссоциации субъединиц RII и C. В случае CaMK II аутофосфорилирование приводит к тому, что каталитическая активность фермента становится независимой от Ca ²⁺ и кальмодулина. Это означает, что фермент, первоначально активированный в ответ на повышенный уровень клеточного Ca ²⁺, остается активным после того, как концентрации Ca ²⁺ вернутся к исходному уровню.По этому механизму нейротрансмиттеры, активирующие CaMK II, могут вызывать относительно долгоживущие изменения функции нейронов. В других случаях, например, с рецептор-ассоциированными протеинтирозинкиназами (обсуждаемыми в главе 25), аутофосфорилирование является обязательным этапом в последовательности молекулярных событий, посредством которых эти киназы активируются и производят физиологические эффекты.

Границы | Осуществление лигирования серин / треонин: объем, ограничения и механистическое значение этого

Введение

Химические методы, позволяющие слияние двух полностью незащищенных пептидных сегментов боковой цепи на концах, называемое лигированием пептидов, обеспечивают доступ к сложным, длинным пептидам и даже белкам за пределами твердофазного пептидного синтеза (SPPS) (Kent, 2009).Появились многочисленные методологии, позволяющие доставлять определенные пептидные / белковые мишени. В частности, с тех пор, как было введено нативное химическое лигирование (NCL) (Dawson et al., 1994; Tam et al., 1995; Dawson and Kent, 2000), химический синтез белков стал достижимым и, таким образом, обеспечил общую стратегию для гибкое и точное включение природных или неестественных элементов в молекулу белка. Реализация NCL заключается в супернуклеофильности N-концевого цистеина для опосредования хемоселективного лигирования пептида, тем самым обеспечивая слияние двух незащищенных сегментов пептида боковой цепи с образованием природного Xaa-Cys в сайте лигирования.За последние два десятилетия был достигнут значительный прогресс в разработке стратегий и методов для улучшения и расширения NCL на других аминокислотных участках (Hackenberger and Schwarzer, 2008; Hemantha et al., 2012; Monbaliu and Katritzky, 2012; Verzele and Madder, 2013). Особенно важно то, что успех NCL-десульфуризации для реализации пептидного лигирования в сайте аланина (Yan and Dawson, 2001; Wan and Danishefsky, 2007) инициировал развитие NCL в других сайтах амино-кислоты с использованием синтетических суррогатов цистеина / селеноцистеина ( Canne et al., 1996; Wong et al., 2013c). Примеры включают использование ß-меркаптофенилаланина (Crich and Banerjee, 2006), γ-меркаптовалина / пеницилламина (Chen et al., 2008; Haase et al., 2008), ß-меркаптолейцина (Harpaz et al., 2010; Tan et al. al., 2010), γ-меркаптотреонин (Chen et al., 2010), δ-меркаптолизин (Ajish Kumar et al., 2009a; Yang et al., 2009), γ-меркаптопролин (Ding et al., 2011), ß-меркаптоглутамин (Siman et al., 2012), ß-меркаптоаспартат (Guan et al., 2013; Thompson et al., 2013), ß-селенол-фенилаланин (Malins and Payne, 2012) и селенол-пролин (Townsend и другие., 2012) для создания сайтов лигирования с Phe, Val, Leu, Thr, Lys, Pro, Gln и Asp, соответственно, различными исследовательскими группами. Тем не менее, большинство этих β / γ-меркапто неприродных аминокислот коммерчески недоступны и требуют утомительного органического синтеза (Wong et al., 2013c). Кроме того, использование уникальных реагирующих функциональных групп на лигирующем С-конце и N-конце, включая тиоэфир, содержащий азид фосфиновой группы и α-кетокислоту-гидроксиламин, привело к тиол-независимому лигированию, лигированию по Штаудингеру (Nilsson и другие., 2000) и лигирование KAHA (Bode et al., 2006; Pattabiraman et al., 2012) соответственно.

Продолжая разработку простого хемоселективного пептидного лигирования, мы недавно ввели стратегию серин / треонинового лигирования (STL), позволяющую пептидное лигирование незащищенных пептидных сегментов боковой цепи с образованием естественной пептидной связи (Xaa-Ser / Thr) в сайте лигирования (Li et al., 2010). Хотя лигирования, которые могут генерировать Ser / Thr в сайте лигирования, были разработаны разными группами (Okamoto and Kajihara, 2008; Ajish Kumar et al., 2009b; Томас и Пейн, 2009; Chen et al., 2010), наша стратегия лигирования напрямую использует природный остаток серина или треонина на N-конце, чтобы опосредовать лигирование пептида. Эта стратегия лигирования включает в себя слияние сложного эфира пептида салицилальдегида (SAL) и пептида с N-концевым серином или треонином, чтобы получить N, O -бензилиденацеталь в сайте конъюгации, с последующим простым ацидолизом для высвобождения природного пептида. связь. По пути этого лигирования сложный эфир пептида SAL (SE) 1 будет реагировать с аминогруппой N-концевого остатка серина или треонина второго пептидного сегмента 2 с образованием имина ( c.f. 3 ) обратимо, с последующей 5-эндо-тригонометрической циклизацией от β-гидроксильной группы N-концевого остатка серина или треонина с получением оксазолидина ( ср. 4 ). Тогда необратимый перенос O → N 1,5-ацила даст стабильный промежуточный амид ( сравните 5 ). Затем полученный N, O -бензилиденацеталь можно легко удалить посредством ацидолиза для восстановления естественной пептидной связи Xaa-Ser / Thr в сайте лигирования ( c.f. 6 ) (Рисунок 1).

Фигура 1. Схема лигирования Ser / Thr .

Мы успешно применили этот метод для конвергентного синтеза различных пептидов / белков, включая гликопептид MUC1 и фермент ацилфосфатазу (Xu et al., 2013; Zhang et al., 2013). Кроме того, опосредованная STL циклизация пептидов была использована для синтеза даптомицина и других циклических пептидов различного размера (Lam et al., 2013; Wong et al., 2013a, b; Zhao et al., 2013). Совсем недавно STL использовался в форме лигирования экспрессионных белков с получением конъюгата РНКаза-пептид (Levine et al., 2014). В этой статье мы хотим затронуть несколько проблем, связанных с этой перевязкой. Во-первых, мы считаем необходимым тщательно изучить влияние незащищенного лизина на хемоселективность. Во-вторых, мы стремимся изучить объем и ограничения STL с различными C-концевыми аминокислотными остатками.

Материалы и методы

Инструменты

Все коммерческие материалы (Aldrich, Chemimpex и GL Biochem) использовали без дополнительной очистки.Все растворители были чистыми для реагентов или для ВЭЖХ (RCI или DUKSAN). Безводный тетрагидрофуран (THF) был свежеперегнан от натрия и бензофенона. Сухой дихлорметан (CH ₂ Cl ₂) отгоняли из гидрида кальция (CaH ₂). Все разделения включали подвижную фазу 0,1% TFA ( об. / Об. ) в ацетонитриле (растворитель A) и 0,1% TFA ( об. / Об. ) в воде (растворитель B). Разделение ВЭЖХ выполняли с помощью системы ВЭЖХ Waters, оснащенной детектором с фотодиодной матрицей (Waters 2996) с использованием колонки Vydac 218TP ™ C18 (5 мкм, 300 Å, 4 мкм).6 × 250 мм) при скорости потока 0,6 мл / мин для аналитической ВЭЖХ и колонки XBridge ™ Prep C18 OBD ™ (10 мкм, 300 Å, 30 × 250 мм) при скорости потока 15 мл / мин для препаративной ВЭЖХ. Масс-спектральные анализы низкого разрешения были выполнены на масс-спектрометре Waters 3100.

Твердофазный синтез пептидов (Boc Chemistry)

Следующие Boc-аминокислоты были приобретены у GL Biochem и Chemimpex и использованы в твердофазном синтезе: Boc-Ala-OH, Boc-Gly-OH, Boc-Ile-OH, Boc-Phe-OH, Boc-Lys (2 -Cl-Z) -OH, Boc-Phe-OH, Boc-Ser (Bzl) -OH, Boc-Thr (Bzl) -OH, Boc-Tyr (Bzl) -OH, Boc-Val-OH, Boc-Pro -ОЙ.На основе ранее синтезированного SAL-линкера (Wong et al., 2013b) был использован стандартный протокол Boc-SPPS. К загруженной смоле (0,5 ммоль / г) добавляли раствор 20% пиперидина в ДМФ (10 мл) и смесь осторожно перемешивали в течение 1 ч для удаления ацетильной группы. Растворитель слили и смолу промыли ДМФ (10 мл × 3). Добавляли раствор первой связываемой аминокислоты (4,0 эквивалента относительно емкости смолы), PyBOP (4,0 эквивалента) и DIPEA (8,0 эквивалента) в безводном ДМФ (10 мл).Смесь осторожно перемешивали в течение 3 часов. Группа Boc удалялась чистой TFA (2 × 5 мин) с последующей последовательной промывкой CH ₂ Cl ₂ (10 мл × 3), DMF (10 мл × 3) и CH ₂ Cl ₂ (10 мл × 3). К смоле добавляли раствор Boc-Xaa-OH (2,0 экв. Относительно емкости смолы), HATU (2,0 экв.) И DIPEA (4,0 экв.) В безводном ДМФ (10 мл). Смесь осторожно перемешивали в течение 45 мин. Связывание повторяли с последующей последовательной промывкой ДМФ (10 мл × 3) и CH ₂ Cl ₂ (10 мл × 3).Для полного снятия защиты смесь TFMSA / TFA / тиоанизол (1: 8,5: 0,5, об / об / об ) добавляли к пептиду, связанному со смолой, при 0 ° C и смесь осторожно перемешивали в течение 1 часа. Затем смолу промывали CH ₂ Cl ₂ (10 мл × 6). Аналитическая ОФ-ВЭЖХ с градиентом 5–90% ACN, содержащего 0,1% TFA, в течение 20 минут использовалась для подтверждения чистоты пептидов.

Озонолиз

Связанный со смолой пептид набухал в CH ₂ Cl ₂ / TFA (95: 5, об / об ) при -78 ° C.После обработки смеси O ₃ при -78 ° C в течение 10 мин, затем добавляли Me ₂ S (10,0 экв. Относительно емкости смолы) при -78 ° C. Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры в течение 30 минут. Смесь фильтровали и концентрировали в вакууме и очищали с помощью ВЭЖХ. Пептиды, содержащие Cys, Met и Trp, несовместимы с условиями озонолиза.

Твердофазный синтез пептидов (Fmoc Chemistry)

Синтез проводили вручную на смоле Ринка амид-АМ или 2-хлортритилхлоридной смоле.Пептиды синтезировали по стандартным протоколам Fmoc / t-Bu. Смесь для снятия блокировки представляла собой смесь 20/80 (об. / Об.) Пиперидин / ДМФ. Были использованы следующие аминокислоты Fmoc от GL Biochem: Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Glu (OtBu) -OH, Fmoc-Gln (Trt) -OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Lys (Boc) -OH, Fmoc-Met-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Trp (Boc) -OH и Fmoc-Cys (StBu) -OH. По завершении синтеза пептидную смолу подвергали смеси для расщепления. Смолу фильтровали, и объединенные фильтраты продували потоком конденсированного воздуха.Неочищенный продукт растирали с холодным диэтиловым эфиром, чтобы получить белую суспензию, которую центрифугировали, а затем эфир декантировали. Оставшееся твердое вещество было готово для очистки ВЭЖХ. Пептид N-ацилбензимидазолинон (Nbz) получали согласно протоколу Бланко-Каноза и Доусона (Blanco-Canosa and Dawson, 2008). Фенолиз на смоле для синтеза пептида SE проводили путем добавления Na2CO3 (10,0 экв.) И раствора диметилацеталя SAL (1,0 мл / 0,1 г смолы) в сухом DCM / THF (1/3, об. / Об.) До связанный со смолой пептид Nbz.Суспензию перемешивали при комнатной температуре 16 часов. Затем смолу фильтровали и промывали DCM. Объединенные фильтраты концентрировали в токе конденсированного воздуха. Маслянистый остаток обрабатывали TFA / H ₂ O (95/5, об. / Об.) В течение 1 часа. Растворитель продували струей конденсированного воздуха. Неочищенный продукт растирали с холодным диэтиловым эфиром, чтобы получить белую суспензию, которую центрифугировали, а затем эфир декантировали. Оставшееся твердое вещество было готово для очистки ВЭЖХ.Используя этот подход фенолиза на смоле, несколько сложных эфиров были синтезированы с выходом 20-30% от смолы. Аналитическая ОФ-ВЭЖХ с градиентом 5–90% ACN, содержащего 0,1% TFA, в течение 20 минут использовалась для подтверждения чистоты пептидов.

Ser / Thr лигирование

Пептид SE и N-концевой пептид растворяли в пиридин / уксусной кислоте (1: 1 моль / моль) в концентрации 1–5 мМ при комнатной температуре и перемешивали в течение 2–20 часов. Растворитель удаляли при вакууме . Неочищенный лигированный пептид обрабатывали 95% TFA в течение 10 минут для удаления O, N -бензилиденацеталя.Затем растворитель удаляли потоком воздуха и остаток очищали с помощью системы Prep-HPLC с 15–80% ACN с 0,1% TFA в течение 45 минут.

Результаты

Эффект незащищенного лизина боковой цепи

STL включает образование имина в качестве первой стадии захвата из альдегидной группы С-концевой SE и аминогруппы N-концевого серина или треонина. Действительно, свободные аминогруппы внутреннего Lys, вероятно, будут конкурировать с амином N-конца остатка Thr / Ser с образованием имина с C-концевым SE-альдегидом.Таким образом, возникает вопрос, будет ли присутствие Lys замедлять или даже ингибировать лигирование. В связи с этим мы разработали конкурентный эксперимент для изучения влияния Lys в различных положениях на эффективность лигирования. Мы приготовили N-концевой пептид без остатка Lys (K0) и серию N-концевого пептида с остатком Lys в другом положении (K2 – K5) (Таблица 1). Мы намеревались сравнить скорость лигирования Lys-содержащего пептида по сравнению с пептидом K0 при взаимодействии с тем же пептидом SE.

Таблица 1. Последовательность модельных пептидов, использованных в конкурентном эксперименте .

В каждой перевязке растворяли 1,0 экв. пептида SE и 1,0 экв. пептида K0 и 1,0 экв. любого пептида из пептидов K2 – K5 в буфере для лигирования в концентрации 5 мМ. Неочищенную реакционную смесь анализировали с помощью ЖХ-МС, и УФ-пики продуктов лигирования объединяли и сравнивали. В этом случае пептид SE был полностью израсходован, а N-концевые пептиды (K0 и K2-5) были в избытке.Таким образом, отношение УФ-интеграла можно было коррелировать с относительной скоростью реакции. Как видно из рисунка 2, K3-K5 реагировал очень аналогично пептиду K0, с примерно равными интегралами, и лигирование было завершено за 4 часа. Эти результаты показали, что присутствие Lys в последовательности существенно не влияло на STL, поскольку пептиды K3–5 имели такое же преобразование в продукты лигирования, как K0. Таким образом, мы можем заключить, что, хотя Lys будет реагировать с пептидом SE, непродуктивное образование имина является обратимым и быстрым, таким образом, не влияя на путь лигирования.

Рис. 2. Спектры ОФ-ВЭЖХ STL сложного эфира пептида SAL с пептидами K2 – K5 . SE = сложный эфир пептид-SAL; H = гидролиз эфира пептид-SAL; SE + K _X = продукт лигирования. Время лигирования: (A), (1,5 часа) и (B – D), (4 часа).

Интересно, что K2 вел себя иначе, чем пептиды K3 – K5. Во-первых, реакция была быстрой и завершалась через 1,5 часа, в отличие от 4 часов для лигирования K3 – K5. Во-вторых, как было определено из ЖК-спектра, пептид K2 реагировал намного быстрее (примерно в 2 раза быстрее), чем пептид K0 (рис. 2A).Остаток K2 был намного меньше, чем K0, что исключало возможность того, что в реакцию было случайно добавлено больше K2, чем пептид K0, чтобы вызвать более лигированный продукт K2. Это указывает на то, что вторая позиция (рядом с N-концевым Ser / Thr) может усиливать лигирование.

Эффект лигирующих аминных кислот

С-концевая аминокислота рядом с сайтом лигирования значительно повлияла на эффективность NCL. Например, стерически затрудненные β-разветвленные аминокислоты, включая Thr, Val, Ile, приводили к неполному лигированию через 48 часов (Hackeng et al., 1999). Связывание с C-концевым пролином также было очень медленным, что, как предполагается, является результатом снижения электрофильности, налагаемой n-> π * орбитальным взаимодействием (Pollock and Kent, 2011). Аналогичным образом мы стремились систематически оценить совместимость и реактивность всех 20 аминокислот на С-конце пептида SE. Мы выбрали два пептида: NH ₂ -AEGSQAKFG X — SE в качестве C-концевого пептида, где X представляет собой разные аминокислоты, и NH ₂ -SPKALTFG-CO ₂ H в качестве модельного пептида, содержащего Ser на N-конец.Необходимые пептидные эфиры SAL (X = A, G, T, S, V, L, I, P, F, Y, D, E, N, Q, H и K) были получены Boc-SPPS (Wong et al. al., 2013b), в то время как пептидные эфиры SAL (X = W, C, M и R) были синтезированы с помощью Fmoc-SPPS (Zhang et al., 2013) из-за несовместимости озонолиза (M, C и W ) и снятие защиты TFMSA с тозильной группы Arg. Лигирование двух незащищенных пептидных сегментов проводили следующим образом: два пептидных сегмента растворяли в пиридинацетатном буфере (1: 1, моль: моль) в концентрации 1 мМ при комнатной температуре.За процессом реакции следили с помощью аналитической ЖХ-МС в различные моменты времени (2, 6 и 15 ч). Конверсия всех перевязок была определена через 2 часа и сведена в Таблицу 2.

Таблица 2. Процент превращения различных С-концевых аминокислот и сложного эфира SAL за 2 часа .

Как видно из таблицы 2, Ala, Gly, Ser, Glu, Thr, Phe и Cys (StBu), по-видимому, имели самые быстрые превращения, при которых> 60% сложного эфира пептида было израсходовано через 2 часа, и лигирование было завершено. в течение 6 ч.Интересно, что β-разветвленная аминокислота Thr претерпевает аналогичное превращение лигирования в наименее затрудненную аминокислоту глицин. Val, Leu, Ile, Asn, Phe, Met и Tyr представляют собой вторую партию аминокислот с конверсией> 30% за первые 2 часа, а реакция завершилась в течение 6 часов. Тогда преобразование Arg, Trp, Pro и His в диапазоне от 7,9 до 28,6% оказалось самым медленным. В частности, перевязка C-Pro и Arg не могла быть завершена через 15 часов. Кроме того, мы обнаружили, что C-концевые Asp, Glu и Lys несовместимы с текущим состоянием STL из-за нестабильности пептида SE, когда первая аминокислота содержит функциональные группы нуклеофильных боковых цепей.

Ацидолиз

Второй этап этого STL включает ацидолиз для высвобождения N, O -бензилиденацеталя, образующегося в месте соединения (рис. 3). Таким образом, мы проводили различные условия ацидолиза. Мы приготовили трипептид, содержащий N, O -бензилиденацеталь, и обработали его в различных кислых условиях, включая 95, 50, 10, 5 и 1% TFA. За ходом реакции следили с помощью ЖХ-МС (таблица 3).

Рисунок 3.Ацидолиз промежуточного соединения N, O-бензилиденацеталя .

Таблица 3. Сводка ЖХ-МС анализа хода реакции .

Как видно из таблицы 3, 50% TFA и выше могут быстро удалить бензилиденацеталь в течение 5 минут. Ацидолиз 5–10% TFA может быть завершен в течение 4 часов. Когда использовали 1% TFA, ацидолиз становился очень медленным.

Обсуждение

STL появился как новый инструмент для доставки синтетических пептидов / белков с естественной пептидной связью посредством конвергентного лигирования двух незащищенных сегментов пептида боковой цепи.В этом методе используется природная аминокислота, N-концевой серин или треонин, чтобы опосредовать хемоселективное лигирование пептида, что обеспечивает простоту работы. Здесь мы полностью исследовали влияние незащищенного Lys на лигирование. В предложенном нами механизме STL аминогруппа N-концевого Ser / Thr сначала конденсировалась с альдегидом с образованием имина. Таким образом, возникает вопрос, могут ли аминогруппы внутреннего Lys в пептидной последовательности замедлять лигирование, конкурируя с аминогруппой N-концевого Ser / Thr.Мы провели конкурентные эксперименты и пришли к выводу, что скорость реакции между N-концевым пептидом без Lys (K0) и N-концевым пептидом с одним Lys в другом положении, включая K3 – K5, не была значительной. Интересно отметить, что пептид K2 с Lys рядом с N-концевым серином показал более высокую скорость реакции по сравнению с K0. Чтобы объяснить этот результат, мы предполагаем, что Lys помогает захватывать и доставлять C-концевой пептид SE к N-концевому остатку Ser через 11-членное кольцевое переходное состояние посредством обмена имина, индуцированного близостью (Kovaříček and Lehn, 2012). , таким образом улучшая лигирование с пептидом K2 (рис. 4).

Рис. 4. Предлагаемый механизм для объяснения повышенной скорости пептида К2 .

Другой важной проблемой, которую мы рассмотрели, была совместимость и относительный процент превращения С-концевой аминокислоты пептида SE в условиях STL. При лигировании пептидов, опосредованных NCL, Доусон использовал LYRAX-SR и CRANK в качестве модельных пептидов при 37 ° C для изучения относительного процента конверсии всех C-концевых аминокислот (Hackeng et al., 1999). Их результаты позволили им разделить C-концевые аминокислоты на четыре группы: быстрая реакция с His, Gly и Cys (≤4 ч), умеренная реакция с Phe, Met, Tyr, Ala и Trp (≤9 ч). , медленная реакция с Asn, Ser, Gln, Lys, Arg (≤24 ч) и очень медленная реакция с Leu, Thr, Val, Ile и Pro (≥48). Совместимость C-концевых Asn, Gln, Asp и Glu с NCL была спорной, поскольку другие наблюдали значительные уровни β- и γ-связанных побочных продуктов во время лигирования (Camarero and Muir, 2001; Villain et al., 2003).

Наши аналогичные исследования, но с NH ₂ -AEGSQAKFG X — SE и NH ₂ -SPKALTFG-CO ₂ H в качестве модельных пептидов, лигированных при комнатной температуре, показали, что скорость превращения C-концевого амино кислоты в условиях STL не следует той же тенденции, что и NCL. Во-первых, затрудненные β-разветвленные аминокислоты (например, Val, Thr, Ile) не замедляют образование продукта значительно. Действительно, лигирование с C-концевым треонином происходит очень быстро, подобно Ser, Gln, Gly и Ala.Во-вторых, менее предпочтительными вариантами для STL являются Arg, Trp, Pro и His. Факторы, вызывающие медленную реакцию на этих участках реакций, нам пока не ясны. В-третьих, C-концевой Asn иногда представляет проблему в NCL из-за образования C-концевых сукцинимидов (Gross et al., 2005), в то время как в условиях STL лигирование с пептидом Asn SE происходило гладко без значительных сторон. продукты. Наконец, пептиды SE в Asp, Lys и Glu были очень нестабильными для выделения, что делало невозможным исследование лигирования, поэтому они несовместимы с STL.Кроме того, мы обнаружили, что пептид SE с C-концевым цистеином генерировал неидентифицируемые побочные продукты во время STL. Однако эта проблема может быть легко решена с использованием C-терминального Cys (S- t Bu), поскольку STL не использует восстановительные условия.

Биомолекулы, полученные в результате химического синтеза, отличаются высокой гомогенностью и гибкостью модификаций, в отличие от биологически контролируемых методов, в частности, для белков с посттрансляционными модификациями.Таким образом, в этом контексте будет важна разработка новых и эффективных методов и стратегий, которые могут быть легко приняты исследователями, не имеющими опыта. Недавно мы разработали STL для синтеза конвергентных пептидов и продемонстрировали, что этот метод способен доставлять синтетические пептиды / белки. Этот метод отличается высокой хемоселективностью, простотой в эксплуатации и использованием обычных регентов. Наши исследования показали, что, хотя STL включает стадию захвата имина, внутренний Lys не мешает пути лигирования, и действительно, Lys рядом с N-концевым Ser / Thr может повышать эффективность лигирования.Кроме того, 17 аминокислот на С-конце подходят для лигирования, а Asp, Glu и Lys несовместимы. Среди рабочих 17 C-концевых аминокислот медленная реакция, вызванная объемной β-разветвленной аминокислотой в NCL, не наблюдалась в условиях STL. Тем не менее лигирование с C-концевым Pro и Arg было очень медленным и поэтому не рекомендовалось для STL.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Эта работа была поддержана Фондом общих исследований (HKU703811P) Совета по исследовательским грантам Гонконга, Национальной программой фундаментальных исследований Китая (программа 973, 2013CB836900) и Фондом развития проекта программы Peacock (KQC20110

74A).
Список литературы
Аджиш Кумар, К. С., Хадж-Яхья, М., Ольшевски, Д., Лашуэль, Х. А., и Брик, А. (2009a). Высокоэффективное хемоселективное убиквитилирование пептидов. Angew. Chem.Int. Эд. Engl . 48, 8090–8094. DOI: 10.1002 / anie.200
6
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Аджиш Кумар, К. С., Харпаз, З., Хадж-Яхья, М., и Брик, А. (2009b). Лигирование с помощью боковой цепи в синтезе белка. Bioorg. Med. Chem. Lett . 19, 3870–3874. DOI: 10.1016 / j.bmcl.2009.03.156
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Бланко-Каноса, Дж. Б., и Доусон, П. Э. (2008). Эффективный подход Fmoc-SPPS для создания предшественников тиоэфирных пептидов для использования в нативном химическом лигировании. Angew. Chem. Int. Эд. Engl . 47, 6851–6855. DOI: 10.1002 / anie.200705471
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Боде, Дж. У., Фокс, Р. М., и Бауком, К. Д. (2006). Хемоселективное амидное лигирование декарбоксилированной конденсацией N-алкилгидроксиламинов и α-кетокислот. Angew. Chem. Int. Эд. Engl . 45, 1248–1252. DOI: 10.1002 / ange.200503991
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Канне, Л.Е., Барк, С. Дж., И Кент, С. Б. Х. (1996). Расширение применимости нативного химического лигирования. J. Am. Chem. Soc . 118, 5891–5896. DOI: 10.1021 / ja960398s
CrossRef Полный текст
Чен, Дж., Ван, К., Юань, Ю., Чжу, Дж., И Данишефски, С. Дж. (2008). Собственное химическое лигирование валина: вклад в синтез пептидов и гликопептидов. Angew. Chem. Int. Эд. Engl . 47, 8521–8524. DOI: 10.1002 / anie.200803523
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Чен, Дж., Ван, П., Чжу, Дж. Л., Ван, К., и Данишефски, С. Дж. (2010). Программа для лигирования треониновых сайтов: приложение для контролируемого общего синтеза гликопептидов. Тетраэдр 66, 2277–2283. DOI: 10.1016 / j.tet.2010.01.067
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Крич Д. и Банерджи А. (2006). Целесообразен синтез производных трео-ß-гидрокси-α-аминокислот: фенилаланина, тирозина, гистидина, триптофана. J. Org. Chem .71, 7106–7109. DOI: 10.1021 / jo061159i
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Дин, Х., Сигенага, А., Сато, К., Моришита, К., и Отака, А. (2011). Двойное кинетически контролируемое естественное химическое лигирование с использованием комбинации сульфанилпролина и сульфанилэтиланилидного пептида. Org. Lett . 13, 5588–5591. DOI: 10.1021 / ol202316v
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Гросс, К. М., Лельевр, Д., Вудворд, К.К., и Барани, Г. (2005). Приготовление защищенных промежуточных продуктов пептидилтиоэфира для нативного химического лигирования с помощью химии Nα-9-флуоренилметоксикарбонила (Fmoc): рассмотрение стратегий закрепления боковой и основной цепи и совместимая защита для N-концевого цистеина. J. Pept. Res . 65, 395–410. DOI: 10.1111 / j.1399-3011.2005.00241.x
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Hackenberger, C.P., and Schwarzer, D. (2008). Хемоселективное лигирование и стратегии модификации пептидов и белков. Angew. Chem. Int. Эд. Engl . 47, 10030–10074. DOI: 10.1002 / anie.200801313
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Хакенг, Т. М., Гриффин, Дж. Х., и Доусон, П. Э. (1999). Синтез белка путем естественного химического лигирования: расширенные возможности за счет использования простой методологии. Proc. Natl. Акад. Sci. США . 96, 10068–10073. DOI: 10.1073 / pnas.96.18.10068
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Хеманта, Х.П., Нарендра Н., Сурешбабу В. В. (2012). Полный химический синтез полипептидов и белков: химия, методы лигирования и не только. Тетраэдр 68, 9491–9537. DOI: 10.1016 / j.tet.2012.08.059
CrossRef Полный текст
Kovaříček, P., and Lehn, J.-M. (2012). Слияние конституционной и двигательной ковалентной динамики в обратимых процессах образования и обмена иминов. J. Am. Chem. Soc . 134, 9446–9455. DOI: 10.1021 / ja302793c
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Лам, Х.Y., Zhang, Y., Liu, H., Xu, J., Wong, C.T., Xu, C., et al. (2013). Полный синтез даптомицина путем циклизации посредством хемоселективного лигирования серина. J. Am. Chem. Soc . 135, 6272–6279. DOI: 10.1021 / ja4012468
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Левин П. М., Крейвен Т. В., Бонно Р. и Киршенбаум К. (2014). Полусинтез пептоидно-белковых гибридов путем химического лигирования по серину. Org. Lett . 16, 512–515. DOI: 10.1021 / ol4033978
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Ли, Х.К., Лам, Х. Ю., Чжан, Ю. Ф., и Чан, К. К. (2010). Хемоселективные пептидные лигирования, индуцированные эфиром салицилальдегида: обеспечение создания естественных пептидных связей на сайтах серина / треонина. Org. Lett . 12, 1724–1727. DOI: 10.1021 / ol1003109
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Малинс, Л. Р., Пейн, Р. Дж. (2012). Синтез и применение ß-селенол-фенилаланина для нативной химии химического лигирования-деселенизации. Org.Lett . 14, 3142–3145. DOI: 10.1021 / ol3012265
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Монбалиу, Дж. К., Катрицки, А. Р. (2012). Последние тенденции в стратегиях синтеза пептидов на основе Cys и Ser / Thr. Chem. Commun. (Камб) . 48, 11601–11622. DOI: 10.1039 / c2cc34434c
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Паттабираман В. Р., Огункойя А. О., Боде Дж.W. (2012). Химический синтез белка путем хемоселективного лигирования α-кетокислоты с гидроксиламином (KAHA) с 5-оксапролином. Angew. Chem. Int. Эд. Engl . 51, 5114–5118. DOI: 10.1002 / anie.201200907
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Поллок, С. Б., Кент, С. Б. Х. (2011). Исследование происхождения резко сниженной реакционной способности пептид-пролилтиоэфиров при естественном химическом лигировании. Chem. Commun. (Камб) . 47, 2342–2344.DOI: 10.1039 / c0cc04120c
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Там, Дж. П., Лу, Ю. А., Лю, К. Ф., и Шао, Дж. (1995). Синтез пептидов с использованием незащищенных пептидов с помощью методов ортогонального связывания. Proc. Natl. Акад. Sci. США . 92, 12485–12489. DOI: 10.1073 / pnas.92.26.12485
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Тан, З., Шан, С., Данишефски, С. Дж. (2010). Понимание более тонких вопросов нативного химического лигирования: подход к каскадному лигированию. Angew. Chem. Int. Эд. Engl . 49, 9500–9503. DOI: 10.1002 / anie.201005513
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Томпсон, Р. Э., Чан, Б., Радом, Л., Джоллифф, К. А., и Пейн, Р. Дж. (2013). Хемоселективное пептидное лигирование-десульфуризация аспартата. Angew. Chem. Int. Эд. Engl . 52, 9723–9727. DOI: 10.1002 / anie.201304793
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Townsend, S.D., Тан, З., Донг, С., Шан, С., Брейлсфорд, Дж. А., и Данишефски, С. Дж. (2012). Достижения в области лигирования пролина. J. Am. Chem. Soc . 134, 3912–3916. DOI: 10.1021 / ja212182q
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Verzele, D., and Madder, A. (2013). Лоскутная химия белков: практический труд о достижениях в области синтетического пептидного сшивания. Chembiochem 14, 1032–1048. DOI: 10.1002 / cbic.201200775
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Злодей, м., Гертнер, Х., и Ботти, П. (2003). Нативное химическое лигирование с аспарагиновой и глутаминовой кислотами в качестве С-концевых остатков: объем и ограничения. евро. J. Org. Chem . 2003, 3267–3272. DOI: 10.1002 / ejoc.200300032
CrossRef Полный текст
Ван, К., и Данишефски, С. Дж. (2007). Специальное обессеривание цистеина на основе свободных радикалов: мощный прорыв в синтезе полипептидов и гликополипептидов. Angew. Chem. Int. Эд. Engl . 48, 9248–9252. DOI: 10.1002 / anie.200704195
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Вонг, К. Т., Лам, Х. Ю., и Ли, X. (2013a). Эффективный синтез кинуренинсодержащих пептидов путем озонолиза остатков триптофана на смоле: синтез цикломонтанина B. Org. Biomol. Chem . 11, 7616–7620. DOI: 10.1039 / c3ob41631c
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Вонг, К. Т., Лам, Х. Ю., Сонг, Т., Чен, Г., и Ли, X. (2013b).Синтез ограниченных циклических тетрапептидов, идущих от головы к хвосту, с помощью имин-индуцированной стратегии закрытия / сокращения кольца. Angew. Chem. Int. Эд. Engl . 52, 10212–10215. DOI: 10.1002 / anie.201304773
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Ян, Л. З., и Доусон, П. Э. (2001). Синтез пептидов и белков без остатков цистеина путем нативного химического лигирования в сочетании с десульфуризацией. J. Am. Chem. Soc . 123, 526–533. DOI: 10.1021 / ja003265m
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Ян, Р., Пасуноути, К. К., Ли, Ф., Лю, X.-W., и Лю, К. Ф. (2009). Двойное нативное химическое лигирование по лизину. J. Am. Chem. Soc . 131, 13592–13593. DOI: 10.1021 / ja1p
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Чжан, Ю., Сюй, К., Лам, Х. Ю., Ли, К. Л., и Ли, X. (2013). Химический синтез белков лигированием серина и треонина. Proc.Natl. Акад. Sci. США . 110, 6657–6662. DOI: 10.1073 / pnas.1221012110
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
Чжао, Дж. Ф., Чжан, X. Х., Дин, Ю. Дж., Ян, Ю. С., Би, X. Б., и Лю, К. Ф. (2013). Простой синтез эфиров пептидилсалицилальдегида и его использование в синтезе циклических пептидов. Org. Lett . 15, 5182–5185. DOI: 10.1021 / ol402279h
Pubmed Аннотация | Pubmed Полный текст | CrossRef Полный текст
активности серин / треонинкиназы протеина | SGD
Аннотации
Куратор вручную
Джин Квалификация Термин генной онтологии Аспект Расширение аннотации Доказательства Метод Источник Назначено Номер ссылки
Высокая пропускная способность
Джин Квалификация Термин генной онтологии Аспект Расширение аннотации Доказательства Метод Источник Назначено Номер ссылки
Вычислительный
Джин Квалификация Термин генной онтологии Аспект Расширение аннотации Доказательства Метод Источник Назначено Номер ссылки
протеина серин-треонинкиназы | Антиген STK11 | STK16
О серин-треониновой протеинкиназе / STK:
Сериновые треониновые протеинкиназы представляют собой группу из примерно 125 протеинкиназ (из 500 ферментов), которые фосфорилируют ОН-группу серина или треонина.Их часто называют STK, поскольку они влияют на различные клеточные процессы в организме человека.
Структура серин-треониновой протеинкиназы
Сериновые протеинкиназы также называются сериновыми / треониновыми протеинкиназами и имеют номер Комиссии по ферментам (ЕС) 2.7.11, хотя некоторые примеры имеют свои индивидуальные номера. Их регистрационный номер в CAS: 9026-43-1.
Белковые ферменты STK могут включать рецепторные протеины серин / треонинкиназы (EC 2.7.11.30) Внутриклеточные сигнальные пептиды и белки, такие как CK2, протеинкиназа A, протеинкиназа C, митоген-активируемые протеинкиназы (MAP), AKT-киназа, Pelle, и киназа фосфорилазы.
Ферменты серин / треониновых протеинкиназ относятся к семейству трансфераз, что означает, что фосфорилирование используется для переноса атома кислорода серина или треонина. Киназа обычно не связана с одним субстратом, поскольку остатки консенсусной последовательности субстрата-мишени контактируют только с некоторыми аминокислотами внутри каталитической щели. Каталитический домен киназ высококонсервативен,
Структура серина часто соответствует структуре HI, Nh3, O, OH, в то время как треонин представляет собой h4C, OH, Nh3, O, OH.Химические реакции выражаются как: АТФ + белок ⇌ АДФ + фосфопротеин.
Функция и механизмы STK
Сериновые треониновые протеинкиназы — это семейство ферментов, охватывающих различные субстраты, что означает, что их функции также могут различаться. Например, киназы Mos / Raf активируются факторами роста для стимуляции роста клеток, в то время как MAPK реагируют на внеклеточные стимулы, регулируя экспрессию генов, митоз, дифференцировку и выживаемость клеток.
Серин-треонинкиназы AKT регулируют пролиферацию клеток, в то время как AKT2 играет важную роль в влиянии действия инсулина на клетки человека.Между тем, pelle является само-фосфорилирующейся протеинкиназой, а также Tube и Toll.
Рецепторы серин / треонинкиназы также являются неотъемлемой частью эмбрионального развития, а также апоптоза и дифференцировки клеток. На большинство STK воздействует псевдосубстрат, который не содержит аминокислот, необходимых для фосфорилирования, но все же связывается с киназой аналогично реальному субстрату. Их роль в регуляции этих элементов, а также в росте клеток делает их чрезвычайно важным классом ферментов в головном мозге и других органах.
Взаимодействие с серин-треонин-протеинкиназой
Серин-треониновая протеинкиназа представляет собой чрезвычайно важный класс белков в отношении рака, поскольку ее экспрессия изменяется при многих типах рака. Рак яичников — это рак яичников, при котором были выявлены некоторые преимущества, полученные от использования ингибиторов серин-треониновой протеинкиназы, хотя влияние этих преимуществ — наряду с безопасностью процедур — неубедительно.
Р90-кДа рибосомная киназа S6 (сериновая протеинкиназа RSK) была связана с раком простаты, в то время как были разработаны новые антиметастатические противораковые препараты для нацеливания на MAPK как способ снижения скорости пролиферации клеток.
Учитывая, что это семейство ферментов охватывает около 25% из 500 ферментов, которые влияют на 30% всех клеток человека, серин-треониновая протеинкиназа взаимодействует с широким спектром рецепторов и клеток.
Двойная роль белка, ассоциированного с рецептором серин-треонинкиназы (STRAP) в редокс-чувствительных сигнальных путях, связанных с развитием рака
Белок, связанный с рецептором серин-треонинкиназы (STRAP), является трансформирующим фактором роста β (TGF- β ) белок, взаимодействующий с рецептором, который участвует как в пролиферации клеток, так и в их гибели в ответ на различные стрессы.Однако точная роль STRAP в этих клеточных процессах все еще неясна. Механизмы, с помощью которых STRAP контролирует как пролиферацию клеток, так и их гибель, в настоящее время начинают выясняться. В дополнение к его биологической роли в этом обзоре также уделяется внимание двойным функциям STRAP при раке, демонстрирующем окислительно-восстановительную дисрегуляцию, когда он может вести себя как супрессор опухоли или онкоген (то есть он может либо ингибировать, либо способствовать образованию опухоли), в зависимости от клеточный контекст. Необходимы дальнейшие исследования для определения функций STRAP и окислительно-восстановительных внутриклеточных сигнальных путей, которые усиливают пролиферацию или гибель клеток в раковых тканях человека, что может помочь в разработке эффективных методов лечения рака.
1. Введение
Активные формы кислорода (АФК) обеспечивают передачу сигналов окислительно-восстановительного потенциала, критически важную для многих клеточных функций [1]. В целом, умеренные уровни АФК действуют как сигналы для активации стресс-зависимых путей выживания [2]. Напротив, высокие уровни АФК в клетках и тканях могут вызывать повреждение клеток и активировать пути гибели клеток. Следовательно, поддержание умеренных уровней АФК в клетках важно для поддержки основных сигнальных путей, не вызывая повреждения и гибели клеток.В нормальных физиологических условиях окислительно-восстановительный баланс поддерживает надлежащую функцию сигнальных белков, чувствительных к окислительно-восстановлению, и обеспечивает правильную реакцию клеток на эндогенные и экзогенные стимулы [3]. Однако, как только окислительно-восстановительное состояние не сбалансировано, индуцируется окислительный стресс и стимулируется образование опухоли за счет инициирования аберрантной индукции передачи сигналов о прогрессировании опухоли и нарушения передачи сигналов о гибели клеток [4]. Примечательно, что чувствительные к АФК сигнальные пути, которые участвуют в процессах пролиферации, дифференцировки и выживания клеток, часто повышаются при многих типах рака [5].
Чтобы поддерживать гомеостаз тканей в многоклеточных организмах, необходимо регулировать пролиферацию и гибель клеток. Эта регуляция частично достигается за счет множества чувствительных к окислительно-восстановлению внутриклеточных сигнальных путей, которые координируют процессы пролиферации и гибели клеток. На эти внутриклеточные сигнальные события влияют белок-белковые взаимодействия, которые включают различные сигнальные молекулы и модификации белков, такие как фосфорилирование белка, которое либо активирует, либо инактивирует целевой белок для выполнения определенной функции.
Белок, связанный с рецептором серин-треонинкиназы (STRAP) был первоначально идентифицирован как белок трансформирующего фактора роста, взаимодействующий с рецептором β (TGF- β ), который ингибирует передачу сигналов TGF- β , вероятно, за счет стабилизации связи между Рецепторы TGF- β и Smad7 и предотвращение связывания Smad2 и Smad3 с рецепторами TGF- β [6]. STRAP локализуется как в цитоплазме, так и в ядре [7]. STRAP-дефицитные эмбриональные фибробласты мыши (STRAP ^{— / —} MEFs) показали более высокие уровни TGF- β -опосредованной активации транскрипции и ингибирования роста, чем их аналоги дикого типа [8].Передача сигналов TGF- β инициируется связыванием лигандов, таких как TGF- β 1, с рецепторами TGF- β типа I и II на поверхности клетки. Активированные рецепторы TGF- β непосредственно индуцируют нижнее фосфорилирование факторов транскрипции Smad2 и Smad3, которые подвергаются быстрой гомотримеризации и превращению в гетероолигомеры Co-Smad, содержащие Smad4. Гетеромерный комплекс Smad затем перемещается в ядро, где он взаимодействует с другими ядерными кофакторами, регулируя транскрипцию генов-мишеней [9, 10].
Ген STRAP был впервые клонирован из библиотек кДНК эмбрионов мыши [6] и HepG2 [11] человека. Ген STRAP человека и мыши кодирует белок из 350 аминокислот с предсказанной молекулярной массой 38 кДа. Полноразмерный белок STRAP включает семь повторов WD40 (от WD1 до 7) и C-концевой (CT) домен (рисунок 1). Повторение WD40 состоит примерно из 40 аминокислот, часто заканчивающихся дипептидом триптофан-аспарагиновая кислота (WD) [12]. Не менее важно, что повторы WD40 часто участвуют во взаимодействиях белок-белок [13].Фактически, повторы WD40 в STRAP связываются с различными белками-мишенями, тем самым регулируя пролиферацию и гибель клеток [14-18]. Более того, мыши с нокаутом STRAP показали эмбриональную летальность между эмбриональными днями E 10.5 и E 12.5 из-за дефектов ангиогенеза, кардиогенеза, соматогенеза и закрытия нервной трубки, что указывает на то, что STRAP необходим для нормального развития эмбриона [19]. Более того, нарушение регуляции STRAP участвует в онкогенезе [8, 11, 18].

Посттрансляционные модификации (ПТМ), такие как фосфорилирование белка, критически важны для реализации своих биологических функций STRAP (рис. 2).Стабильность и активность STRAP в основном регулируется фосфорилированием по остаткам треонина и серина. Напр., Фосфорилирование STRAP по Thr ¹⁷⁵ и Ser ¹⁷⁹ с помощью ASK1 необходимо для негативной регуляции активности ASK1 [16]. Мышиная протеин-серин / треонинкиназа 38 (MPK38), опосредованная STRAP по Ser ¹⁸⁸, увеличивала стабильность STRAP, тем самым индуцируя проапоптотическую активность STRAP через окислительно-восстановительный ASK1, TGF- β , p53 и фосфоинозитид-3-киназу ( Передача сигналов PI3K) / 3-фосфоинозитид-зависимой протеинкиназы-1 (PDK1) [14].Эти данные показывают, что фосфорилирование STRAP по конкретным остаткам играет важную роль в определении STRAP-опосредованной пролиферации клеток и гибели клеток, хотя необходимы дальнейшие исследования для идентификации других сайтов фосфорилирования на STRAP.

(a) Антиапоптотическая функция STRAP
(b) Проапоптотическая функция STRAP
(a) Антиапоптотическая функция STRAP
(b) Проапоптотическая функция STRAP
в последние годы показала, что интенсивные исследования STRAP взаимодействует со многими чувствительными к окислительно-восстановлению сигнальными белками, которые регулируют различные клеточные процессы, такие как клеточный цикл, пролиферацию, дифференцировку, выживание и апоптоз.В нормальных физиологических условиях STRAP способствует выживанию и пролиферации клеток и ингибирует остановку клеточного цикла и апоптоз в нормальных и раковых клетках, что указывает на то, что STRAP может действовать как антиапоптотический белок [8, 16, 20]. Напротив, изменения в окислительно-восстановительном балансе вызывают гибель клеток с помощью STRAP в нормальных и раковых клетках, подразумевая, что STRAP также может функционировать как проапоптотический белок [14, 21]. В этом обзоре мы суммируем недавний прогресс в понимании потенциальных клеточных и молекулярных механизмов STRAP, участвующих в пролиферации, выживании и смерти клеток.Мы также рассматриваем двойную роль STRAP при раке, что может способствовать разработке нового терапевтического варианта лечения рака.
2. Регуляция активности STRAP посредством белок-белковых взаимодействий
2.1. Антиапоптотическая активность STRAP в клетках
Регулирование пролиферации клеток в многоклеточных организмах представляет собой сложный процесс, который частично достигается за счет перекрестного взаимодействия между развитием клеточного цикла и запрограммированной гибелью клеток. STRAP способствует пролиферации клеток, что может быть достигнуто за счет ингибирования апоптоза и активации путей роста клеток.Более того, многочисленные белки, взаимодействующие со STRAP, могут положительно или отрицательно регулировать функцию STRAP. Следующие разделы освещают наше текущее понимание разнообразных регуляторных механизмов STRAP при пролиферации клеток.
2.1.1. STRAP
— Опосредованное ингибирование сигнального пути TGF -β
Nm23-h2, опухолевый супрессор, усиливает STRAP-индуцированное ингибирование передачи сигналов TGF- β посредством окислительно-восстановительного взаимодействия с STRAP [15]. Ассоциация Nm23-h2 с STRAP опосредуется остатками цистеина, присутствующими в каждом из этих двух белков: Cys ¹⁴⁵ в Nm23-h2 и Cys ¹⁵² и Cys ²⁷⁰ в STRAP.Соответственно, эта ассоциация зависела от присутствия дитиотреитола или β -меркаптоэтанола, но не от H ₂ O ₂. Совместная экспрессия Nm23-h2 с STRAP способствует ингибированию апоптоза, индуцированного TGF- β , и способствует росту клеток с помощью STRAP. Другое исследование предполагает, что PDK1 также регулирует индуцированное STRAP ингибирование передачи сигналов TGF- β [17]. Примечательно, что PDK1 усиливает STRAP-индуцированное ингибирование передачи сигналов TGF- β за счет стабилизации ассоциации между рецепторами Smad7 и TGF- β и предотвращения ядерной транслокации Smad3.Было обнаружено, что в дополнение к Nm23-h2 и PDK1 другой белок, взаимодействующий с STRAP, B-myb, способствует индуцированному STRAP ингибированию передачи сигналов TGF- β . Аминоконцевой ДНК-связывающий домен и область (аминокислоты 373–468) между кислой и консервативной областями B-myb опосредуют взаимодействие B-myb-STRAP. Это связывание усиливает опосредованное STRAP ингибирование передачи сигналов TGF- β путем модуляции образования комплекса между рецепторами TGF- β и Smad3 или Smad7. Более того, B-myb предотвращает транслокацию Smad3 в ответ на TGF- β 1 [22].В совокупности эти находки дополняют растущее количество доказательств того, что STRAP участвует в негативной регуляции передачи сигналов TGF- β и впоследствии способствует росту клеток, напрямую взаимодействуя со многими внутриклеточными взаимодействующими партнерами, такими как Nm23-h2, PDK1 и B-myb.
2.1.2. STRAP-опосредованное ингибирование сигнального пути ASK1
Помимо своей роли в пути TGF- β , как обсуждалось выше, STRAP участвует в подавлении гибели клеток посредством окислительно-восстановительного взаимодействия с киназой 1, регулирующей сигнал апоптоза ( ASK1) [16].ASK1, член семейства киназ-киназ, активируемых митогенами, активируется различными стимулами, включая ROS, фактор некроза опухоли α (TNF- α ), Fas, H ₂ O ₂ и Повреждение ДНК. Активация ASK1 приводит к стимуляции сигнального пути c-Jun NH ₂ -концевой киназы (JNK) / p38, который важен для гибели клеток [23-25]. ASK1 стал ключевым регулятором апоптоза, и его инактивация может напрямую способствовать стимулированию роста клеток.Недавно мы сообщили, что STRAP взаимодействует с ASK1 и впоследствии подавляет активность ASK1. Редокс-зависимое взаимодействие ASK1 и STRAP опосредовано остатками цистеина, присутствующими в каждом из этих двух белков, Cys ¹³⁵¹ и Cys ¹³⁶⁰ в ASK1 и Cys ¹⁵² и Cys ²⁷⁰ в STRAP. Однако это взаимодействие было нарушено экзогенными стимулами, включая H ₂ O _2, TNF- α , стресс, вызванный эндоплазматическим ретикулумом (тапсигаргин) и перегрузку кальцием (иономицин).Кроме того, ASK1 фосфорилирует STRAP по Thr ¹⁷⁵ и Ser ¹⁷⁹. Фосфорилирование по этим остаткам важно для стабилизации образования комплекса между ASK1 и его негативными регуляторами, тиоредоксином и 14-3-3 и / или предотвращения образования комплекса между ASK1 и его субстратом, митоген-активируемой протеинкиназой киназой 3 (MKK3), что приводит к ингибирование передачи сигналов ASK1, регулирующих киназы JNK и p38 [16]. Соответственно, STRAP подавлял H ₂ O ₂-опосредованный апоптоз зависимым от фосфорилирования ASK1 образом путем ингибирования активности ASK1 посредством прямых межбелковых взаимодействий (рис. 2 (а)).
2.1.3. STRAP-опосредованная стимуляция сигнального пути PDK1
PDK1 — серин-треониновая киназа, которая фосфорилирует и активирует различные нижестоящие мишени, включая протеинкиназу С, рибосомную киназу S6 (S6K), киназу, индуцированную глюкокортикоидами, и AKT1, вызывая различные клеточные ответы такие как выживаемость, пролиферация и дифференцировка клеток [26–30]. STRAP был также идентифицирован как партнер связывания PDK1, взаимодействие, требующее каталитического домена PDK1. Взаимодействие между PDK1 и STRAP увеличивалось при лечении инсулином, но снижалось при лечении TGF- β 1.Более того, STRAP положительно регулирует опосредованную PI3K / PDK1 защиту от апоптоза, индуцированного TNF-α , тем самым увеличивая выживаемость клеток [17].
2.1.4. STRAP-опосредованная стимуляция роста клеток, индуцированного Nm23-h2
STRAP также регулирует пролиферацию клеток, модулируя опосредованную Nm23-h2 передачу сигналов. Nm23-h2 первоначально был идентифицирован как супрессор метастазирования из-за его низкой экспрессии в высокометастатических клеточных линиях и опухолях [31]. Помимо своей роли в качестве супрессора метастазов, Nm23-h2 также способствует пролиферации и дифференцировке клеточных линий рака шейки матки и карциномы груди и прогрессированию заболевания [32, 33].Однако механизм, с помощью которого Nm23-h2 влияет на пролиферацию клеток, неизвестен. Недавно мы сообщили, что STRAP взаимодействует с Nm23-h2 окислительно-восстановительным образом и способствует росту клеток. В клетках HaCaT спонтанно трансформированная линия клеток анеуплоидных бессмертных кератиноцитов сверхэкспрессия STRAP, но не мутанта цистеина STRAP (C152S / C270S), дефектного по связыванию с Nm23-h2, приводила к стимулированию роста клеток, индуцированного Nm23-h2 [ 15]. Эти результаты указывают на возможное участие STRAP в росте клеток, индуцированном Nm23-h2.
Таким образом, эти открытия показывают, что STRAP модулирует множество механизмов, которые способствуют снижению чувствительности клеток к апоптозу, тем самым способствуя выживанию клеток. STRAP — это ключевая сигнальная молекула, которая регулирует пролиферацию клеток, контролируя широкий спектр биологических процессов, таких как рост клеток, выживаемость клеток, остановка клеточного цикла и апоптоз (рис. 3). Функции STRAP достигаются за счет большого количества взаимодействующих партнеров и нескольких режимов регулирования.Таким образом, важным направлением будущего является выявление и характеристика дополнительных партнеров, взаимодействующих со STRAP, чтобы лучше понять, как конкретные функции STRAP выполняются через взаимодействующих партнеров.

2.2. Проапоптотическая активность STRAP в клетках
Хотя STRAP способствует выживанию и пролиферации клеток путем ингибирования апоптоза, недавние исследования показывают, что STRAP также может опосредовать гибель клеток в зависимости от стимула (рис. 3). Недавно это было подтверждено сообщениями, показывающими, что STRAP связывается с опухолевым супрессором p53 и впоследствии стимулирует опосредованную p53 транскрипционную активность [21, 22].Супрессор опухоли p53 является регулятором транскрипции; таким образом, он может регулировать экспрессию многочисленных генов-мишеней, которые вызывают остановку клеточного цикла, дифференцировку и апоптоз в ответ на различные клеточные стрессы [34]. Активность р53 модулируется различными партнерами по связыванию, которые вызывают трансактивацию генов-мишеней и различные клеточные исходы [35]. Nm23-h2 и его партнер по связыванию STRAP связываются с p53 и впоследствии усиливают опосредованную p53 транскрипцию. Активация p53 Nm23-h2 и STRAP опосредуется удалением мышиного двойного гомолога минуты 2 (Mdm2), негативного регулятора p53, из комплекса p53-Mdm2.Примечательно, что и Nm23-h2, и STRAP напрямую взаимодействуют с центральным ДНК-связывающим доменом p53 окислительно-восстановительным образом, тем самым способствуя его функциям, таким как апоптоз и остановка клеточного цикла [21]. Дополнительные исследования показывают, что окислительно-восстановительное взаимодействие STRAP с MPK38 способствует гибели клеток посредством передачи сигналов ASK1, TGF- β , p53 и PI3K / PDK1, что приводит к гибели клеток при апоптозе [14]; таким образом, эти данные указывают на то, что STRAP функционирует как проапоптотическая молекула.
3.Регуляция активности STRAP посредством фосфорилирования
Недавние исследования сообщают, что STRAP-опосредованный баланс между апоптозом и пролиферацией клеток связан с событиями фосфорилирования, и что фосфорилирование STRAP по определенным остаткам играет важную роль в определении того, пролиферирует ли клетка или умирает [14, 16]. MPK38, также известный как киназа лейциновой молнии материнского эмбриона, является членом семейства киназ, связанных с протеинкиназой, активируемой AMP. Он контролирует множество биологических процессов, включая пролиферацию клеток, выживаемость, апоптоз, онкогенез, передачу сигналов и метаболизм [36, 37].В частности, MPK38 взаимодействует с различными белками-мишенями и фосфорилирует их, тем самым регулируя их биологические функции. Напр., MPK38 фосфорилирует ASK1 по Thr ⁸³⁸ и способствует апоптозу, опосредованному ASK1 [38]. MPK38 также фосфорилирует p53 по Ser ¹⁵ [39] и белкам Smad (Ser ²⁴⁵ из Smad2, Ser ²⁰⁴ из Smad3, Ser ³⁴³ из Smad4 и Thr ⁹⁶ из Smad7) [40], в результате при стимуляции остановки клеточного цикла и апоптоза, индуцированных p53 и TGF- β , соответственно.Кроме того, MPK38 ингибирует активность PDK1 посредством фосфорилирования Thr ³⁵⁴, что снижает выживаемость клеток [41].
3.1. MPK38 регулирует активность STRAP посредством Ser
¹⁸⁸ фосфорилирования
Наше недавнее исследование показало, что MPK38 также взаимодействует с STRAP для усиления его апоптотических функций. Фосфорилирование STRAP по Ser ¹⁸⁸ с помощью MPK38 играет центральную роль в стимулировании активации MPK38-зависимой передачи сигналов ASK1, TGF- β и p53 и инактивации MPK38-зависимой передачи сигналов PI3K / PDK1, что в конечном итоге приводит к апоптотической клетке. смерть [14].Фосфорилирование STRAP по Ser ¹⁸⁸ с помощью MPK38 также влияет на образование комплексов между ASK1 и MKK3, рецепторами TGF- β и Smad3, p53 и Mdm2, а также PDK1 и AKT1, что имеет решающее значение для активации этих сигнальных путей [14]. В совокупности эти исследования предоставляют убедительные доказательства того, что STRAP может влиять на гибель клеток с помощью двух механизмов, напрямую регулируя эти сигналы и косвенно регулируя эти сигналы через MPK38 (Рисунок 2 (b)). Хотя вышеупомянутое исследование было проведено на культивируемых клетках, исследование, проведенное на мышах, продемонстрировало, что фосфорилирование STRAP по Ser ¹⁸⁸ также связано с пролиферацией и гибелью клеток посредством этих сигналов, что приводит к апоптотической гибели клеток [14].
3.2. ASK1 регулирует активность STRAP через Thr
¹⁷⁵ / Ser ¹⁷⁹ Фосфорилирование
Фосфорилирование STRAP по конкретным остаткам определяет, будет ли белок играть роль в пролиферации клеток или гибели клеток. Различные восходящие сигналы могут регулировать STRAP и активировать разные внутриклеточные сигнальные пути, что приводит к различным функциям клеток. Например, фосфорилирование STRAP по Thr ¹⁷⁵ и Ser ¹⁷⁹ с помощью ASK1 способствует выживанию клеток и пролиферации клеток за счет подавления апоптоза [16], тогда как повышенный стресс вызывает гибель клеток, которая опосредуется фосфорилированием MPK38 (Рисунок 2).Необходимы дальнейшие исследования, чтобы понять роль STRAP в пролиферации и гибели клеток.
4. Роль STRAP при раке
4.1. Опухолевая активность STRAP в развитии опухолей
4.1.1. Ингибирование сигнального пути TGF-
β с помощью STRAP
В целом баланс между клеточной пролиферацией, выживаемостью и апоптозом поддерживает клеточный гомеостаз [42]. Рак может возникнуть, когда этот баланс нарушен, либо из-за увеличения пролиферации клеток, либо из-за уменьшения гибели клеток [43].Растущее количество доказательств указывает на то, что STRAP может способствовать прогрессированию опухоли, ингибируя апоптоз и активируя пролиферацию клеток. Более того, экспрессия белка STRAP повышена в 60% колоректальных, 78% легких и 46% карцином груди [8, 11, 44]. Сверхэкспрессия STRAP в различных клеточных линиях способствует пролиферации клеток и канцерогенности в экспериментах in vitro и in vivo . Например, нокдаун эндогенного STRAP с помощью STRAP-специфичных siRNA снижает онкогенность, что явно подтверждает роль STRAP в канцерогенезе [8].Учитывая, что TGF- β действует как опухолевый супрессор в нормальных клетках, редокс-чувствительный сигнал TGF- β оказывает подавляющее опухоль эффекты TGF- β , тем самым подавляя развитие опухоли [45]. Кроме того, сверхэкспрессия STRAP ингибирует опосредованное TGF- β подавление роста за счет увеличения связывания Smad7 с рецепторами TGF- β , что индуцирует пролиферацию клеток и развитие опухоли [7]. Исследования на различных линиях раковых клеток также демонстрируют, что STRAP усиливает пролиферацию и онкогенез клеток, блокируя антипролиферативные эффекты, опосредованные передачей сигналов TGF- β .Не менее важно, что MEF STRAP ^{— / —} демонстрируют усиленную активацию транскрипции и ингибирование роста, опосредованную TGF- β . Например, сверхэкспрессия STRAP снижает индуцированное TGF- β ингибирование роста клеток и индуцирует онкогенность клеток аденокарциномы легкого (A549) и аденокарциномы толстой кишки (FET) [8], что указывает на важную роль STRAP в развитии опухоли через отрицательные регуляция подавления роста, опосредованного TGF- β .
4.1.2. Стимуляция сигнальных путей Notch и Wnt /
β -Catenin с помощью STRAP
Недавнее исследование также указывает на то, что STRAP играет роль в прогрессировании колоректального рака (CRC). Экспрессия STRAP была повышена на всех стадиях колоректального рака, а рост опухоли подавлялся у гетерозиготных мышей с нокаутом STRAP. Важно, что STRAP активирует передачу сигналов Notch путем ингибирования сборки polycomb репрессивного комплекса 2, что приводит к канцерогенезу толстой кишки [46]. STRAP также способствует передаче сигналов Wnt / β -катенин, что приводит к развитию и прогрессированию CRC.Примечательно, что STRAP связывается с GSK-3 β и стабилизирует β -катенин, ингибируя его убиквитин-зависимую деградацию, что приводит к стимуляции передачи сигнала Wnt / β -катенина в клетках CRC. В соответствии с этим наблюдением, нокдаун STRAP в клеточных линиях карциномы толстой кишки мышей ингибировал онкогенез, инвазию и метастазирование, демонстрируя, что STRAP увеличивает инвазию и метастазирование CRC частично за счет ингибирования убиквитин-зависимой деградации β -катенина и усиление передачи сигналов Wnt / β -catenin [47].
4.1.3. Подавление E-кадгерина и активности промотора p21
^Cip1 с помощью STRAP
Анализ клинических данных атласа генома рака показывает, что уровень экспрессии мРНК STRAP повышается в аденокарциноме легких с метастазами, что убедительно указывает на то, что STRAP участвует в патологии метастазы аденокарциномы легких [48]. Кроме того, STRAP ингибирует Sp1-зависимую транскрипцию, что приводит к подавлению экспрессии генов-супрессоров опухолей E-cadherin и p21 ^Cip1, тем самым способствуя прогрессированию опухоли при немелкоклеточном раке легких.Следовательно, повышенная экспрессия STRAP при раке легких способствует подавлению E-cadherin и p21 ^Cip1, что, в свою очередь, приводит к прогрессированию опухоли [49].
4.1.4. Усиление сигнального пути PDK1 с помощью STRAP
Апоптоз, основная форма клеточного самоубийства, занимает центральное место в различных физиологических процессах, включая поддержание гомеостаза в многоклеточных организмах. Подавление апоптоза может активировать факторы выживания клеток, которые способствуют непрерывной пролиферации раковых клеток [42].STRAP способствует прогрессированию опухоли за счет ингибирования апоптоза и активации выживания клеток [15, 16]. Активация передачи сигналов PDK1 участвует в пролиферации, выживании и онкогенезе клеток [50]. PDK1 также ингибирует опосредованную TGF- β остановку роста клеток и апоптоз путем прямого взаимодействия с белками Smad [51], показывая, что ингибирование PDK1 может быть полезным для подавления опухоли. Так, ингибиторы PDK1 в настоящее время проходят испытания как противоопухолевый препарат s [52, 53].STRAP также взаимодействует с PDK1 и способствует фосфорилированию субстратов PDK1, включая S6K, AKT1 и Bad, что приводит к увеличению выживаемости клеток [17]. STRAP также косвенно ингибирует остановку клеточного цикла и апоптоз, способствуя PDK1-опосредованному подавлению передачи сигналов TGF- β , что приводит к увеличению выживаемости клеток [17]. Эти результаты ясно показывают, что STRAP способствует выживанию клеток и росту клеток через PDK1, тем самым способствуя прогрессированию опухоли.
4.1.5. Было обнаружено, что стимуляция активности Nm23-h2 и ингибирование активности ASK1 с помощью STRAP
STRAP усиливает индуцированный Nm23-h2 рост клеток HaCaT посредством окислительно-восстановительного взаимодействия с Nm23-h2 [15].Ранее сообщалось, что Nm23-h2 влияет на пролиферацию и дифференцировку клеточных линий рака шейки матки и карциномы груди [32, 33], предполагая, что STRAP также может вносить вклад в прогрессирование опухолей шейки матки и груди. Однако точная природа этого механизма неизвестна, и необходимы дальнейшие исследования для оценки активности STRAP и Nm23-h2 во время прогрессирования опухоли. С другой стороны, ASK1 действует как опухолевый супрессор из-за своей способности индуцировать апоптоз клеточных линий как рака груди, так и аденокарциномы легких [54, 55].STRAP взаимодействует с ASK1, который ингибирует его киназную активность и последующий ASK1-индуцированный апоптоз, тем самым способствуя выживанию и росту клеток [16]. В целом, высокий уровень экспрессии STRAP при различных раковых заболеваниях означает, что STRAP играет роль в росте и агрессивности опухоли, и, следовательно, ингибирование STRAP может быть привлекательной терапевтической мишенью для лечения рака.
4.2. Опухолевая супрессивная активность STRAP во время онкогенеза
Сверхэкспрессия STRAP связана с прогрессированием многих различных типов опухолей, хотя некоторые исследователи сообщают о противоречивых результатах.Например, STRAP напрямую регулирует наиболее важный опухолевый супрессор, p53, в клеточных линиях рака шейки матки (HeLa), колоректальной карциномы (HCT116) и рака груди (MCF7). Сверхэкспрессия STRAP приводит к усилению апоптоза, индуцированного p53, и снижению пролиферации клеток, тогда как потеря STRAP имеет противоположные эффекты, указывая на то, что STRAP играет ключевую роль в подавлении опухоли [21, 22]. Учитывая, что p53 играет решающую роль во многих клеточных процессах, включая остановку клеточного цикла, дифференцировку, апоптоз и подавление опухоли, потеря функции p53 является общей чертой рака человека [56].Функционально STRAP и его взаимодействующий партнер Nm23-h2 напрямую связываются и стабилизируют p53 путем диссоциации Mdm2, что приводит к индукции p53-индуцированного апоптоза и остановки клеточного цикла [21]. Эти результаты показывают, что белки STRAP также несут ответственность за подавление опухоли.
Не менее важно, что PTM STRAP протеинкиназами, такими как ASK1 и MPK38, играет важную роль в определении про- или антиапоптотической функции STRAP. Напр., Фосфорилирование STRAP по Thr ¹⁷⁵ и Ser ¹⁷⁹ с помощью ASK1 необходимо для STRAP-опосредованного ингибирования ASK1-индуцированной гибели клеток [16].Напротив, MPK38-опосредованное фосфорилирование STRAP по Ser ¹⁸⁸ вносит вклад в проапоптотическую функцию STRAP путем модуляции STRAP-зависимой передачи сигналов ASK1, TGF- β , p53 и PI3K / PDK1 [14]. Однако необходимы дальнейшие исследования для выяснения механизмов, регулирующих функцию STRAP.
5. Выводы
STRAP является даже более сложным регулятором клеточных функций, чем считалось ранее, и его роль в регуляции каскада редокс-чувствительного TGF- β и стимулировании роста клеток продолжает изучаться.Помимо его роли в каскаде TGF- β , быстро появляются дополнительные подробности о функции и регуляции STRAP. Например, недавние исследования показывают, что STRAP играет решающую роль в регуляции как пролиферации клеток, так и гибели клеток в ответ на различные стрессы, сопровождаемые изменениями в окислительно-восстановительном статусе, посредством взаимодействия с множеством белков-мишеней. Исследования STRAP-опосредованной окислительно-восстановительной передачи сигналов, которая способствует пролиферации или гибели клеток, а также исследования значимости фосфорилирования в этих событиях, в лучшем случае являются предварительными.Следовательно, необходимы дальнейшие исследования для выявления дополнительных сайтов фосфорилирования STRAP, участвующих в регуляции пролиферации и гибели клеток.
Хотя недавние исследования сообщают о противоречивых результатах о роли STRAP в раке, опухолевые эффекты STRAP, включая индукцию пролиферации клеток и выживание клеток и ингибирование апоптоза, наблюдались во многих раковых клетках. Однако подавляющие опухоль эффекты STRAP еще не подтверждены в раковых тканях, хотя проапоптотическая функция STRAP наблюдалась в нормальных и раковых клетках.Следовательно, необходимы дальнейшие исследования по изучению двойной функции STRAP, а также его регуляции с помощью редокс-зависимой передачи сигналов, которая вызывает либо гибель клеток, либо пролиферацию клеток при раке человека, поскольку они могут способствовать разработке более эффективных методов лечения рака.
Конфликт интересов
Авторы заявили об отсутствии конфликта интересов.
Благодарности
Работа поддержана грантом Национального исследовательского фонда Кореи (2015R1A2A2A01006098).
«Серин / треониновая протеинкиназа при раке молочной железы» Даниэла Мирическу, Камелия, Кристина Диакону и др.
Авторы
Даниэла Мирическу , ФАКУЛЬТЕТ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ, ОТДЕЛЕНИЕ БИОХИМИИ, БУХАРЕСТ, РУМЫНИЯ
Camelia Cristina Diaconu , CAROL DAVILA УНИВЕРСИТЕТ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ОБСЛУЖИВАНИЯ
Константин Стефани , КАРОЛ ДАВИЛА УНИВЕРСИТЕТ МЕДИЦИНЫ И АПТЕКИ, ОТДЕЛЕНИЕ СЕМЕЙНОЙ МЕДИЦИНЫ, БУХАРЕСТ, РУМЫНИЯ
Ана Мария Александра Станеску , КАРОЛ ДАВИЛА МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ МЕДИЦИНСКОГО УНИВЕРСИТЕТА 24, МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ 24 КАРОЛ ДАВИЛА
Александра Тотан , ФАКУЛЬТЕТ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ, ОТДЕЛЕНИЕ БИОХИМИИ, БУХАРЕСТ, РУМЫНИЯ
Иоана Руксандра Русу , КАРОЛЛЬТРИЯ ДАВИЛА БАЗОР МЕДИЦИНСКОГО И МЕДИЦИНСКОГО ОБРАЗОВАНИЯ, ФАРМАЦИЯ 9 МЕДИЦИНЫ И МЕДИЦИНЫ 37
Овидиу Габриэль Брату , ЦЕНТРАЛЬНАЯ ЧАСТНАЯ ВОЕННАЯ БОЛЬНИЦА УНИВЕРСИТЕТА КАРОЛА ДАВИЛЫ, БУХАРЕСТ, РУМЫНИЯ
Дан Спину , УНИВЕРСИТЕТ КАРОЛ ДАВИЛА, ЦЕНТРАЛЬНАЯ ЧРЕЗВЫЧАЙНАЯ ВОЕННАЯ БОЛЬНИЦА УНИВЕРСИТЕТА, БУХАРЕСТ, ОФИС 978, РУМЫНИЯ, 915, БУХАРЕСТ, РУМЫНИЯ 924, DAVILA, 915, БУХАРЕСТ, РУМЫНИЯ, 924
DOI
10.22543 / 7674.71.P3439
Аннотация
Согласно статистическим данным, опубликованным в 2019 году, рак груди является одной из ведущих причин смерти женщин во всем мире. Сигнальный путь серин / треонинкиназы (AKT) или протеинкиназы B (PkB) активируется процессами фосфорилирования, которые в дальнейшем связаны с ростом, пролиферацией и выживанием клеток, а также с активацией метаболизма глюкозы. Мутации компонентов сигнального пути AKT (особенно PI3KCA и PTEN) наблюдались у пациентов с раком груди, что связано с резистентностью к гормональному лечению.Многие клинические испытания проверяют эффект ингибирования AKT, чтобы блокировать рост и пролиферацию клеток рака груди. Цель этого обзора — представить частоту этого неопластического заболевания, описать активацию сигнальных путей AKT, мутации, возникающие на его уровне, и ингибиторы, которые могут блокировать эту протеинкиназу.
Рекомендуемое цитирование
Мирическу, Даниэла; Дьякону, Камелия Кристина; Стефани, Константин; Станеску, Ана Мария Александра; Тотан, Александра; Русу, Иоана Руксандра; Брату, Овидиу Габриэль; Спину, Дэн; и Греабу, Мария (2020) «Сигнальный путь серин / треонинкиназы (Akt) / протеинкиназы B (PkB) при раке груди», Журнал разума и медицинских наук : Vol.

Серин треонин: STK17A (серин / треонин-протеинкиназы, 17А, ДАФ киназы, связанных с апоптозиндуцирующей протеинкиназы 1, DRAK1) (FITC) — купить онлайн

Серин Треонин — Справочник химика 21

Анализ крови на аминокислоты (48 показателей)

БИБЛИОТЕКА

Опухолевые супрессоры и мутаторные гены

Основы правильного питания — Школа здоровья — ГБУЗ Городская поликлиника 25 г. Краснодара МЗ КК

Страница не найдена |

Архив за месяц

Архивы

Метки

Молекулярные изменения при спорадическом раке яичников

Антивозрастной экспресс-уход «Ольга Ромашко Повернем время вспять» 3 в 1

Фосфорилирование серина / треонина при передаче цитокинового сигнала

Серин-треонинкиназы протеина — Базовая нейрохимия

Протеинкиназы различаются по своему клеточному и субклеточному распределению, субстратной специфичности и регуляции

Каскад митоген-активируемых протеинкиназ не зависит от второго мессенджера

Рисунок 24-3

Мозг содержит много других типов протеинкиназ, не зависящих от вторичного мессенджера.

Большинство протеин-серин-треониновых киназ подвергаются аутофосфорилированию

Границы | Осуществление лигирования серин / треонин: объем, ограничения и механистическое значение этого

Введение

Материалы и методы

Инструменты

Твердофазный синтез пептидов (Boc Chemistry)

Озонолиз

Твердофазный синтез пептидов (Fmoc Chemistry)

Ser / Thr лигирование

Результаты

Эффект незащищенного лизина боковой цепи

Эффект лигирующих аминных кислот

Ацидолиз

Обсуждение

Заявление о конфликте интересов

Благодарности

Список литературы

активности серин / треонинкиназы протеина | SGD

Аннотации

Куратор вручную

Высокая пропускная способность

Вычислительный

протеина серин-треонинкиназы | Антиген STK11 | STK16

О серин-треониновой протеинкиназе / STK:

Двойная роль белка, ассоциированного с рецептором серин-треонинкиназы (STRAP) в редокс-чувствительных сигнальных путях, связанных с развитием рака

1. Введение

2. Регуляция активности STRAP посредством белок-белковых взаимодействий

2.1. Антиапоптотическая активность STRAP в клетках

2.1.1. STRAP

2.1.2. STRAP-опосредованное ингибирование сигнального пути ASK1

2.1.3. STRAP-опосредованная стимуляция сигнального пути PDK1

2.1.4. STRAP-опосредованная стимуляция роста клеток, индуцированного Nm23-h2

2.2. Проапоптотическая активность STRAP в клетках

3.Регуляция активности STRAP посредством фосфорилирования

3.1. MPK38 регулирует активность STRAP посредством Ser

3.2. ASK1 регулирует активность STRAP через Thr

4. Роль STRAP при раке

4.1. Опухолевая активность STRAP в развитии опухолей

4.1.1. Ингибирование сигнального пути TGF-

4.1.2. Стимуляция сигнальных путей Notch и Wnt /

4.1.3. Подавление E-кадгерина и активности промотора p21

4.1.4. Усиление сигнального пути PDK1 с помощью STRAP

4.1.5. Было обнаружено, что стимуляция активности Nm23-h2 и ингибирование активности ASK1 с помощью STRAP

4.2. Опухолевая супрессивная активность STRAP во время онкогенеза

5. Выводы

Конфликт интересов

Благодарности

«Серин / треониновая протеинкиназа при раке молочной железы» Даниэла Мирическу, Камелия, Кристина Диакону и др.

Авторы

DOI

Аннотация

Рекомендуемое цитирование

Добавить комментарий Отменить ответ